香橼中柚皮苷检测方案(液相色谱柱)

中国药典2010年版对应高效液相色谱方法图谱库(第一册 2010版中国药典word版exe版pdf版及培训资料精华帖http：//www.yaojia.org/forum.php?mod=viewthread&tid=18529&fromuid=1023 引领分析科技人在北京谱明企谱QQ：40061 65163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 香橼分析 香橼的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为芸香科植物枸橼Citrus medica L.或香圆Citrus wilsonii Tanaka的干燥成熟果实。秋季果实成熟时采收，趁鲜切片，晒干或低温干燥。香圆亦可整个或对剖两半后，晒干或低温干燥。 【功能与主治】舒肝理气，宽中，化痰。用于肝胃气滞，胸胁胀痛，脘腹痞满，呕吐噫气，痰多咳嗽。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰乙酸溶液(30：63：3)为流动相；检测波长284nm。理论板数按柚皮苷峰计算应不低于4000。 对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1mL含30pg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过五号筛)约75mg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25mL，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2mL， 置10mL量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20pL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 香橼药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中香橼的含量测定以柚皮苷为质量评价依据，柚皮苷在InertsilGODS-4中的色谱特点为： 检测波长在284nm时柚皮苷吸收最强，色谱图优于药典方法的检测波长；在流动相组成为甲醇-水-冰乙酸溶液系统时，柚皮苷附近无其他杂质峰，流动相甲醇的比例愈高，其保留时间愈短，选择甲醇比例在26~35%(v/v)之间均可以获得满意的峰形，考虑到分析时间长短，采用上述色谱柱，优化流动相比例为甲醇-水-冰乙酸(30：63：3)；柱温对柚皮苷的保留时间也有显著影响，温度越高，保留时间越短，此外，pH值对柚皮苷的保留时间有较为显著的影响， pH值越低，其保留时间越短，样品在25到45度均有较好的分析效果，考虑到样品的稳定性及分析时间，本次测定采用甲醇-水-冰乙酸(30：63：3)，35度下进行分析。 香橼 样品来源：本品为芸香科植物枸橼Citrus medica L.或香圆Citrus wilsonii Tanaka的干燥成熟果实。产地：广东。 对照品：柚皮苷(上海同田生物技术有限公司，批号：09040431，含量：98.674%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过五号筛)约75mg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25mL，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2mL，置10mL量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1mL含30pg的溶液，即得。 色谱柱： Inerisil ODS-3(4.6×150 mm，5p m) 流动相：甲醇-水-冰乙酸溶液(30：63：3) 柱温：35℃ 检测波长：284nm 流速：1.0mL/min 进样量：10pL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-4 (4.6 mm x 150 mm，5um)。 引领分析科科在北京谱朋QQ：40061 65163 香橼 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150 mm，5 pm) LC-20ADXR高压泵 流动相：甲醇-水-冰乙酸溶液(26-35：67-58：0.1-3) SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 柱温：25~45℃ CTO-20AC柱温箱 检测波长：284 nm CBM-20A系统控制器 流速：1.0mL/min SIL-20AC 自动进样器 标准样品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 柚皮苷 11.009 1480898 61839 4816 1.02 柚皮苷的标准曲线 柚皮苷的重现性 N0. 标准样品 实际样品 保留时间 峰面积 保留时间 峰面 1 11.009 1480898 10.988 12173 2 11.008 1482563 10.990 12179 3 11.013 1480983 10.987 12208 AverageRSD% 11.010 1481481 10.988 12187 0.02 0.1( 0.03 0.07 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 /D 2010版中国药典word版exe版pdf版及培训资料精华帖 http：//www.yaojia.org/forum. php?mod=viewthread&tid=18529&fromuid=1023 色谱柱Inertsil ODS-3(4.6x 150 mm, 5um)流动相·甲醇-水-冰乙酸溶液(30：63：3)柱温: 35℃检测波长284 nm流速1.0 ml/min进样量10μL※此条件同样适用于Inertsil ODS-4 (4.6 mm x 150 mm, 5μm)