仙茅中仙茅苷检测方案(液相色谱柱)

中国药典2010年版对应高效浓色谱方法图增库(第一册)65163引领分析析技.在北尿谱牙oaQQo40061 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 仙茅分析 仙茅的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为石蒜科植物仙茅Curculigo orchioides Gaertn.的干燥根茎。秋、冬二季采挖，除去根头和须根，洗净，干燥。 【功能与主治】补肾阳，强筋骨，祛寒湿。用于阳痿精冷，筋骨瘘软，腰膝冷痹，阳虚冷泻。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%磷酸溶液(21：79)为流动相；检测波长为285nm。理论板数按仙茅苷峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备： 取仙茅苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含70ug的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约1g，精密称定，精密加入甲醇50mL，称定重量，加热回流2小时，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液20mL，蒸干，残渣加甲醇溶解，移至10mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供供品溶液各10uL，注入液相色谱仪，测定，即得。 仙茅药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中仙茅的含量测定以仙茅苷为质量评价依据，仙茅苷在InertsilODS-4中的色谱特点为：检测波长在285nm时仙茅苷吸收最强，色谱图较好；流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液系统时，流动相的比例对仙茅苷及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，乙腈比例在17~25%(v/v)之间均可以获得满意的分离度及分析效果，乙腈比例在21%(v/v)左右时，其分离度最好，确定流动相比例为乙腈-0.1%磷酸溶液(21：79)；柱温对仙茅苷的保留时间有很大影响，温度越高，保留时间越短，样品在25到45℃均有较好的分析效果，考虑到样品的稳定性及分析时间，本次采用35℃条件对仙茅样品进行分析测定。 此条件同样适用于在Inertsil ODS-3(4.6×150 mm，5um)中对仙茅进行分析。 仙茅 样品来源：本品为石蒜科植物仙茅 Curculigo orchioides Gaertn.的干燥根茎。产地：河北。 对照品：仙茅山(中国药品生物制品检定所，批号：110771-200904，含量：99.6%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约1g，精密称定，精密加入甲醇50mL，称定重量，加热回流2小时，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液20mL，蒸干，残渣加甲醇溶解，移至10mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。 对照品溶液的制备：取仙茅苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含70pg的溶液，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-4(4.6×150 mm，5um)流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液(21：79) 柱温：35℃检测波长：285nm流速：1.0mL/min 进样量：：10p儿 ※此条件同样适用于Inertsil ODS-3 (4.6×150mm，5 pm)。 .中国药典2010年版对应高效液色谱方法图谱库(第一册)引领分析析技.在北尿谱牙oaQQ4006165163 仙茅 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： Intersil ODS-4(4.6×150 mm，5 pm) LC-20ADXR高压泵 流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液(17~25：83~75) SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 柱温：25~45℃ CTO-20AC柱温箱 检测波长：285nm CBM-20A 系统控制器 流速： 1.0mL/min SIL-20AC 自动进样器 标准样品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 仙茅苷 11.532 434771 23642 9155 1.08 仙茅苷标准曲线 仙茅苷的重现性 No. 标准样品保留时间峰面积 实际样品 保留时间 峰面积 1 2 3 11.509 425998 11.496 43450811.512 435540 11.479 429140 11.516 426144 11.532 434771 AverageRSD% 11.501 427094 11.513 434939 0.17 0.42 0.16 0.13 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 浓度mg/L 中国药典word版exe版pdf版及培训资料精华帖http：//www.yaojia.org/forum. php?mod=viewthread&tid=fromuid= 色谱柱Inertsil ODS-4(4.6 x 150 mm, 5μm) 流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(21:79)柱温: 35℃检测波长285 nm 流速1.0ml/min进样量10μL※此条件同样适用于Inertsil ODS-3 (4.6 x 150 mm, 5μm)