丹参中丹酚酸B检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 丹参分析 丹参中丹酚酸B的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge. 的干燥根及根茎。春、秋二季采挖，除去泥沙，干燥。 【功能与主治】祛瘀止痛，活血通经，清心除烦。用于月经不调，经闭痛经，癥瘕积聚，胸腹刺痛，热痹疼痛，疮疡肿痛，心烦不眠；肝脾肿大，心绞痛。 【含量测定】照高效液相色谱法(附录VID)测定。 色谱条件与系统适用性试验：：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-甲酸-水(30：10：1：59)为流动相；检测波长长286 nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000。 对照品溶液的制备：取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加75%甲醇制成每1 mL含0.14mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.2g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇50mL， 称定重量，力热回流1小时，取出，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含丹酚酸B(C，H，o0ib)不得少于3.0%。 2.丹参药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中丹参的含量测定以丹酚酸B为质量评价依据之一，丹参在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：在流动相组成为甲醇-乙腈-甲酸-水系统时，流动相的比例对丹酚酸B与相邻色谱峰的分离具有显著的影响，因此甲醇比例在25~30%(v/v)， 乙在比例在7~10%(v/v)之间均可以获得满意的分离度，另外，经过对流动相pH的考察发现，丹酚酸B色谱峰在流动相pH在3左右时，拖尾很严重，达到4%左右时，则该色谱峰保留时间严重推后，不适合分析，因此，考虑到分析时间长短，优化流动相比例为甲醇-乙腈-甲酸-水(28：10：0.5：61.5)；柱温对丹酚酸B与相邻色谱峰的分离基本无影响，温度越高丹酚酸B保留时间越短，故选用40℃柱温。经过考察，此条件同样适用于在ODS-4(4.6×150 mm， 5 pm )中对丹参进行分析。 丹参 样品来源：本品为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge. 的干燥根及根茎。产地：河北 对照品：丹酚酸B(上海同田生物技术有限公司，批号：09072021，含量：98.87%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇50mL， 称定重量，加热回流1小时，取出，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加75%甲醇制成每1 mL含0.14 mg的溶液，即得。 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 色谱柱： Inertsil ODS-3 (4.6 ×150 mm， 5 um) 推荐使用条件范围： 流动相：：甲醇-乙腈-甲酸-水(28：10：0.5：61.5) 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150 mm， 5 pm) 柱温：40℃ 流动相：甲醇-乙腈-甲酸-水(25~28：7~10：0.5~1：61~67.5) 检测波长：286 nm柱温： 35~45℃流 速：1.0 mL/min检测波长：286nm进样量：10uL流 速：1.0mL/min仪器配置：LC-20ADXR高压泵SPD-M20A 二极管阵列紫外可见光检测器CTO-20AC 柱温箱 CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC 自动进样器 对照品 实际样品 Detecior A296mm (1)丹参中的丹酚酸B (1) 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 丹酚酸 B 9.447 1584613 73574 4625 1.14 丹酚酸B标准曲线 重复性数据如下： 丹酚酸B No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 9.436 1593567 9.516 1719539 2 9.445 1583402 9.512 1723976 3 9.447 1584613 9.528 1722887 Average 9.443 1587194 9.519 1722134 RSD% 0.06 0.35 0.09 0.13 色谱柱：Inertsil ODS-3 (4.6 x 150 mm, 5um)流动相: 甲醇-乙腈-甲酸-水(28:10:0.5:61.5)柱温：40°C检测波长：286 nm流速：1.0 mL/min进样量：10ul