垂盆草中槲皮素/山奈素/异鼠李素检测方案(液相色谱柱)

+中国国典2010年版对应高效色谱方法图冬库(第一册)65163 引领分析沂技.在北尿谱oaQQ40061 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 垂盆草分析 垂盆草的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为景天科植物垂盆草 Sedum sarmentosum Bunge的新鲜或干燥全草。夏、秋二季采收，除去杂质。干燥或鲜用。【功能与主治】清利湿热，解毒。用于湿热黄疸，小便不利，痈肿疮疡；急、慢性肝炎。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷硅合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4%磷酸(45：55)为流动相；检测波长为360nm。理论板数按檞皮素峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备：取耶皮素、山柰素、异鼠李素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL各含15ug、5ug、5pg的混合溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品品末(过二号筛)约0.5g，精密称定，精密加入甲醇-25%盐酸溶液(4：1)混合溶液25mL， 称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇-25%盐酸溶液(4：1)混合溶液补足减失的重量，摇匀 滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10uL，注入液相色谱谱，测定，即得。 垂盆草药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中垂盆草的含量测定以檞皮素、山柰素、异鼠李素为质量评价依据， 其在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：检测波长在360 nm时3个对照品吸收均接近最强，色谱图较忧；流动相为甲醇-1%磷酸系统时，流动相的比例对檞皮素、山柰素、异鼠李素及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，甲醇比例在45~55%(v/v)之间均可以获得较好的分离度及分析效果，甲醇比例在51%(v/v)左右时，其分离度最好；柱温对皮皮素、山柰素、异鼠李素的保留也有一定影响，在25到45℃时样品分离度较好。经过考察，在流动相比例为甲醇--1%磷酸溶液(51：49)，柱温32℃的色谱条件下，使用Inertsil0DS-3(4.6×150 mm， 5 um)柱能得到满意的分析效果。 此外，使用Inertsil ODS-4柱亦可得到较好分析效果。 垂盆草 样品来源：本品为景天科植物垂盆草Sedum sarmentosun Bunge的新鲜或干燥全草。产地：湖南。 对照品：皮素(上海同田生物技术有限公司，批号：08120411，含量：99%)、山柰素(上海同田生物技术有限，公司，批号：08050421，含量：99%)、异鼠李素(上海同田生物技术有限公司，批号：08102701，含量：99%) 供品溶液的制备：取本品粉末(过二号筛)约0.5g，精密称定，精密加入甲醇-25%盐酸溶液(4：1)混合溶液25mL， 称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇-25%盐盐溶液(4：1)混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：取取皮素、山柰素、异鼠李素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL各含15ug、5pg、5pg的混合溶液，即得。 色谱普： Inertsil ODS-3(4.6×150 mm，5um)流动相：甲醇-1%磷酸溶液(51：49) 柱温：32℃ 检测波长：360 nm1流速：1.0mL/min i进样量：10pL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-4 (4.6x150mm， 5pm) .中国药典2010年版对应高效液色谱方法图谱库(第一册)引领分析析技.在北尿谱牙oaQQ4006165163 垂盆草 推荐使用条件范围：色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150 mm，5pm)流动相：甲醇-1%磷酸溶液(45~55：55~45)柱温：25~45℃检测波长：360 nm流速：1.0 mL/min 仪器配置： LC-20ADXR高压泵 SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 CTO-20AC柱温箱 CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC 自动进羊器 标准样品 实际样品 标准样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因了 槲皮素 12.270 511566 21064 5853 1.12 山柰素 21.989 91445 2682 8061 1.15 7759 24.188 261114 6249 7759 1.09实际样品名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 皮素 12.314 470296 18506 5502 1.04 山柰索 21.806 90739 2598 8262 1.03 异鼠李素 24.399 179924 4093 7274 1.18 引领分析科技技京谱朋ro阴dQQ4006165163 槲皮素的标准曲线 山柰素的标准曲线 异鼠李素的标准曲线 皮素的重现性 No. 标准样品保留时间 峰面积 实际样品保留时间 峰面积 2 3 12.246 510068 12.314 470296 12.270 511566 12.298 468930 12.265 509296 12.285 468439 AverageRSD% 12.260 5103100.10 0.23 12.299 469222 0.12 0.21 浓度mg/L 山柰素的重现性 异鼠李素的重现性 No. 标准样品保留时间峰面积 实际样品 保留时间峰面积 12 3 21.989 9144521.820 9179121.820 91875 21.806 90739 21.759 90495 21.733 90567 AverageRSD% 21.876 917040.45 0.25 21.766 90600 0.17 0.14 No. 标准样品 保留时间 峰面积 实际样品 保留时间峰面积 1 2 3 24.432 26072024.188 26111424.172 261639 24.399 179924 24.410 180707 24.326 180197 AverageRSD% 24.264 2611580.60 0.18 24.378 1802760.19 0.22 *本数据山北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 中国药典word版exe版pdf版及培训资料精华帖http：//www.yaojia.org/forum. php?mod=viewthread&tid=fromuid= 色谱柱Inertsil ODS-3 (4.6 x 150 mm, 5μm) 流动相:甲醇-1%磷酸溶液(51:49) 柱温32℃检测波长360nm 流速1.0ml/min  进样量10μL此条件同样适用于Inertsil ODS-4 (4.6 x 150 mm,5μm)