蓍草中绿原酸检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 蓍草分析 蓍草的高效液相色谱 1.药典收载情况 来源】本品为菊科植物蓍Achillea alpina L. 的干燥地上部分。夏、秋二季花开时采割，除去杂质，阴干。 .功能与主治】解毒利湿，活血止痛。用于蛾乳咽痛，泄泻痢疾，肠痈腹痛，热淋涩痛，湿热带下，蛇虫咬伤。 .含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.4%磷酸溶液(11：89)为流动相；检测波长32~nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于6000。 对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品适量，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1mL含绿原酸40 ug的溶液。即得。试品溶液的制备：取本品粉末(过二号筛)约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50 mL，称定重量，超声处理(功率，220W；频率，40 KHz)30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量三续滤液2mL，置10 mL棕色量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20uL，注入液相色谱仪，测定，即得。 .蓍草药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中蓍草的含量测定以绿原酸为质量评价依据，其在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：检测波长在327 nm对照品吸收接近最强，色谱图较优；在流动相组成为乙腈-0.4%磷酸系统时，流动相的比例对绿原酸及相邻色谱峰的公离具有显著的影响，流动相乙腈的比例在11%左右时，其分离度最好，选择乙腈比例在9~12%(v/v)之间均可以获得较好的分离度及分析效果；柱温对绿原酸的保留也有一定影响，在15到25℃时样品分离度较好。经过考察，在流动相比例方乙腈-0.4%磷酸溶液(11：89)，柱温15℃的色谱条件下，使用lnertsil ODS-3(4.6×150 mm， 5um)柱能得到较满意的分析效果。 此外，使用Inertsil ODS-4柱亦可得到较好分析效果。 蓍草 样品来源：本品为菊科植物蓍Achillea alpina L. 的干燥地上部分。夏、秋二季花开时采割，除去杂质，阴干。 对照品：绿原酸(上海同田生物技术有限公司，批号：09021221，含量：98%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过二号筛)约0.5 g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50 mL，称定重量，超声处理(功率，220W；频率，40 KHz)30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2 mL，置10ml棕色量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品适量，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1mL含绿原酸40 ug的溶液。即得。 色谱柱： Inertsil ODS-3 (4.6×150 mm， 5 jm) 流动相：乙腈-0.4%磷酸溶液(11：89) 柱温：15℃ 检测波长：327nm 流速： 1.0mL/min 进样量：10uL 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 仪器配置： 推荐使用条件范围： 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150 mm， 5 um) 流动相：乙腈-0.4%磷酸溶液(9：91~12：88) 柱 温：15~25℃ 检测则长：327 nm 流 速：11.0mL/min 对照品 实际样品 (1) (1)绿原酸 33327nm，4nm (1.00) (1)草中的绿原酸 (1) 标准品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 绿原酸 14.08 2337391 73233 4701 1.25 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 绿原酸 13.24 2378060 63984 3215 1.47 绿原酸的标准曲线 重复性数据如下： 绿原酸 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 14.084 2336583 13.978 2345200 2 14.080 2337391 14.069 2354749 3 14.079 2340173 14.019 2356255 Average 14.080 3493989 14.022 2352068 RSD% 0.01 0.06 0.22 0.18 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-3 (4.6x150 mm, 5um) 流动相：乙腈-0.4%磷酸溶液(11:89) 柱温：25°C检测波长：327 nm 流速：1.0 mL/min 进样量：10ul