蜂胶中高良姜素和白杨素检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 蜂胶分析 蜂胶的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为蜜蜂科昆虫意大利蜂Apis mellifera L. 的干燥分泌物。多于夏季从蜂箱中收集，除去杂质。 【功能与主治】补虚弱，化浊脂，止消渴；外用解毒消肿，收敛生肌。用于体虚早衰，高脂血症，消渴；外治皮肤皲裂，烧烫伤。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.15%磷酸溶液(64：36)为流动相；检测波长为268 nm。理论板数按白杨素峰计算应不低于6000。 对照品溶液的制备：取白杨素对照品、高良姜素对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1mL含白杨素30 pg、高良姜素20 pg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过二号筛)约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，密塞，称定重量，超声处理(功率250W， 频率40 kHz)45分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10uL，注入液相色谱仪，测定，即得。 2.蜂胶药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中蜂胶的含量测定以高良姜素和白杨素为质量评价依据，其在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：检测波长在268 nm时对照品吸收接近最强，色谱图较优；在流动相组成为甲醇-0.15%磷酸系统时，流动相的比例对高良姜素和白杨素及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相甲醇的比例在64%左右时，其分离度最好，选择甲醇比例在60~65%(v/v)之间均可以获得较好的分离度及分析效果；柱温对高良姜素和白杨素的保留也有一定影响，在25到30℃时样品分离度较好。经过考察，在流动相比例为甲醇-0.15%磷酸溶液(64：36)，柱温25℃的色谱条件下，能得到较满意的分析效果。使用Inertsil ODS-4柱亦可得到较好分析效果。 蜂胶 样品来源：本品为蜜蜂科昆虫意大利蜂Apis mellifera L. 的干燥分泌物。产地：湖北。 对照品：高良姜素(中国药品生物制品生定所，批号：111699-200501，含量：98%)， 白杨素(上海同田生物技术有限公司，批号：08101121，含量：98%)。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过二号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL， 密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率40 kHz)45分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。 对照品溶液的制备：取白杨素对照品、高良姜素对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1mL含白杨素30 ng、高良姜素20ug的溶液，即得。 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 色谱柱：nertsilODS3(4.6x150 mm， 5ym) 推荐使用条件范围： 流动相：甲醇-0.15%磷酸溶液(64：36)柱 温：25℃检测波长：268 nm柱温：25~30℃流 速：1.0mL/min检测波长：268nm进样量：10pL流 速：1.0mL/min仪器配置：LC-20ADXR 高压泵SPD-M20A 二极管阵列紫外可见光检测器DGU-20A，脱气机CTO-20AC 柱温箱CBM-20A 系统控制器 色谱柱： lntersil ODS-3(4.6×150 mm， 5 um) 流动相：甲醇-0.15%磷酸溶液(60：40~65：35) 对照品 对照品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 白场素 15.407 2353735 66650 4376 1.23 高良姜素 17.304 1411127 35919 4477 1.22 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006165163 白杨素的标准曲线 Area 重复性数据如下： 白杨素 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 15.413 2354449 15.406 1126545 2 15.407 2353735 15.402 1125821 3 15.417 2354895 15.406 1125275 Average 15.412 2354360 15.405 1125880 RSD% 0.04 0.03 0.02 0.06 高良姜素的标准曲线 高良姜素 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 17.304 1411127 17.333 553689 2 17.302 1411675 17.327 554386 3 17.307 1410452 17.331 554974 Average 17.304 1411085 17.330 554350 RSD% 0.02 0.05 0.02 0.11 浓度 mg/mL *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱： Inertsil ODS-3(4.6 x 150 mm, 5um)流动相：甲醇-0.15%磷酸溶液(64:36)柱温：25℃检测波长：268 nm流速：1.0 mL/min进样量：10ul