鹿衔草中水晶兰苷检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 鹿衔草分析 鹿衔草的高效液相色谱 ：.药典收载情况 【来源】本品为鹿蹄草科植物鹿蹄草 Pyrola calliantha H. Andres或普通鹿蹄草Pyrola decorata H. Andres的干燥全草。全年均可采挖，除去杂质，晒至叶片较软时，堆置至叶片变紫褐色，晒干。 【功能与主治】祛风湿，强筋骨，止血。用于风湿痹痛，腰膝无力，月经过多，久咳劳嗽。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.1%磷酸溶液(5：95)为流动相；检测波长为235 nm。理论板数按水晶兰苷计算应不低于3000。 对照品溶液的制备： 取水晶兰苷对照品适量，精密称定，加水制成每1mL含0.25 mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粗粉约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入水50 mL，称定重量，在80℃水浴中提取1小时，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液20mL， 减压浓缩至干，残渣加水适量使溶解，转入5mL量瓶中，用水分次洗涤容器，洗涤液并入量瓶中，再加水至刻度，摇匀，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5uL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 2.鹿衔草药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中鹿街草的含量测定以水晶兰苷为质量评价依据，水晶兰苷在Inertsil ODS-4中的色谱特点为：检测波长在235 nm时水晶兰苷吸收较强，色谱图较好；在流动相组成为甲醇-0.1%磷酸溶液系统时，流动相的比例对水晶兰苷及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相甲醇的比例在2%左右时，其分离度最好，选择甲醇比例在0~5%(v/v)之间均可以获得满意的分离度及分析效果，考虑到分析时间，采用上述色谱柱，优化流动相比例为甲醇-0.1%磷酸溶液(2：98)；柱温对水晶兰苷的保留时间也有一定影响，温度越高，保留时间越短，样品在25到45度均有较好的分析效果，考虑到样品的稳定性及分析效果，本次采用35度条件对鹿衔草样品进行分析测定。 鹿衔草 样品来源：本品为鹿蹄草科植物鹿蹄草Pyrola calliantha H. Andres或普通鹿蹄草Pyrola decorata H. Andres的干燥全草。 对照品：水晶兰苷(成都曼斯特生物科技有限公司，批号：A0532，含量：96%) 供试品溶液的制备：取本品粗粉约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入水50 mL，称定重量，在80℃水浴中提取1小时，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液20 mL，减压浓缩至干，残渣加水适量使溶解，转入5mL量瓶中，用水分次洗涤容器，洗涤液并入量瓶中，再加水至刻度，摇匀，即得。 对照品溶液的制备：取水晶兰苷对照品适量，精密称定，加水制成每1mL含0.25mg的溶液，即得。 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 色柱： Inertsil ODS-4(4.6×150 mm， 5 um) 推荐使用条件范围： 流动相：：甲醇-0.1%磷酸溶液(2：98) 色谱柱： Intersil ODS-4(4.6×150 mm， 5 pm) 柱温：35℃ 流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液(0~5：100~95) 检测波长：235 nm 柱温：25~45℃ 流充速：1.0mL/min 检测波长：235 nm 进样量：10pL 流 速：：：1.0 mL/min 仪器配置： LC-20ADXR高压泵 SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 CTO-20AC 柱温箱 CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC自动进样器 对照品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 水晶兰苷 7.863 1727694 121855 6744 1.14 水晶兰苷的标准曲线 重复性数据如下： 水晶兰苷 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 7.822 980043 7.863 1727694 2 7.810 982514 7.809 1789664 3 7.828 980198 7.809 1789664 Average 7.820 980918 7.827 1769007 RSD% 0.12 0.14 0.40 2.02 色谱柱：Inertsil ODS-4(4.6 x 150 mm, 5um)流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液(2:98)柱温：35°C检测波长：235 nm流速：1.0 mL/min进样量：10ul