蒲公英中咖啡酸检测方案(液相色谱柱)

中国药典2010年版对应高效液相色谱方法图谱库(第一册引领分析科技在北京谱朋企业QQ：40061 65163 中国药典2010年版对应高效液相色谱方法图谱库(第一册 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 蒲公英分析 蒲公英的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为菊科植物蒲公英 Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz.、碱地蒲公英 Taraxacum sinicum Kitag.或同属数种植物的干燥全草。春至秋季花初开时采挖，除去杂质，洗净，晒干。 【功能与主治】清热解毒，消肿散结，利尿通淋。用于疔疮肿毒，乳痈，瘰疬，目赤，咽痛，肺痈，肠肠，湿热黄疸，热淋涩痛。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钠1.56g，加水使溶解成1000mL， 再加1%磷酸溶液调节PH值至3.8~4.0，即得)(23：77)为流动相；检测波长为323nm； 柱温40℃。理论板数按咖啡酸峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备：精密称取在110℃干燥至恒重的咖啡酸对照品7.5mg，置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取2mL， 置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得(每1mL中含咖啡酸30pg)。 供试品溶液的制备：取本品粗粉约1g，精密称定，置50mL具塞锥形瓶中，精密加5%甲酸的甲醇溶液10mL，密塞，摇匀，称定重量，超声处理(功率250W，频率40 kHz) 30分钟， 取出，放冷，再称定重量，用5%甲酸的甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，置棕色量瓶中，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液10pL与供试品溶液5~20uL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 蒲公英药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中蒲公英的含量测定以咖啡酸为质量评价依据，蒲公英在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液系统时，流动相的比例对咖啡酸与相邻色谱峰的分离具有显著的影响，有机相比例在18~23%(v/v)之间均可以获得满意的分离度，优化流动相比例为甲醇-磷酸盐缓冲液(23：77)；柱温对咖啡酸与相邻色谱峰的分离基本无影响，温度越高咖啡酸保留时间越短，故选用40℃柱温。 经过考察，此条件同样适用于在Inertsil ODS-4 (4.6x150 mm，5pm)中对蒲公英进行分析。 蒲公英 样品来源：本品为菊科植物蒲公英Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz.的干燥全草。产地：河北。 对照品：咖啡酸(上海同田生物技术有限公司，批号：08072221，含量：100.0%) 供试品溶液的制备：取本品粗粉约1g，精密称定，置50mL具塞锥形瓶中，精密加5%甲酸的甲醇溶液10mL，密塞，摇匀，称定重量，超声处理(功率250W，频率40kHz)30分钟，取出，放冷，再称定重量，用5%甲酸的甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，置棕色量瓶中，即得。 对照品溶液的制备：精密称取在110℃干燥至恒重的咖啡酸对照品7.5mg， 置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取2mL，置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-3 (4.6×150mm，5u m) 流动相：甲醇-磷酸盐缓冲液(23：77) 柱温：40℃检测波长：323nm 引领分析科科在北京谱朋QQ：40061 65163 蒲公英 流速：1.0mL/min进样量：10pL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-4 (4.6×150 mm，5pm) 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： Intersil ODS-3 (4.6×150 mm，5pm)LC-10ADvp高压泵流动相：甲醇-磷酸盐缓冲液(18~23：89~77)DGU-14A 脱气机柱温：35~45℃检测波长：323nmCTO-10ASvp柱温箱 SPD-M10Avp二极管阵列紫外可见光半微量检测器 流速：1.0 mL/min SIL-HTc 自动进样器 标准样品 实际样品 名称 保留时间(min) 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 咖啡酸 10.642 2465281 121166 6104 1.07 咖啡酸标准曲线 重现性数据如下 No. 标准样品 保留时间 峰面积 实际样品 保留时间 峰面积 23 10.686 49080410.784 491725 10.808 493500 10.672 1682825 10.604 1684994 10.620 1680790 AverageRSD% 10.759 4920090.60 0.27 10.632 1682870 0.33 0.12 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 中国药典word版exe版pdf版及培训资料精华帖http：//www.yaojia.org/forum. php?mod=viewthread&tid=fromuid= 色谱柱Inertsil ODS-3 (4.6x150 mm,5μm)流动相:甲醇-磷酸盐缓冲液(23:77)柱温: 40℃检测波长323nm流速1.0ml/min进样量10μL※此条件同样适用于Inertsil ODS-4 (4.6x150mm, 5μm)