肉苁蓉中毛蕊花糖苷和松果菊苷检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 肉苁蓉分析 肉苁蓉的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为列当科植物肉苁蓉Cistanche deserticola Y. C. Ma 或管花肉苁蓉Cistanche tubulosa (Schrenk) Wight 的干燥带鳞叶的肉质茎。春秋二季采挖，春季苗未出土或刚出土时采挖，除去花序，秋季冻土之前采挖，除去茎尖。切段，晒千 【功能与主治】补肾阳，益精血，利肠通便，用于肾阳不足，精血亏虚，阳痿不孕，筋骨无力，肠燥便秘。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以0.1%甲酸溶液为流动相B，按下表进行梯度洗脱；检测波长为330 nm；柱温为35℃。理论板数按松果菊苷峰计算应不低于3000。 时间(分钟) 流动相A(%) 流动相 B(%) 0~20 26.5 73.5 20~27 27.5 72.5 27~55 29.0 71.0 55~65 26.5 73.5 对照品溶液的制备：取松果菊苷和毛蕊花糖苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1mL各含0.2 mg的混合溶液，摇匀，即得 供试品溶液的制备：取本品粉末(过四号筛)约lg，精密称定，置100 mL棕色量瓶中，精密加入50%甲醇50 mL，密塞，摇匀，称定重量，浸泡30分钟， 超声处理40分钟(功率250W，频率35 kHz)， 取出，放冷，再称定重量，加50%甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液容10uL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 2.肉苁蓉药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 时间(分钟) 流动相A(%) 流动相B(%) 0~20 26.5 73.5 20~27 27.5 72.5 27~55 29.0 71.0 55~65 26.5 73.5 (中国药典》中肉苁蓉的含量测定以松果菊苷和毛蕊花糖苷为质量评价依据，其在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：在流动相组成为甲醇-0.1%磷酸溶液系统时，流动相的比例对松果菊苷和毛蕊花糖苷及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相甲醇的比例在26.5%~27.5%~29.0%~26.5%时，其分离度最好，松果菊苷和毛蕊花糖苷色谱图中杂质峰较少，因此选择甲醇比例在26.5%~27.5%~29.0%~26.5之间均可以获得较好的分离度及分析效果；柱温对松果菊苷和毛蕊 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 二糖苷的保留时间及与相邻色谱峰的分离度影响很小。经过考察，在流动相比例为甲醇-水=26.5%：73.5%~27.5%：25%~29.0%：71%~26.5%：73.5%)，柱温35℃的色谱条件下，使用Inertsil ODS-3(4.6×150 mm， 5 um)；nertsil ODS-4(4.6×150 mm， 5 pm)柱均能得到较满意的分析效果。 肉苁蓉 ( 年品来源：本品 为 列当科植物肉苁蓉Cistanche deserticola Y. C. Ma 的干燥带鳞叶的肉质茎。产地：河北。 ) 对照品：毛蕊花糖苷(中国药品生物制品检定所，批号：111530-200706，含量：98%)， 松果菊苷(中国药品生物制品检定所，批号：111620-200502含量：98%)。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过四号筛)约1 g，精密称定，置100 mL棕色量瓶中，精密加入50%甲醇50 mL，密塞，垂匀，称定重量，浸泡30分钟，超声处理40分钟(功率250W， 频率35kHz)，取出，放冷，再称定重量，加50%甲醇补足失的重量，摇匀，静置，取上清液，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：取松果菊苷和毛蕊花糖苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1mL各含0.2mg的混合溶液，匀，即得 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150 mm， 5 um) 流动相：A：甲醇B：水 时间(分钟) 流动相 A(%) 流动相B(%) 0~20 26.5 73.5 20~27 27.5 72.5 27~55 29.0 71.0 55~65 26.5 73.5 柱 温：35~45℃ 检测波长：330 nm 流 速：1.0mL/min 仪器配置： LC-20ADXR 高压泵 SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 DGU-20A，脱气机 CTO-20AC 柱温箱 CBM-20A系统控制器 SIL-20AC 自动进样器 对照品 对照品 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006165163 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 松果菊苷 21.439 1793263 24793 2335 1.61 毛蕊花糖苷 43.996 2541974 22515 4124 1.80 松果菊苷标准曲线 重复性数据如下： 松果菊苷 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 21.582 3175511 21.817 7238147 2 21.581 3193771 21.845 7304652 3 21.552 3182506 21.835 7288206 Average 21.572 3183929 21.832 7277002 RSD% 0.07 0.20 0.05 0.39 浓度 mg/mL 毛蕊花糖苷标准曲线 毛蕊花糖苷 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 44.376 4403105 44.698 965605 2 44.252 4408583 44.730 972104 3 44.171 4409785 44.706 965235 Average 44.266 4407158 44.711 967648 RSD% 0.19 0.06 0.03 0.32 浓度 mg/mL *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-3(4.6 x 150 mm, 5um)流动相：A :甲醇  B:水 梯度洗脱柱温：35℃检测波长：330 nm流速：1.0 mL/min进样量;10ul