菊花中绿原酸、木犀草苷和3，5-O-双咖啡酰基奎宁酸检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006 165163 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006 165163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 菊花分析 菊花的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为菊科植物菊Chrysanthemum morifolium Ramat. 的干燥头状花序。9~11月花盛开时分批采收，阴干或焙干，或熏，蒸后晒干。药材按产地和加工方法不同，分为“毫菊”、、“除菊”、、““贡菊””、 “杭菊”。 【功能与主治】散风清热，平肝明目，清热解毒。用于风热感冒，头痛眩晕，目赤肿痛，眼目昏花，疮痈肿毒。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸溶液液流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为348nm。理论板数按3，5-O-双咖啡酰基奎宁酸峰计算应不低于8000。 时间(分钟) 流动相A(%) 流动相B(%) 0~11 10-18 90→82 11~30 18→20 82→80 30~40 20 80 对照品溶液的制备：取绿原酸原照品、木犀草苷对照品、3，5-0-双咖啡酰基奎宁酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加70%甲醇制成制1mL含绿原酸35 ug， 木犀草苷25 ng， 3，5-0-双咖啡酰基奎宁酸80 ug的混合溶液，即得(10℃以下保存)。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过一号筛)约0.25 g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇25 mL，密塞，称定重量，超声处理(功率300W，频率45 kHz)40分钟，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分分精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5pL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含绿原酸(C，HO，)不得少于0.20%，含木犀草苷(C)HzoO)不得少于0.080%，含3，5-0-双咖啡酰基奎宁酸(C，H0)不得少于0.70%。 菊花 样品来源：本品为菊科植物菊Chrysanthemum morifolium Ramat. 的干燥头状花序。9~11月花盛开时分批采收，阴干或焙干，或熏，蒸后晒干。药材按产地和加工方法不同，分为“毫菊”、 “除菊”、、“贡菊”、 “杭菊”。产地：浙江。 对照品：绿原酸(成都曼思特生物科技有限公司，批号：A0022，含量：98%)， 木犀草苷(上海同田生物技术有限公司，批号：10020321，含量：98%)， 3，5-二咖啡酰基奎宁酸(成都曼思特生物科技有限公司，批号：A0025，含量：91%)。 对照品溶液的制备：取绿原酸对照品、木犀草苷对照品、3，5-0-双咖啡酰基奎宁酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加70%甲醇制成每1mL含绿原酸35 ug，木犀草苷25 pg，3，5-O-双咖啡酰基奎宁酸80 ug的混合溶液，即得(10℃以下保存)。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过一号筛)0.2512g，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇25 mL， 密塞，称定重量，超声处理40分钟，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 时间(分钟) 流动相A(%) 流动相B(%) 0~2.5 10→18 90→82 2.5~6.5 18一20 82-80 6.5~6.6 20→50 80→50 6.6~10 50 50 10~11 50→10 50→90 色谱柱： Shim-pack XR-ODS Ⅱ (3.0×75 mm， 2.2 pm) 仪器配置： 流动相：以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱； 柱温：30℃ 检测波长：348 nm 采集频率：40Hz UFLC-20ADXR 高压泵SPD-M20A二极管阵列紫外可见光半微量检测器CTO-20AC柱温箱CBM-20A系统控制器SIL-20AC 自动进样器 流速：1.2 mL/min 进样量： 4pL 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 绿原酸 1.620 124943 47541 9714 1.19 木犀草苷 4.295 182655 51385 36136 1.13 3，5-O-双咖啡酰基奎宁酸 5.473 316741 62587 28324 1.13 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006 165163绿原酸标准曲线 Area 重复性数据如下： 绿原酸 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 1.620 124943 1.623 67236 2 1.620 124466 1.622 66967 3 1.620 124571 1.621 67278 Average 1.620 124660 1.622 67160 RSD% 0.00 0.20 0.06 0.25 3，5-O-双咖啡酰基奎酸酸标准曲线 3.5-0-双咖啡酰基奎宁酸 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 5.473 316741 5.475 220903 2 5.472 316385 5.467 220728 3 5.475 316235 5.468 220878 Average 5.473 316454 5.470 220836 RSD% 0.03 0.08 0.08 0.04 木犀草苷标准曲线 峰Area面 积 木犀草苷 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 4.295 182655 4.296 77078 2 4.294 182079 4.291 76796 3 4.294 182043 4.290 76750 Average 4.294 182259 4.292 76875 RSD% 0.01 0.19 0.07 0.23 浓度 mg/L 色谱柱：Shim-pack XR-ODS II (3.0 x 75 mm, 2.2um) 流动相：以乙腈为流动相A , 以0.1%磷酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱；柱温：30°C 检测波长：348 nm 采集频率：40 Hz流速：1.2 mL/min进样量：4ul