银杏叶中异鼠李素 、山柰酚和槲皮素检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 银杏叶 银杏叶的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L. 的干燥叶。秋季叶尚绿时采收，及时干燥。 【功能与主治】活血化瘀，通络止痛，敛肺平喘，化浊降脂。用于淤血阻络，胸痹心痛，，中风偏瘫，肺虚咳喘，高脂血症。 【含量测定】 总黄酮醇苷 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4%磷酸溶液(50：50)为流动相；检测波长为360 nm。理论板数按槲皮素峰计算应不低于2500。 对照品溶液的制备：取取皮素对照品、山山素对照品、异鼠李素对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成成1mL含榭皮素30 pg、山奈素30 pg、异鼠李素20pg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品中粉约1g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷回流提取2小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥干，加甲醇回流提取4小时，提取液蒸干，残渣加甲醇-25%盐酸溶液(4：1)混合溶液25 mL， 加热回流30分钟，放冷，转移至50 mL量瓶中，并加甲醇至刻度，摇匀，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 pL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 2.银杏叶药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 ，《中国药典》中银杏叶的含量测定以定皮素、山奈素和异鼠李素为质量评价依据，其在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：检测波长长360 nm时对照品吸收接近最强，色谱图较优；在流动相组成为甲醇-0.4%磷酸溶液系统时，流动相的比例对榭皮素、山奈素和异鼠李素及相邻色谱峰的分离离有显著的影响，流动相甲醇的比例在45%左右时，其分离度最好，选择甲醇比例在45~50%(v/v)之间均得以获得较好的分离度及分析效果；柱温对檞皮素、山奈素和异鼠李素的保留也有一定影响，在35到45℃时样品分离度较好。经过考察，在流动相比例为甲醇-0.4%磷酸溶液(45：55)， 柱温35℃的色谱条件下，能得到较满意的分析效果。使用Inertsil ODS-4柱亦可得到较好分析效果。 银杏叶 样品来源：本品为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L. 的干燥叶。产地：北京。 对照品：异鼠李素(中国药品生物制品检定所，批号：110860-200406，含量：99%) 山奈酚(上海同田生物技术有限公司，批号：08050421，含量：99%) 榭皮素(上海同田生物技术有限公司，批号：09120411，含量：99%) 供试品溶液的制备：取本品中粉约1g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷回流提取2小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥干，加甲醇回流提取4小时，提取液蒸干，残渣加甲醇-25%盐酸溶液(4：1)混合溶液25 mL，加热回流30分钟，放冷， 转移至50 mL量瓶中，并加甲醇至刻度，摇匀，即得。 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 对照品溶液的制备：取檞皮素对照品、山奈素对照品、异鼠李素对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1mL含梅皮素30 pg、山奈素30 pg、异鼠李素20 pg的溶液，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-3 (4.6×150 mm， 5pum) 推荐使用条件范围： 流动相：甲醇-0.4%磷酸溶液(45：55) 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150 mm， 5 pm) 柱温：35℃ 流动相：甲醇-0.4%磷酸溶液(45：55~50：50) 检测波长：360 nm 柱温：35~45℃ 流 速：1.0mL/min 检测波长：360nm 进样量： 10uL 流 速：1.0mL/min 仪器配置： LC-20ADXR 高压泵 SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器DGU-20A，脱气机CTO-20AC 柱温箱CBM-20A 系统控制器SIL-20AC 自动进样器 对照品 对照品 对照品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 槲皮素 20.255 1765653 45680 6335 1.12 山奈素 36.370 1552722 24705 7616 1.07 异鼠李素 41.764 1388941 19162 7691 1.07 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 皮素的标准曲线 重复性数据如下： 梅皮素 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 20.255 1765653 20.031 557951 2 20.015 1790631 20.087 559474 3 20.012 1811611 20.068 547200 Average 20.094 1789298 20.062 554875 RSD% 0.57 1.05 0.12 0.99 异鼠李素的标准曲线 异鼠李素 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 41.764 1388941 43.836 281086 2 42.105 1390710 43.824 275261 3 42.490 1370068 43.898 269526 Average 42.120 1383240 43.853 275291 RSD% 0.71 0.68 0.07 1.71 山奈素的标准曲线 山奈素 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 36.370 1552722 37.672 810060 2 36.199 1564440 37.735 780955 3 36.429 1563766 37.754 797945 Average 36.333 1560309 37.720 796320 RSD% 0.27 0.35 0.09 1.50 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱： Inertsil ODS-3 (4.6 x 150 mm, 5um)流动相：甲醇-0.4%磷酸溶液(45:55)柱温：35℃检测波长：360nm流速：1.0 mL/min进样量：10 ul