石韦中绿原酸检测方案(液相色谱柱)

中国药典2010年版对应高效液色谱方法图谱库(第一册)引领分析科技在北京朋ro阴QQ4006165163 中国药典2010版对应 高效液相色谱图集 石韦分析 石韦的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为水龙骨科植物庐山石韦 Pyrrosia sheareri (Bak.) Ching、石韦/yrrosialingua (Thunb.) Farwell 或有柄石韦 Pyrrosiapetiolosa (Christ) Ching 的干燥叶。全年均可采收，除去根茎及根，晒干或阴干。 【功能与主治】利尿通淋，清热止血。用于热淋，血淋，石淋，小便不通，淋沥涩痛，吐血，衄血，尿血，崩漏，肺热喘咳。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.5%磷酸溶液(11：89)为流动相；检测波长为326nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000。 对照品溶液的制备：精密称取绿原酸原照品适量，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1mL含40ug的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过二号筛)约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25mL，称定重量，超声处理(功率300W，频率25kHz) 45分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10pL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 石韦药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中石韦的含量测定以绿原酸为质量评价依据，绿原酸在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：检测波长在326nm时绿原酸吸收最强，色谱图较优；在流动相组成为0.5%磷酸二氢钾溶液-乙腈系统时，流动相的比例对绿原酸及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相乙腈的比例在11左右时，其分离度最好，选择0.5%磷酸二氢钾溶液~乙腈比例在11~89%(v/v)之间均可以获得满意的分离度及分析果果，考虑到分析时间，采用上述色谱柱，优化流动相比例为0.5%磷酸二氢钾溶液-乙腈(8：92)；柱温对绿原酸的保留也有一定影响，温度越高，保留时间越短，样品在35到45℃均有较好的分析效果，考虑到样品的稳定性及分析时间，本次采用40℃条件进行测定。 石韦 样品来源：本品为水龙骨科植物庐山石韦 Pyrrosia sheareri (Bak.) Ching、 石韦Pyrrosialingua(Thunb.)Farwell 或有柄石韦Pyrrosia petiolosa (Christ) Ching 的干燥叶。产地：安徽。 对照品：绿原酸(上海同田生物技术有限公司，批号：08060731，含量： 98% 供试品溶液的制备：取本品粉末(过二号筛)约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25mL， 称定重量，超声处理(功率300W， 频率25kHz)45分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品适量，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1mL含40pg的溶液，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-3(4.6×150mm，5pm) 流动相：0.5%磷酸二氢钾溶液-乙腈(11：89) 柱温：40℃检测波长：326nm 流速：：1.0mL/mini进样量：10pL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-4 (4.6×150mm，5um) .中国药典2010年版对应高效液色谱方法图谱库(第一册) 引领分析析技.在北尿谱牙oaQQ4006165163 石韦 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： Intersil ODS-3 (4.6×150 mm，5um) LC-20ADXR高压泵 流动相：0.5%磷酸二氢钾溶液-乙腈(8~11：92~89) DGU-20A3 脱气机 柱温：30~40℃ SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 检测波长：326nm CTO-20AC柱温箱 流速：：1.0mL/min CBM-20A 系统空制器 SIL-20AC 自动进样器 标准样品 实际样品 (1)绿原酸标准品 (1) Detector A：326nm (1)石书中的绿原酸 (1) 名称 保留时间(min) 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 绿原酸 17.546 606357 21704 8927 1.01 绿原酸标准曲线 峰面积 重现性数据如下 No. 标准样品 保留时间 峰面积 实际样品 保留时间 峰面积 1 23 17.491 1088053 17.618 776116 17.496 1087466 17.618 773963 17.517 1085424 17.622 775223 AverageRSD% 17.501 1086981 17.619 775100 0.070 0.12 0.010 0.13 *本数据山北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 中国药典word版exe版pdf版及培训资料精华帖http：//www.yaojia.org/forum. php?mod=viewthread&tid=fromuid= 色谱柱Inertsil ODS-3 (4x150mm.5μm)流动相0.5%磷酸二氢钾溶液-乙腈(11:89 )柱温40℃检测波长326nm流速1.0ml/min 进样量10μL※此条件同样适用于lnertsil ODS-4 (4.6 x 150 mm, 5um)