独活中蛇床子素检测方案(液相色谱柱)

2010版中国药典电子书(三部齐全， pdf高清版，可复制)引领分析科技.尽在北京谱朋普QQ：40061665163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 独活分析 独活的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为伞形科植物重齿毛当归Angelica pubescens Maxim.f. biserrata Shan et Yuan的干燥根。春初苗刚发芽或秋末茎叶枯萎时采挖，除去须根及及沙，烘至半干，堆置2~3天，发软后再烘至全干。 【功能与主治】祛风除湿，通痹止痛。用于风寒湿痹，腰膝疼痛，少阴伏风头痛，风寒挟湿头痛。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(60：40)为流动相；检测波长为322nm。理论板数按蛇床子素峰计算应不低于6000. 对照品溶液的制备：精密称取蛇床子素对照品适量，加甲醇制成醇1mL含50pg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇20mL， 称定重量，超声处理(功率300W，频率15kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液5mL， 置20mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供与品溶液各10pL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 独活药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中独活的含量测定以蛇床子素为质量评价依据，蛇床子素在Inertsil1ODS-4中的色谱特点为：在流动相组成为乙腈-水系统时，流动相的比例对蛇床子与相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相乙腈比例愈低，其分离度愈好，选择乙腈比例在45~65%(v/v)之间均可以获得满意的分离度，考虑到分析时间长短，采用上述色谱柱，优化流动相比例为乙腈-水(60：40)；对温对蛇床子素与相邻色谱峰的分离有影响，温度越高，分离度越好故选择45℃。 独活 样品来源：本品为伞形科植物重齿毛当归Angelica pubescens Maxim.f. biserrata Shan et Yuan的干燥根。春初苗刚发芽或秋末茎叶枯萎时采挖，除去须根及泥沙，烘至半干，堆置2~3天，发软后再烘至全干。产地：湖北。 对照品：蛇床子素(含量：99.25%) 供试品溶液的制备：取本品本末(过三号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇20mL，称定重量，超声处理(功率300W，频率15kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液5mL， 置20mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 对照品溶液的制备：精密称取蛇床子素对照品适量，加甲醇制成每1mL含50pg的溶液。 色谱柱： Inertsil ODS-4(4.6×150mm，5um) 流动相：乙腈-水(60：40) 柱温：45℃ 检测波长：322nm 流速：1mL/min 进样量：10uL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-3(4.6×150mm，5 pm)。 2010版中国药典电子书(三部齐全， pdf高清版，可复制)引领分析科技在北京京谱QQ.40061665163 独活 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： Intersil ODS-(4.6×150mm，5um) LC-20ADXR高压泵 流动相：乙腈-水(50~65：50~35) SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 柱 温：45℃ CTO-20AC柱温箱 检测波长：322nm CBM-20A 系统控制器 流 速：1.0mL/min SIL-20AC 自动进样器 标准样品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 蛇床子素 7.638 372556 38399 13487 1.07 蛇床子素标准曲线 重现性数据如下 No. 标准样品 保留时间 峰面积 实际样品 保留时间 峰面积 1 23 7.646 57207817.637 5766157.647 572157 7.638 3725567.637 3785637.634 375432 AverageRSD% 7.643 573617 7.636 375517 0.07 0.45 0.02 0.80 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-4(4.6x 150mm, 5um)流动相：乙腈-水(60:40)柱温：45℃检测波长：322nm流速：1mL/min进样量：10ul※此条件同样适用于Inertsil ODS-3(4.6 x 150mm, 5um)。