秦艽中龙胆苦苷检测方案(液相色谱柱)

2010版中国药典电子书(三部齐全， pdf高清版，可复制)68 引领分析科技在北京谱朋谱QQ：40061L665163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 秦艽分析 秦艽的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为龙胆科植物龙艽Gentiana macrophylla Pall.、麻花秦艽 Gentiana straminea Maxim.、粗茎秦艽Gentianacrassicaulis Duthie ex Burk.或小秦艽 Gentiana dahurica Fisch.的干燥根。前三种按性状不同分别习称“秦艽”和“麻花艽”，后一种习称“小秦艽”。春、秋二季采挖，除去泥沙；秦艽及麻花艽晒软，堆置“发汗”至表面呈红黄色或灰黄色时，摊开晒干，或不经“发汗”直接晒干；小秦艽趁鲜时搓去黑皮，晒干。 【功能与主治】祛风湿，清湿热，止痹痛，退虚热。用于风湿痹痛，中风半身不遂，筋脉拘挛，骨节酸痛，湿热黄疸，骨蒸潮热，小儿疳积发热。 l含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(1：4)为流动相；检测波长为254nm。理论板数按龙胆苦苷峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备：精密称取龙胆苦苷对照品照量，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.5g，精密称定，加甲醇20mL，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液减压回收至干，残渣用适量甲醇溶解，滤过，转移至50mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取1mL， 置5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10pL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 秦艽药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中龙胆的含量测定以龙胆苦苷为质量评价依据，龙胆苦苷在Inertsil ODS-4中的色谱特点为：在流动相组成为甲醇-水系统时，流动相的比例对龙胆苦苷与相邻色谱峰的分离影响显著，甲醇比例越低分离度越高，选择甲醇比例在20~30%(v/v)，柱温对龙胆苦苷与相邻色谱峰的分离基本无影响。采用上述色谱柱，优化流动相比例为甲醇-水(25：75)，柱温35℃。此条件同样适用于Inertsil ODS-3色谱柱对秦艽的分析。 秦艽 样品来源：本品为龙胆科植物秦艽Gentiana macrophylla Pall.的干燥根。产地：甘肃。 对照品：龙胆苦苷(含量：99.06%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.5g，精密称定，加甲醇20mL，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液减压回收至干，残渣用适量甲醇溶解，滤过，转移至50mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取1mL， 置5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 对照品溶液的制备：精密称取龙胆龙苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液，摇匀，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-4(4.6×150mm，5pm) 流动相：甲醇-水(25：75) 柱温：35℃检测波长：270nm 流速：1mL/min 进样量： 5pL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-3色谱柱对秦艽的分析。 2010版中国药典电子书(三部齐全， pdf高清版，可复制)引领分析科技在北京京谱QQ.40061L665163 秦艽 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： Intersil ODS-4(4.6x150mm， 5pm) LC-20ADXR高压泵 流动动：甲醇-水(20~30：80~70) DGU-20A3脱气机 柱 温：30~55℃ SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 检测波长： 270nm CTO-20AC柱温箱 流 速：1.0mL/min CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC 自动进样器 标准样品 实际样品 270nm，4nm (1.00) (1) (1)秦艽中的龙胆苦苷 业 (1) (1)龙胆苦苷标准品 名称 保留时间(min) 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 龙胆苦苷 10.576 1190314 61392 6681 1.05 重现性数据如下 No. 标准样品保留时间 峰面积 实际样品保留时间 峰面积 1 10.574 1175377 10.576 1027813 10.565 1169351 10.565 1009328 2 3 10.576 1190314 10.574 1015621 AverageRSD% 10.563 1608203 10.572 1017587 0.06 0.91 0.057 0.92 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS4(4.6x 150mm, 5um)流动相：甲醇-水(25:75)柱温：35℃检测波长：270nm流速：1mL/min进样量：5ul※此条件同样适用于Inertsil ODS-3色谱柱对秦艽的分析。