夏天无中原阿片碱和盐酸巴马汀检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 夏天无分析 夏天无的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为罂粟科植物伏生紫堇 Corydalis decumbens (Thunb.) Pers. 的干燥块茎。春季或初夏出苗后采挖，除去茎、叶及须根，洗净，干燥。 【功能与主治】活血止痛，舒筋活络，怯风除湿，用于中风偏瘫，头痛，跌扑损伤，风湿痹痛 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-三乙胺酸醋溶液(取三乙胺8 mL， 冰醋酸30mL， 加水稀释至1000 mL)(18：82)为流动相；检测波长为289 nm。理论板数按原阿片碱峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备：精密称取原阿片碱对照片10 mg， 置50mL量瓶中，加1%的盐酸溶液5 mL使溶解，再加50%甲醇稀释至刻度，摇匀。精密量取5 mL， 置25mL量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每1mL含阿片碱40 ug)。另取盐酸巴马汀10 mg，精密称定，置于100 mL容量瓶中，加甲醇溶解至刻度，精密量取5 mL， 置25 mL量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每1mL含盐酸巴马汀20 ug)。 供试品溶液的制备：取本品粗粉约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50mL， 称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10~20uL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含原阿片碱(CzH，NO，)不得少于0.30%。 2. 夏天无药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中夏天无的含量测定以原阿片碱和盐酸巴马汀为质量评价依据，其在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：在流动相组成为乙腈-三乙胺醋酸系统时，流动相的比例对原阿片碱和盐盐巴马汀及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相甲醇的比例在20%左右时，其分离度最好，夏天无色谱图中杂质峰较少，因此选择原阿片碱和盐酸巴马汀例在20~30%(v/v)之间均可以获得较好的分离度及分析效果；柱温对原阿片碱和盐酸巴马汀的保留时间及与相邻色谱峰的分离度影响很小。经过考察，在流动相比例为甲醇-水(20：80)，柱温35℃的色谱条件下，使用Inertsil ODS-3(4.6×150 mm，5 uml柱能得到较满意的分析效果。使用Inertsil ODS-4(4.6×150 mm， 5pm)柱亦可得到良好分析效果。 夏天无 样品来源：本品为罂粟科植物伏生紫堇 Corydalis decumbens (Thunb.) Pers. 的干燥块茎。春季或初夏出苗后采挖，除去茎、及复根，洗净，干燥。产地：江西。 对照品： 片碱和盐酸巴马汀(中国药品生物制品物定所，批号：110752-200511，含量：98%)。 供试品溶液的制备：取本品粗粉约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50mL， 称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：精密称取原阿片碱对照品10 mg， 置50 mL量瓶中，加1%的盐酸溶液5 mL使溶解，再加50%甲醇 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 稀释至刻度，摇匀。精密量取5 mL， 置25mL量瓶中， 加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每1mL含原阿片碱40pg)。另取盐酸巴马汀10 mg，精密称定，置于100mL容量瓶中，加甲醇溶解至刻度，精密量取5 mL，置25mL量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每1mL含盐酸巴马汀20 pg) 色谱柱： Inertsil ODS-3 (4.6×150 mm， 5 um) 推荐使用条件范围： 流动相：乙腈-三乙胺酸醋溶液(18：82)色谱 柱： In ter si l O DS -3 (4. 6× 150 m m， 5 pm) 柱温：35℃ 流动相：乙腈-三乙胺酸醋溶液(18：82) 检测波长：原阿片碱289 nm， 盐酸巴马汀345 nm 柱主温：35~40℃ 流速：1.0mL/min 检测波长：原阿片碱289nm， 盐酸巴马汀345 nm 进 样 量 ： 1 0 p L 流 速：：1.0mL/min 仪器配置： LC-20ADXR 高压泵 SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 DGU-20A脱气机 CTO-20AC 柱温箱 CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC 自动进样器 对照品 对照品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 原阿片碱 13.281 779072 31776 6593 1.24 盐酸巴马汀 36.702 482174 7277 7334 1.19 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 原阿片碱标准曲线 重复性数据如下： 原阿片碱 No。 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 13.398 1708832 13.192 795434 2 13.403 1721114 13.187 791866 3 13.454 1725139 13.190 795698 Average 13.418 1718361 13.189 794332 RSD% 0.23 0.49 0.01 0.26 盐酸巴马汀标准曲线 峰 Area(x100.000L 盐酸巴马汀 No。 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 36.619 866915 36.400 668631 2 36.533 870516 36.394 665230 3 36.504 867932 36.419 666720 Average 36.552 868454 36.404 666860 RSD% 0.16 0.21 0.03 0.25 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-3 (4.6 x 150 mm, 5um)流动相：乙腈-三乙胺酸醋溶液(18:82)柱温：35℃检测波长：原阿片碱289 nm ,盐酸巴马汀345 nm流速：1ml/min进样量：10ul