续断中川续断皂苷VI检测方案(液相色谱柱)

28 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 续断分析 续断的高效液相色谱 Ⅰ药典收载情况 [来源】本品为川续断科植物川续植Dipsacus asper Wall. ex Henry的干燥根。秋季采挖，除去根头及须根，用微火烘至二，堆置“发汗”至内部变绿色时，再烘干。 【功能与主治】补肝肾，强筋骨，续折伤，止崩漏。用于腰膝酸软，风湿痹痛，崩漏，胎漏，跌扑损伤。酒续断多用于湿痹痛，跌扑损伤。盐续断多用于腰膝酸软。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(30：70)为流动相；检测波长为212 nm。论板数按按续断皂苷VI峰计算应不低于3000。 照品溶液的制备：取川续断皂苷VI对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含1.5mg的溶液。精密量取1 mL， 置1mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。 供试品溶液的制备：取本品细粉约0.5g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理(功率100W，频率40 kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置50mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液溶20pL，注入液相色谱仪，测定，即得。 2.续断药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中续断的含量测定以则续断皂苷VI为质量评价依据，川续断皂苷VI在Inertsil ODS-4中的色谱特点为：检测波长在212 nm时川续断皂苷VI吸收较强，色谱图较好；在流动相组成为乙腈-水系统时，流动相的比例对川续断皂苷VI及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相乙腈的比例在30%左右时，其分离度最好，选择乙乙比例在25~35%(v/v)之间均可以获得满意的分离度及分析效果，考虑到分析时间，采用上述色谱柱，优化流动相比例为乙腈-水(30：70)；柱温对川续断皂苷VI的保留时间也有一定影响，温度越高，保留时间越短，样品在25到45度均有较好的分析效果，考虑到样品的稳定性及分析效果，本次采用35度条件对续断样品进行分析测定。 续断 样品来源：本品为川续断科植物川续断Dipsacus asper Wall. ex Henry的干燥根。产地：四川 对照品：川续川皂苷VI(成都曼斯特生物科技有限公司，批号：A0464含量：98%) 供试品溶液的制备：取本品细粉约0.5g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，密塞，称定重量，超声处理(功率100W，频率40 kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5 mL，置50 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。 对照品溶液的制备：取川续断皂苷VI对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含1.5 mg的溶液。精密量取1 mL，置10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 色谱柱： Inertsil ODS-4(4.6×150 mm， 5 pm) 推荐使用条件范围： 流动相：乙-水溶液(30：70)柱温：35℃检测波长：212 nm柱 温：25~45℃流速：1.0mL/min检测波长：212 nm进样量：： 10 pL流 速：1.0mL/min仪器酒置：LC-20ADXR高压泵SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器CTO-20AC柱温箱CBM-20A 系统控制器 色谱柱： Intersil ODS-4(4.6×150 mm， 5 pm) 流动相：乙腈-水(25~35：75~65) SIL-20AC 自动进样器 对照品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 川续断皂苷V 12.954 755289 31753 6587 1.05 续续皂苷V标准曲线 重复性数据如下： 川续断皂苷VI No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 12.991 802458 12.954 755289 2 12.992 801973 12.992 732612 3 12.919 804428 12.992 735034 Average 12.967 802953 12.972 740978 RSD% 0.33 0.17 0.15 1.69 色谱柱：Inertsil ODS-4(4.6 x 150 mm, 5um)流动相：乙腈-水溶液(30:70)柱温：35°C检测波长：212 nm流速：1.0 mL/min进样量：10ul