金钱草中槲皮素/山奈素检测方案(液相色谱柱)

.中国药典2010年版对应高效液色谱方法图谱库(第一册)引领分析科技在北京朋raQQ汕4006165163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 金钱草分析 金钱草的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为报春花科植物过路黄Lysimachia christinae Hance的干燥全草。夏、秋二季采收，除去杂质，晒干。 【功能与主治】清利湿热，通淋，消肿。用于热淋，沙淋，尿涩作痛，黄疸尿赤，痈肿疔疮，毒蛇咬伤；肝胆结石，尿路结石。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4%磷酸溶液(50：50)为流动相；检测波长为360nm。理论板数按安皮素峰计算应不低于2500。 对照品溶液的制备：精密称取皮素对照品及山柰素对照品适量，加80%甲醇制成每1mL各含皮素4ug、山柰素20ug的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇50mL， 密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液25mL，精密加入盐酸5mL，置90℃水浴中加热水解1小时，取出，迅速冷却，转移至50mL量瓶中，用80%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10L， 注入液相色谱仪，测定，即得。 金钱草药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中金钱草的含量测定以檞皮素、山柰素为质量评价依据，皮素、山柰素在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：检测波长在360nm时二者吸收均较强，色谱图较优；流动相为甲醇-0.4%磷酸系统时，流动相的比例对对皮素、山柰素及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，选择甲醇比例在45~55%(v/v)之间均可以获得满意的分离度及分析效果，甲醇比例在52%(v/v)左右时，其分离度最好，优化流动相比例为甲醇-0.4%磷酸溶液(52：48)。柱温对榭皮素、山柰素的保留也有一定影响，温度越高，保留时间越短，样品在25到40℃均有较好的分离效果，考虑到样品的稳定性及分析时间，本次采用40℃条件进行测定。 此外，使用InertsilODS-4柱亦可得到较好分析效果。 金钱草 ( 样品来源：本品为报春花科植物过路黄Lysimachia christinae Hancc的干燥全草。夏、秋二季采收，除去杂质，晒干。产地：浙江。 ) 对照品：品皮素(上海同田生物技术有限公司，批号：08120411，含量：99%)、山柰素(上海同田生物技术有限公司，批号：08050421，含量：99%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇50mL， 密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液25mL， 精密加入盐酸5mL，置90℃水浴中加热水解1小时，取出，迅速冷却，转移至50mL量瓶中，用80%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 对照品溶液的制备：精密精密称皮素对照品及山柰素对照品适量，加80%甲醇制成每1mL各含榭皮素4ug、山柰素20pg的溶液，即得。 .中国药典2010年版对应高效液色谱方法图谱库(第一册) 引领分析析技.在北尿谱牙oaQQ4006165163 金钱草 色谱柱： Inertsil ODS-3 (4.6×150 mm， 5 um) 流动相：甲醇-0.4%磷酸溶液(52：48) 柱温：40℃ 检测波长：360nm流速：1.0mL/min进样羊：10pL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-4(4.6×150 mm，5pm) 仪器配置： 色谱柱： Intcrsil ODS-3(4.6×150mm，5p m) LC-20ADXR高压泵 流动相：乙腈-0.4%磷酸溶液(45~55：55~45) SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 柱温：25~40℃ CTO-20AC柱温箱 检测波长：360 nm CBM-20A系统控制器 流速：1.0mL/min SIL-20AC 自动进样器 标准样品 实际样品 标准样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因了 槲皮索 8.762 1682903 88784 4814 1.11 山柰索 15.131 237027 8437 6582 1.07 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因了 榭皮素 8.851 1738028 97772 5519 1.10 山柰素 14.908 159677 5954 6942 1.07 引领分析科技在北京朋raQQ汕4006165163 皮素的标准曲线 山柰素的标准曲线 皮素的重现性 No. 标准样品 保留时间 峰面积 实际样品 保留时间 峰面积 1 2 3 8.767 1685209 8.851 1738028 8.762 1682903 8.806 1732012 8.767 1677817 8.832 1735586 AverageRSD% 1681976 0.23 8.830 0.26 1735208 0.17 0.33 0.23 山柰素的重现性 No. 标准样品 保留时间 峰面积 实际样品 保留时间 峰面积 1 2 3 15.103 236559 159677 159608 159949 15.131 237027 14.905 159608 15.191 237155 14.960 159949 AverageRSD% 2369130.13 14.924 0.21 159744 0.11 0.30 *本数据山北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 中国药典word版exe版pdf版及培训资料精华帖http：//www.yaojia.org/forum. php?mod=viewthread&tid=fromuid= 色谱柱Inertsil ODS-3 (4.6 x 150 mm,5μm) 流动相:甲醇0.4%磷酸溶液(52 :48)柱温: 40℃检测波长360nm 流速1.0ml/min 进样量10μL此条件同样适用于Inertsil ODS-4(4.6 x 150 mm,5μm)