大叶紫珠中毛蕊花糖苷检测方案(液相色谱柱)

.中国药典2010年版对应高效液色谱方法图谱库(第一册)引领分析科技在北京朋raQQ汕40061i65163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 大叶紫珠分析 大叶紫珠的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为马鞭草科植物大叶紫珠 Callicarpa macrophyllu Vahl的干燥叶或带叶嫩枝。夏、秋二季采摘，晒干。 【功能与主治】散瘀止血，消肿止痛。用于衄血，吐血，咯血，便血，外伤出血，跌仆肿痛。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；充乙腈-0.5%磷酸溶液(17：83)为流动相；检测波长为332 nm。理论板数按毛蕊花糖苷峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备：取毛蕊花糖苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1mL含50pg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过4号筛)约0.25g，精密密定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，称定重量，放置过夜，加热回流60分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10pL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 大叶紫珠药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中大叶紫珠的含量测定以毛蕊花糖苷为质量评价依据，毛蕊花糖苷在InertsilODS-3中的色谱特点为：检测波长在332nm时吸收较强，色谱图较优；流动相为乙腈-0.5%磷酸溶液系统时，流动相的比例对毛蕊花糖苷及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，甲醇比例在15~22%(v/v)之间均可以获得满意的分离度及分析效果，乙腈的比例在18%(v/v)左右时，其分离度最好，优化流动相比例为乙腈-0.5%磷酸溶液(18：82)；柱温对毛蕊花糖苷的保留也有一定影响，温度越高，保留时间越短，样品在20到50℃均有较好的分离效果，考虑到样品的稳定性及分析时间，本次采用30℃条件进行测定。 此外，使用Inertsil ODS-4柱亦可得到较好分析效果。 大叶紫珠 样品来源：本品为马鞭草科植物大叶紫珠Callicarpa macrophylla Vahl的干燥叶或带叶嫩枝。夏、秋二季采摘，晒干。产地：浙江。 对照品：毛蕊花糖苷(上海同田生物技术有限公司，批号：09071121，含量：98%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过4号筛)约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50mL， 称定重量，放置过夜，加热回流60分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：取毛蕊花糖苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1mL含50ug的溶液，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-3 (4.6×150mm，5pm) 流动相：乙青-0.5%磷酸溶液(18：82) 柱温：30℃ 检测波长：332nm流速：1.0mL/mini进样量：：10pL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-4(4.6×150 mm，5 um) .中国药典2010年版对应高效液色谱方法图谱库(第一册) 65163 大叶紫珠 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6x150mm，5 um)流动相：乙腈-0.5%磷酸溶酸(15~22：85~78)柱温：：20~50℃检测波长：332nm流速：1.0 mL/min LC-20ADXR高压泵SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器CTO-20AC柱温箱CBM-20A 系统控制器SIL-20AC 自动进样器 标准样品 实际样品 标准样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 毛蕊花糖苷 11.885 1381079 54080 5019 0.94 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾囚了 毛蕊花糖苷 11.917 1352320 53763 5082 0.97 毛蕊花糖苷的标准曲线 大叶紫珠的重现性 No. 标准样品保留时间 峰面积 实际样品 保留时间峰面积 1 11.911 1383480 11.917 1352320 2 11.885 1381079 11.926 1357404 3 11.912 1382289 11.917 1355843 Average 11.903 1382283 11.92 1355189 RSD% 0.13 0.09 0.04 0.19 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 浓度mg/L 中国药典word版exe版pdf版及培训资料精华帖http：//www.yaojia.org/forum.php?mod=viewthread&tid=fromuid= 色谱柱Inertsil ODS-3 (4.6 x 150 mm, 5μm) 流动相:乙腈-0.5%磷酸溶液( 18 : 82) 柱温: 30℃检测波长332 nm 流速1.0 ml/min进样量10μL※此条件同样适用于Inertsil ODS-4(4.6 x 150 mm, 5μm)