左乙拉西坦中四丁基铵检测方案(离子色谱仪)

400 650 5118(支持手机用户) 钟乃飞 赛默飞世尔科技(中国)有限公司 关键词 抑制型电导；离子色谱； 左乙拉西坦； 四丁基溴化铵 Keywords： Suppressed Conducitivity； Ion chromatography； Levetiracetam；Tetrabutylammonium； 引言 左乙拉西坦的化学名称为(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺，是一种新型吡咯烷酮衍生物型抗癫痫药物。左乙拉西坦是20世纪90年代经美国食品药品管理局(FDA)批准应用于临床的一种新型抗癫痫药物(antiepilepticdrugs， AEDs)，其结构和作用机制均与已上市的其他抗癫痫药物不同，具有较强的抗癫痫作用1.21。四丁基溴化铵是在左乙拉西坦的合成过程中作为相转移催化剂使用；原料药的合成工艺准则要求必须要严格控制其残留量量。 结果和讨论 测试条件 色谱条件优化 仪器：TThermoFisher ICS-900系统； 分析柱： lonPac SCS1(250×4mm P/N： 061521) 保护柱： lonPac SCG1(50×4mm P/N： 061523)； 柱温：30℃； 流速：1.00mL/min； 定量环：200pL； 淋洗液：5mmol/L MSA+35%乙腈(v：v)； 检测方式：抑制型电导检测器， ASRS 300型(4mm)电化学自再生抑制器，外接水电抑制，抑制器电流为15mA。 称取0.50g(精确到0.1mg) 样品到10mL容量瓶中，过0.22um滤膜后进样分析。 四丁基胺离子保保很强，在常规的CS12A的柱子上很难冲洗出来，选择柱容量较小的SCS1作为分析柱，在3 mmol/L MSA的标准淋洗液条件下也很难冲洗出来，最后选择在淋洗液中添加35%的乙腈作为改进剂，在该淋洗液条件下，四丁基胺峰型好，保留时间却到25分钟才出峰，且常规六种阳离子10分钟之前都全部冲洗出来，基本对四丁基胺的检测无干扰，所以最后选择加大MSA的浓度到5mmol/L，四丁基胺根离子的出峰时间在16分钟左右。因为非抑制电导检测淋洗液背景较高，噪音也大，本身四丁基胺的响应值就低，为了能到达检测要求，尝试使用抑制电导的方式检测，因为淋洗液中使用了35%的有机溶剂改进剂；所以抑制器的抑制方式选择外接水的模式；最终选择5mmol/L MSA+35%乙腈作为淋洗液，外接水电抑制模式的电导检测。在该条件下，200uL的进样量，四丁基胺的检出限可以做到8ug/L， 完全能够满足左乙拉西坦中残留的四丁基胺根离子的检测要求。图1是四丁基胺标准溶液的色谱图。 图1. 1.0mg/L 四丁基胺标准溶液的色谱图 方法的线性关系、检出限和重复性 分别稀释配制0.05、0.10、0.20、0.50、1.0、2.0、5.0mg/L的四丁基胺离子的标准溶液。按照浓度从低到高的顺序进行测定，四丁基胺根离子的质量浓度X在0.05~5.0mg/L范围内分别与对应的色谱峰面积Y呈线性关系。六氟锑酸根离子线性回归方程为：Y=0.0533X-0.0038，线性相关系数为0.999。 在本文所选择的色谱条件下，以信噪比(S/N=3)计算检出限，四丁基胺的检出限为8.01 pg/L。 对标准溶液重复进样7次，其保留时间的相对标准偏差小于0.10%，峰面积的相对标准偏差小于1.01%，峰高的相对标准偏差小于1.60%。 3.4样品测定及加标回收率试验 用本方法可以测定左乙拉西坦样品中残留的四丁基胺根的含量。称取0.50g的样品，溶解稀释后过0.22pm后按照相同的色谱条件进行分析。并对样品进行加标回收实验考查方法的可行性。分析结果如表1所示。 组分 含量(mg/L) 加入量 (mg/L) 测得量(mg/L) 回收率 (%) 四丁基胺 0.0584 0.100 0.1509 92.5 0.0584 0.100 0.1501 91.7 0.0584 0.100 0.1516 93.2 结论 文中建立了一套测定左乙拉西坦原料药中四丁基胺的离子色谱方法，样品中基体不影响待测物质的准确分析。待测物四丁基胺在SCS1上的峰形很对称，方法分析速度快，操作简便，灵敏度等均可完全满足此类样品测定的要求。 ( [1] 马涛，钱江华，祝晓光，等，左乙拉西坦片健 康人体药动学[J]中国医院药学杂志，2007，27 (7)： 8 58-861 ) ( 2] 李仁勇，王昌钊，梁立娜.离子色谱法测定左乙拉西坦原料药中N-甲基苄胺[J]第十四届全国离子色谱年会会议论文集. ) ( 3] N.H.Subramanian， P. Manigandan， R.G. Jeevan，etal. Ion Chromatographic Determination ofResidual Phase Transfer Catalyst in A ctivePharmaceutical Ingredient.[J]. Journal ofChromatographic Science，2009， 47：540-544 ) 免费服务热线：1800810 5118