穿山龙中薯蓣皂苷检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：400611(65163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 穿山龙分析 穿山龙的高效液相色谱 ..药典收载情况 【来源】本品为薯蓣科植物穿龙薯蓣Dioscorea nipponica Makino 的干燥根茎。春、秋二季采挖，洗净，除去须根及外皮，干。 【功能与主治】祛风湿，止痛，舒筋活血，止咳平喘祛痰。用于风湿性关节炎，腰腿疼痛、麻木，大骨节病，跌扑损，闪腰岔气，慢性支气管炎，咳嗽气喘。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(55：45)为流动相；检测波长为203 nm。理论板数按薯蓣皂苷峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备：取薯蓣皂苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含0.3mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过四号筛)约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入65%乙醇25 mL，称定重飞，超声处理(功率120W，频率40 kHz)30分钟，用65%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液溶10pL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 2.穿山龙药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中穿山龙的含量测定以薯蓣皂苷为质量评价依据，薯蓣皂苷在Inertsil Ph-3中的色谱特点为：检测波长在203 nm时薯蓣皂苷吸收最强，色谱图较好；在流动相组成为乙青~水系统时，流动相的比例对薯蓣皂苷及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相乙腈的比例在55%左右时，其分离度较好，选择乙腈比例在40~55%(v/v)之间均可以获得满意的分离度及分析效果，考虑到分析时间，采用上述色谱柱，流动相比例为乙腈-水(55：45)；柱温对薯蓣皂苷的保留时间也有一定影响，温度越高，保留时间越短，样品在25到40度均有较好的分析效果，但温度的降低会明显改善薯蓣皂苷与相邻色谱峰的分离效果。考虑到样品的稳定性及分析效果，本次采用40度条件对穿山龙样品进行分析测定。 穿山龙 样品来源：本品为薯蓣科植物穿龙薯蓣Dioscorea nipponica Makino 的干燥根茎。产地：河北。 对照品：薯蓣皂苷(上海上田生物科技有限公司。批号：09032031。含量：98%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过四号筛)约0.25 g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入65%乙醇25 mL， 称定重量，超声处理(功率120W， 频率40kHz)30分钟，用65%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：取薯蓣皂苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含0.3mg的溶液，即得。 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：400611(65163 色谱柱： Inertsil ODS-3(4.6×150mm， 5 um) 推荐使用条件范围： 流动相：乙腈-水(55：45) 色谱柱： Intersil ODS-3 (4.6×150 mm， 5 pm) 柱温：40℃ 流动相：乙腈-水(40~55：60~45) 检测波长：203 nm 柱温： 25~40℃ 流 速：1.0mL/min 检测波长：203nm 进样量：10uL 流 速：：1.0 mL/min 仪器配置： LC-20ADXR高压泵 SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 CTO-20AC柱温箱 CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC 自动进样器 对照品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 薯蓣皂苷 6.824 726360 51869 5144 1.02 薯蓣皂苷标准曲线 重复性数据如下： 薯蓣皂苷 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 】 6.824 726360 7.043 815474 2 6.828 726758 7.062 813330 3 6.837 726030 7.075 814031 Average 6.830 726383 7.060 814278 RSD% 0.10 0.05 0.14 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-3(4.6 x 150 mm, 5um)流动相：乙腈-水(55:45)柱温： 40℃检测波长：203 nm流速：1.0 mL/min进样量：10ul