熟地黄中毛蕊花糖苷检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 熟地黄分析 熟地黄的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为生地黄的炮制加工品。 【功能与主治】滋阴补血，益精填髓。用于肝肾阴虚，腰膝酸软，骨蒸潮热，盗汗遗精，内热消渴，血虚萎黄，心悸怔忡，月经不调，崩漏下血，眩晕，耳鸣，须发早白。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%冰醋酸溶液(16：84)为流动相；检测波长为334 nm。理论板数按麦角甾苷峰计算应不低于5000。 对照品溶液的制备：取麦角甾苷对照品适量，精密称定，加入流动相，制成每1mL含10ug的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品最粗粉2g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入甲醇100 mL， 称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液50 mL， 减压回收溶剂近干，残渣用流动相溶解，转移至10mL量瓶中，并用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液溶20pL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 2.熟地黄药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中熟地黄的含量测定以麦角甾苷为质量评价依据， 其在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：在流动相组成为乙腈-0.1%冰醋酸溶液系统时，流动相的比例对麦角甾苷及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相乙腈的比例在15%左右时，其分离度最好，熟地黄色谱图中杂质峰较少且与麦角甾苷相比含量很低，因此选择乙腈比例在14~17%(v/v)之间均可以获得较好的分离度及分析效果；柱温对麦角甾苷的保留时间及与相邻色谱峰的分离度有一定影响，柱温在30~35℃均能满足分析的要求。经过考察，在流动相比例为乙腈-0.1%冰醋酸溶液(15：85)，柱温30℃的色谱条件下，能得到较满意的分析效果。使用Inertsil ODS-4(4.6×250 mm， 5 pm)柱亦可得到良好分析效果。 熟地黄 样品来源：本品为生地黄的炮制加工品。产地：河北 对照品：毛蕊花糖苷(成都曼斯特生物科技有限公司，批号：A0533，含量：98%) 供试品溶液的制备：取本品最粗粉2g， 精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入甲醇100mL， 称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液50 mL，减压回收溶剂近干，残渣用流动相溶解， 转移至10mL量瓶中，并用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。 .对照品溶液的制备：取麦角甾苷对照品适量，精密称定，加入流动相，制成每1mL含10pg的溶液，即得。 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 流动相：乙腈-0.1%冰醋酸溶液(15：85) 推荐使用条件范围： 柱滌温：30℃检测波长：334 nm流 速：1.0 mL/min柱温：35~40℃进样量：10pL检测波长：334nm仪器配置：流 速：：1.0 mL/minLC-20ADXR高压泵SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器DGU-20A， 脱气机CTO-20AC柱温箱CBM-20A系统控制器SIL-20AC 自动进样器 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×250 mm， 5pm) 流动相：乙腈-0.1%冰醋酸溶液(14~17：83~86) 对照品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 毛蕊花糖苷 51.369 1521425 23561 14460 1.11 毛蕊花糖苷标准曲线 重复性数据如下： 毛蕊花糖苷 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 51.536 1526041 50.919 1642339 2 51.369 1521425 50.823 1614864 3 50.84 1525692 50.562 1617506 Average 51.249 1524386 51.435 1624903 RSD% 0.71 0.17 0.30 0.93 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-3 4.6x250x5um流动相：乙腈-0.1%冰醋酸溶液(l5:85)柱温：30℃检测波长：334 nm流速：1.0 mL/min进样量：10ul