槲寄生中紫丁香苷检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 檞寄生分析 檞寄生的高效液相色谱 ..药典收载情况 来源】本品为桑寄生科植物檞寄生Viscum coloratum (Komar.) Nakai 的干燥带叶茎枝。冬季至次春采割，除去粗茎，门段，干燥，或蒸后干燥。 【功能与主治】祛风湿，补肝肾，强筋骨，安胎。用于风湿痹痛，腰膝酸软，胎动不安。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.1%磷酸溶液(15：85)为流动相；检测波长一264 nm。理论板数按紫丁香苷峰计算应不低于5000。 对照品溶液的制备：取紫丁香苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含50ug的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品细粉约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇25 mL，密塞，称定重量，超菩处理(功率300 W， 频率 25 kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，却得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与液试品溶液10pL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 2.檞寄生药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中中寄生的含量测定以紫丁香苷为质量评价依据，紫丁香苷在Inertsil ODS-4中的色谱特点为：检测波长在264 nm时紫丁香苷吸收较强，色谱图较好；在流动相组成为甲醇-0.1%磷酸溶液系统时，流动相的比例对紫丁香苷及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相甲醇的比例在10%左右时， 其分离度较好，选择甲醇比例在10~15%(v/v)之间均可以获得满意的分离度及分析效果，考虑到分析时间，采用上述色谱柱，优化流动相比例为甲醇-0.1%磷酸溶液10：90)；柱温对紫丁香苷的保留时间也有一定影响，温度越高，保留时间越短，样品在25到45度均有较好的分析效果，考虑到样品的稳定性及分析效果，本次采用35度条件对对寄生样品进行分析测定。 檞寄生 样品来源：本品为桑寄生科植物檞寄生Viscum coloratum (Komar. ) Nakai 的干燥带叶茎枝。产地：黑龙江 对照品：紫丁香苷(上海同田生物制品有限公司，批号：08112621，含量：98%) 供试品溶液的制备：取本品细粉约2g，精密称定，置定塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇25 mL， 密塞，称定重量，超声处理(功率300W，频率25 kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：取紫丁香苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含50 ug的溶液，即得。 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 色谱柱：Inertsil ODS-4(4.6x150 mm， 5um) 推荐使用条件范围： 流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液(10：90) 色谱柱： Intersil ODS-4(4.6×150 mm， 5 jam) 柱温：35℃ 流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液(10~15：90~85) 检测波长：264 nm 柱温：25~45℃ 流 速：1.0 mL/min 检测波长：264 nm 进样量：：10uL 流 速：1.0 mL/min 仪器配置： LC-20ADXR高压泵 SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器CTO-20AC柱温箱CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC 自动进样器 对照品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 紫丁香苷 49.791 683930 8641 9020 1.01 紫丁香苷标准曲线 重复性数据如下： 紫丁香苷 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 50.802 1437448 49.791 683930 2 50.701 1429783 49，479 681093 3 50.520 1427279 49.416 686066 Average 50.674 1431503 49.562 683696 RSD% 0.28 0.37 0.41 0.36 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-4(4.6 x 150 mm, 5um)流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液(10:90)柱温：35°C检测波长：264 nm流速：1.0 mL/min进样量：10 ul