娑罗子中七叶皂苷检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：400611(65163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 娑罗子分析 娑罗子的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为七叶树科植物七叶树Aesculus chinensis Bge.、浙江七叶树 Aesculus chinensis Bge. var. chekiangensisHu et Fang) Fang或天师栗 Aesculus wilsonii Rehd.的干燥成熟种子。秋季果实成熟时采收，除去果皮，晒干或低温干燥。 【功能与主治】疏肝理气，和胃止痛。用于肝胃气滞，胸胸胀闷，胃脘疼痛。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(40：60)为流动相；检测波长为224 nm。理论板数按特女贞苷峰计算应不低于4000。 对照品溶液的制备：精密称取七叶皂苷钠对照品(已标示七叶皂苷A含量)适量，加甲力制成每1mL含七叶皂苷钠1 mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约1 g，精密称定，置索氏提取器中，加乙醚，加热回流1小时，弃去乙醚液，药渣连同滤纸筒挥干溶剂后，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，超声处理(功率250 W， 频率33 kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25 mL， 置蒸发皿中，于40℃水浴上浓缩至适量，转移至10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10uL，注入液相色谱仪，测定与对照品中七叶皂苷A位置相应峰的峰面积计算，即得。 2.娑罗子药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中娑罗子的含量测定以七叶皂苷A为质量评价依据， 其在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：在流动相组成为甲醇-水系统时，流动相的比例对七叶皂苷A及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相甲醇的比例在35%左右时，其分离度最好，选择甲醇比例在35~40%(v/v)之间均可以获得较好的分离度及分析效果；柱温对七叶皂苷A的保留时间及与相邻色谱峰的分离度影响较小。经过考察，在流动相比例为甲醇-水(35：65)，柱温35℃的色谱条件下，能得到较满意的分析效果。使用Inertsil ODS-4(4.6×150 mm， 5 um)柱亦可得到良好分析效果。 娑罗子 样品来源：本品为七叶树科植物天师栗 Aesculus wilsonii Rehd.的干燥成熟种子。秋季果实成熟时采收，除去果皮，晒干或低温干燥。产地：安徽 对照品：七叶皂苷A(中国药品生物制品检定所，批号：100346-200402，含量：98%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约1g， 精密称定，置索氏提取器中，加乙醚，加热回流1小时，弃去乙醚液，药渣连同滤纸筒挥干溶剂后，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，超声处理(功率250W， 频率33kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25mL， 置蒸发发中， 于40℃水浴上浓缩至适量，转移至10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：400611(65163 对照品溶液的制备：精密称取七叶皂苷对照品(已标示七叶皂苷A含量)适量，加甲醇制成每1 mL含七叶皂苷钠l mg的溶液，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-3 (4.6×150 mm，5 pm) 推荐使用条件范围： 流动相：甲醇-水(35：65)色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150 mm， 5 um)柱温：35℃流动相：：甲醇-水(35~40：60~65)检测波长：224nm柱 温：35~45℃流 速：1.0 mL/min检测波长：224nm进样量： 10pL流 速：1.0mL/min仪器配置：LC-20ADXR高压泵SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器DGU-20A，脱气机CTO-20AC 柱温箱CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC自动进样器 对照品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 七叶皂苷A 23.929 1979345 47024 7420 0.97 七叶皂苷A标准曲线 重复性数据如下： 七叶皂苷A No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 23.988 1979672 24.423 2642316 2 23.929 1979345 24.422 2676946 3 23.887 1978302 24.369 2673445 Average 23.935 1979106 24.405 2664236 RSD% 0.22 0.04 0.13 0.72 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-3 (4.6 x 150 mm, 5um)流动相：甲醇-水(35:65)柱温：35℃检测波长：224 nm流速：1.0 mL/min进样量：10ul