板蓝根中告依春检测方案(液相色谱柱)

38 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 板蓝根分析 板蓝根的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为十字花科植物菘蓝Isatis indigotica Fort. 的干燥根。秋季采挖，除去泥沙，晒干。 【功能与主治】清热解毒，凉血利咽。用于温毒发斑，舌绛紫暗，疟腮，喉痹，烂喉丹痧，大头瘟疫，丹毒，痈肿。【含量测定】 色谱条件与系统适用性用验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.02%磷酸(7：93)为流动相；检测波长为245 nm。理论板数按(R，S)-告依春峰计算应不低于5000。 对照品溶液的制备：取(R，S)-告依春对照品品量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含40ug的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末约1g，精密称定，置100mL圆底瓶中，精密加入水50 mL，称定重量，煎煮2小时，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10~20uL，注入液相色谱仪，测定，即得。 2.板蓝根药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中板蓝根的含量测定以(R，S)-告依春为质量评价依据，其在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：在流动相组成为甲醇-0.02%磷酸系统时，流动相的比例对(R，S)-告依春及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相甲醇的比例在7%左右时，其分离度最好，板蓝根色谱图中杂质峰较少较与(R，S)-告依春相比含量很低，因此选择甲醇比例在5~10%(v/v)之间均可以获得较好的分离度及分析效果；柱温对(R，S)-告依春的保留时间及与相邻色谱峰的分离度影响很小。经过考察，在流动相比例云甲醇-0.02%磷酸溶液(7：93)，柱温35℃的色谱条件下，使用Inertsil ODS-3(4.6x150 mm，5 pm)柱能得到较满意的分析效果。使用Inertsil ODS-4(4.6×150 mm， 5um)柱亦可得到良好分析效果。 板蓝根 样品来源：本品为十字花科植物菘蓝Isatis indigotica Fort. 的干燥根。秋季采挖，除去泥沙，晒干。产地：河北 对照品：(R，S)-告依春(上海同田生物技术有限公司，批号：09021221，含量：98%) 供试品溶液的制备：取本品粉末约lg， 精密称定， 置100 mL圆底瓶中，精密加入水50 mL，称定重量，煎煮2小时，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：取(R，S)-告依春对照品品量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含40pg的溶液，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-3 (4.6×150 mm， 5 um) 推荐使用条件范围： 流动相：甲醇-0.02%磷酸溶液(7：93) 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150 mm， 5 um) 柱温：35℃ 流动相：甲醇-0.02%磷酸溶液(5~10：95~90) 检测波长：245 nm 柱温：35~45℃ 流 速：1.0mL/min 检测波长：245nm 进样量： 10pL 流 速： 1.0mL/min 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006165163 仪器配置： LC-20ADXR 高压泵 SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 CTO-20AC 柱温箱 DGU-20A，脱气机 CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC 自动进样器 对照品 实际样品 (1)(R，S)-告依春 (1) DetectorACh1：245nm (1)板蓝根中的(R，S)告依春 (1) 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 (R，S)-衣依春 11.778 16454667 733793 6394 1.23 (R，S)-告依春标准曲线 重复性数据如下： (R，S)-告依春 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 11.740 16996440 11.897 13574088 2 11.778 16941375 11.907 13501265 3 11.778 16863748 11.942 13580945 Average 11.765 16933854 11.915 13552099 RSD% 0.18 0.39 0.19 0.32 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil 0DS-3 (4.6 x 150 mm, 5um)流动相：甲醇- 0.02%磷酸溶液(7:93)柱温：35℃检测波长：245 nm流速：1.0 mL/min进样量：10ul