巴豆中巴豆苷检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 巴豆分析 巴豆的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为大戟科植物巴豆Croton tiglium L. 的成熟干燥果实。秋季果实成熟时采摘，堆置2~3天，摊开，干燥。【功能与主治】外用蚀疮。用于恶疮疥癣，疣痣。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-甲醇-水(1：4：95)为流动相；检测波长为292 nm。理论板数按巴豆苷峰计算应不低于5000。 对照品溶液的制备：精密称取巴豆苷对照品适量，加水制成每1mL含60 pg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品种仁粉末(过三号筛)0.3 g， 精密称定，置索氏提取器中，加乙醚50 mL， 加热回流3小时， 弃去乙醚液，药渣挥干溶剂，连同滤纸桶移入具塞锥形瓶中，精密加入水50mL，称定重量，超声(功率300W， 频率24Hz)提取20分钟，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10pL， 主入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含巴豆苷(C，HN，0，)不得少于0.80%。 2.巴豆药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中巴豆的含量测定以巴豆苷为质量评价依据，其在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：在流动相组成为乙腈-甲醇-水系统时，流动相的比例对巴豆苷及相邻色谱峰的分离离有显著的影响，流动相甲醇的比例在4%左右，乙腈的比例在1%左右时，水的比例在95%左右时，其分离度最好，巴豆色谱图中杂质峰较少，因此选择甲醇的比例在4%左右，乙腈的比例在1%左右时，水的比例在95%左右均可以获得较好的分离度及分析效果；柱温对巴豆苷的保留时间及与相邻色谱峰的分离度影响很小。经过考察，在流动相比例为乙腈-甲醇-水(1：4：95)，柱温35℃的色谱条件下，能得到较满意的分析效果。使用Inertsil ODS-4(4.6×150 mm， 5um)柱亦可得到良好分析效果。 巴豆 样品来源：本品为大戟科植物巴豆Croton tiglium L.的成熟干燥果实。产地：河北。 对寸品：巴豆苷(中国药品生物制品检定所，批号：110752-200511，含量：98%)。 供试品溶液的制备：供试品溶液的制备取本品品仁粉末(过三号筛)0.3 g，精密称定，置索氏提取器中，加乙醚50 mL，加热流3小时，弃去乙醚液，药渣挥干溶剂，连同滤纸桶移入具塞锥形瓶中，精密加入水50mL， 称定重量，超声(功率300， 率率24Hz)提取20分钟，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。 对照品溶液的制备：精密精取巴豆苷对照品适量，加水制成每1mL含60ug的溶液，即得。 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 色谱柱： Inertsil ODS-3(4.6x150 mm， 5 pm) 推荐使用条件范围： 流动相：乙腈-甲醇-水(1：4：95) 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150 mm， 5 um) 柱温：35℃ 流动相：乙腈-甲醇-水(3-1：2-4：93-95) 检测波长：292 nm 柱温：35~40℃ 流 速：：11.0mL/min 检测波长：292 nm 进样量： 10uL 流 速：1.0mL/min 仪器配置： LC-20ADXR高压泵 SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 DGU-20A，脱气机 CTO-20AC柱温箱 CBM-20A系统控制器 SIL-20AC 自动进样器 对照品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 巴豆苷 3.881 381320 39947 4176 1.63 巴豆苷标准曲线 重复性数据如下： 巴豆苷 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 3.899 4843132 3.881 395081 2 3.894 4839076 3.878 393015 3 3.880 4832315 3.883 394475 Average 3.891 4838174 3.881 394190 RSD% 0.25 0.11 0.06 0.27 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-3(4.6 x 150 mm, 5um)流动相：乙腈-甲醇-水(l:4:95)柱温:35 ℃检测波长：292nm流速：1ml/min进样量：10ul