车前草中大车前苷检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 车前草分析 车前草的高效液相色谱 .药典收载情况 来源】本品为车前科植物车前Plantago asiatica L. 或平车前Plantago depressa Willd. 的干燥全草。夏季采挖，除去泥沙， 【功能与主治】清热利尿通淋，祛痰，凉血，解毒。用于热淋涩痛，水肿尿少，暑湿泄泻，痰热咳嗽，吐血衄血，痈=疮毒。 、含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%甲酸溶液(17：83)为流动相；检测波长一330 nm。理论板数按大车前苷峰计算应不低于3000。 照品溶液的制备：取大车前苷对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加60%甲醇制成每1mL含0.1 mg的溶液，即等。 共试品溶液的制备：取本品粉末(过二号筛)约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%甲醇50 mL， 称定重量，声处理30分钟(功率250 W， 频率40 kHz)，放冷， 再称定重量，用60%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，得。 到定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10pL，注入液相色谱仪，测定，即得。 2.车前草药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中车前草的含量测定以大车前苷为质量评价依据，其在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：检测波长在230 nm时对照品吸收接近最强，色谱图较优；在流动相组成为乙腈-0.1%甲酸溶液系统时，流动相的比例对大车前苷及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相乙腈的比例在15%左右时，其分离度最好，选择乙腈比例在13~17%(v/v)之间均可以获得较好的分离度及分析效果；柱温对大车前苷的保留也有一定影响，在45到50℃时样品分离度较好且分时间也较短。经过考察，在流动相比例为乙腈-0.1%甲酸溶液(15：85)，柱温45℃的色谱条件下，使用nertsil ODS-3(4.6×150 mm， 5 um)柱能得到较满意的分析效果。 此外，使用Inertsil ODS-4柱亦可得到较好分析效果。 车前草 样品来源：本品为车前科植物勺前Plantago asiatica L. 或平车前Plantago depressa Willd. 的干燥全草。产地：云南。 对照品：大车前苷(成都曼斯特生物科技有限公司，批号：A0530，含量：98%)。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过二号筛)约1g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%甲醇50 mL， 称定重量，超声处理30分钟(功率250W， 频率40 kHz)，放冷， 再称定重量，用60%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：取大车前苷对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加60%甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液，即得。 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 色谱柱： Inertsil ODS-3(4.6×150 mm， 5 pm) 推荐使用条件范围： 流动相：乙腈-0.1%甲酸溶液(15：85)柱温：45℃检测波长：330nm柱温：45~50℃流 速：11.0 mL/min检测波长：330nm进样量：10pL流充速：1.0 mL/min仪器配置：LC-20ADXR高压泵SPD-M20A二极管列列紫外可见光检测器DGU-20A脱气机CTO-20AC柱温箱CBM-20A 系统控制器 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150 mm， 5 um) 流动相：乙腈-0.1%甲酸溶液(13~17：87~83) SIL-20AC 自动进样器 对照品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 大车前苷 12.892 1416961 62113 7302 1.09 大车前苷的标准曲线 重复性数据如下： 大车前苷 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 12.952 1441252 12.882 1644706 2 12.892 1416961 12.889 1646143 3 12.864 1422879 12.904 1643764 Average 12.903 1427031 12.892 1644871 RSD% 0.35 0.89 0.09 0.08 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-3(4.6 x 150 mm, 5um)流动相：乙腈-0.1%甲酸溶液(15:85)柱温：45°C检测波长：330 nm流速：1.0 mL/min进样量：10 ul