地锦草中槲皮素检测方案(液相色谱柱)

.中国药典2010年版对应高效液色谱方法图谱库(第一册)引领分析科技斗在北京谱朋r牙eayQQ4006165163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 地锦草分析 地锦草的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为大戟科植物地锦Euphorbia humifusa Willd.或斑地锦Euphorbia maculata L.的干燥全草。夏、秋二季采收，除去杂质，晒干。 【功能与主治】清热解毒，凉血止血。用于痢疾，泄泻，咯血，尿血，便血，崩漏，疮疖痈肿。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4%磷酸溶液(50：50)为流动相；检测波长为360 nm。理论板数按皮素峰计算应不低于2500。 对照品溶液的制备：精密称取称皮素对照品，加80%甲醇制成每1mL含20ug的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇50mL，密塞，称定重量，加热回流1.5小时，放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液20mL， 精密加入25%盐酸7mL，置85℃水浴中水解30分钟，取出，迅速冷却，转移至50mL量瓶中，并加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10uL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 地锦草药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中地锦草的含量测定以檞皮定为质量评价依据，檞皮素在Inertsil ODS-4中的色谱特点为：流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液系统时，流动相的比例对皮素与相邻色谱峰的分离影响显著，柱温对檞皮素与相邻色谱峰的分离基本无影响。采用上述色谱柱，优化流动相比例为甲醇-0.4%磷酸溶液(45：55)，柱温35℃。此条件同样适用于Inertsil ODS-3色谱柱对地锦草的分析。 地锦草 样品来源：本品为大戟科植物地锦Euphorbia humifusa Willd.的干燥全草。产地：安徽。 对照品：榭皮素(上海同田生物技术有限公司，批号：08120411，含量：99.436%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇50mL，密塞，称定重量，加热回流1.5小时，放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液20mL，精密加入25%盐酸7mL，置85℃水浴中水解30分钟，取出，迅速冷却， 转移至50mL量瓶中，并加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：精密称取尔皮素对照品，加80%甲醇制成每1mL含20ug的溶液，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-4(4.6×150 mm，5 u m) 流动相：甲醇-0.4%磷酸溶液(45：55) 柱温：35℃ 检测波长：360 nm 流速：1.0mL/min 进样量：5uL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-3色谱柱对地锦草的分析。 .中国药典2010年版对应高效液色谱方法图谱库(第一册)引领分析析技.在北尿谱牙oaQQ4006165163 地锦草 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： Intersil ODS-4(4.6×150mm，5 pm)流动相：甲醇-0.4%磷酸溶液(45~55：55~45)；柱温：30~55℃检测波长：360 nm流速：1.0 mL/min LC-20ADXR高压泵 DGU-20A3脱气机 SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 CTO-20AC柱溫箱 CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC 自动进样器 标准样品 名称 保留时间(min) 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 槲皮素 11.935 230483 11854 8430 1.08 实际样品 名称 保留时间(min) 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 槲皮素 12.013 73927 3811 8373 1.08 地锦草的标准曲线 重现性数据如下 No. 1 标准样品保留时间 峰面积 11.935 230483 实际样品 保留时间 峰面积 12.008 2 3 11.923 218122 11.931 216877 7641912.013 73927 12.011 75328 AverageRSD% 11.930 221827 12.010 75224 0.0005 0.034 0.0002 0.016 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 中国药典word版exe版pdf版及培训资料精华帖http：//www.yaojia.org/forum. php?mod=viewthread&tid=fromuid= 色谱柱Inertsil ODS-4(4.6 x 150 mm, 5μm)流动相:甲醇：0.4%磷酸溶液(45:55)柱温: 35℃检测波长360nm流速1.0 mLlmin进样量: 5μL※此条件同样适用于Inertsil ODS-3色谱柱