忍冬藤中绿原酸检测方案(液相色谱柱)

中国药典2010年版对应高效液相色谱方法图谱库(第一册引领分析科技在北京谱朋企业QQ：40061 65163 中国药典2010年版对应高效液相色谱方法图谱库(第一册 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 忍冬藤分析 忍冬藤的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为忍冬科植物忍冬Loniceru japonicu Thunb.的干燥茎枝。秋、冬二季采割，晒干。 【功能与主治】清热解毒，疏风通络。用于温病发热，热毒血痢，痈肿疮疡，风湿热痹，关节红肿热痛。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.4%磷酸溶液(10：90)为流动相；检测波长为327nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于1000。 对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品适量，加50%甲醇制成每1mL含40ug的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25mL，称定重量，超声处理(功率250W，频率30kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液10L与供试品溶液5~10pL，注入液相色谱仪，测定，即得。 忍冬藤药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中忍冬藤的含量测定以绿原酸为质量评价依据，忍冬藤在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：流动相为乙腈-磷酸水系统时，流动相的比例对绿原酸的保留时间具有显著的影响，忍冬藤色谱图中绿原酸相邻色谱峰较少，绿原酸与相邻色谱峰的分离度也较大，因此乙腈比例在10~15%(v/v)之间均可以获得满意的分离度，优化流动相比例为乙腈-0.4%磷酸溶液(15：85)；柱温对绿原酸的保留时间基本无影响，温度越高绿原酸的保留时间越短，经过综合考量，故选用35℃柱温。 经过考察，此条件同样适用于在ODS-4(4.6×150mm，5um)中对忍冬藤进行分析。 忍冬藤 样品来源：本品为忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.的干燥茎枝。产地：江苏。 对照品：绿原酸(上海同田生物技术有限公司，批号：08060731，含量：98.0%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25mL， 称定重量，超声处理(功率250W，频率30kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品适量，加50%甲醇制成每1mL含40pg的溶液，即得。 色谱柱：Inertsil ODS-3 (4.6x150 mm， 5um) 流动相：乙腈-0.4%磷酸溶液(15：85) 柱温： 35℃检测波皮：327nm 流速：1.0mL/min进样量： 10pL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-4 (4.6×150 mm，5 um) 引领分析科科在北京谱朋QQ：40061 65163 忍冬藤 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： Intersil ODS-3 (4.6×150 mm，5pm) LC-10ADvp高压泵 流动相：乙腈-0.4%磷酸溶液(10~15：85~90) DGU-14A脱气机 柱温：30~40℃ SPD-M10Avp二极管阵列紫外可见光半微量检测器 检测波长：327nm CTO-10ASvp柱温箱 流速：1.0 mL/min SIL-HTc 自动进样器 标准样品 实际样品 名称 保留时间(min) 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 绿原酸 5.216 1534217 155765 6433 1.11 绿原酸标准曲线 重现性数据如下 No. 标准品 保留时间 峰面积 实际样品 保留时间 峰面积 1 23 5.220 2762492 5.230 4558203 5.226 2768799 5.234 2771164 5.225 4612253 5.227 4606197 AverageRSD% 5.2260.13 27674850.16 5.227 0.04 4592218 0.64 ★本数据山北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 中国药典word版exe版pdf版及培训资料精华帖http：//www.yaojia.org/forum. php?mod=viewthread&tid=fromuid= 色谱柱Inertsil ODS-3 (4.6x150mm, 5μm)流动相:乙腈-0.4%磷酸溶液(15:85)柱温: 35℃检测波长327nm流速1.0ml/min 进样量10μL此条件同样适用于Inertsil ODS-4 (4.6x150mm, 5μm)