化妆品中氨基己酸、苯并[α]芘、补骨脂素等检测方案

2015.5 资生室 化妆品研发、生产、销售化妆品液相色谱分析技术先行者 资生堂(中国)投资有限公司先端科学事业推进部 F五周年刊Pc C PCESFLL PAK NANOSPA 1872资生堂正式登上历史舞台日本首家西式调剂药房在东京银座创立 1981北京市友谊商店、北京饭店等9家大型商场，开始销售60个品种的资生堂化妆品 1983和北京市衫结第1次技术合作协定(商品名为“华姿”的洗发液、护发素等) 1987资生堂CAPCELL PAK系列色谱柱上市 1991资生堂丽源化妆品有限公司成立 1993 资生堂NANOSPACE系列液相色谱仪上市 1994 中国地区专供产品AUPRES (欧珀莱)上市 1998 上海卓多姿中信化妆品有限公司成立 2001资生堂(中国)研究开发中心有限公司成立 20088资生堂中国培训中心成立20100资生堂(中国)投资有限公司先端科学事业推进部成立 2014 株式会社资生堂连续三三被评为“全球最具商业道德企业” 2014资生堂在第10届中国化妆品学术研讨会上包揽优秀研究论文一二三等奖，将先进的研究成果应用于面向中国市场的护肤产品中 2014资生堂第19次荣获国际化妆品化学家学会联盟(IFSCC)“最优秀奖”-----成为连续5年·世界获奖最多企业 2015资生堂强化商品开发和研发体制的现地化 资生堂液相色谱产品常见品牌 资生堂化妆品常见品牌 资生堂，化妆品生产企业中唯一的液相色谱从业者，液相色谱生产企业中唯一的化妆品从业者。 这独特的双重身份使得资生堂先端科学事业推进部 ( Frontier Science) 自2010年5月进入中国市场以来，一致热衷于推进中国化妆品检测能力，并进行了一系列的相关工作。 2011年，中国食品药品检定研究院与资生堂集团技术交流会。 2012年，资生堂与岛津合作启动HPLC化妆品分析系统研发工作。 2013年，资生堂岛津HPLC化妆品分析系统开发完成，在北京、上海和广州召开新品发布会后，开展了试用和评估工作。 2014年，资生堂岛津HPLC化妆品分析系统正式发售。 2015年， 《化妆品安全技术规范(征求意见稿)》2月公布，资生堂FS事业部技术中心立刻针对新规范开展相应的实验工作。 在《规范》公布之后的三个月中，针对其中有关液相色谱分析的47个项目， FS技术中心已经完成了其中25项的实验工作，资生堂液相色谱的会员也积极反馈了其中1个项目的实验结果。 现将数据整理如下，希望也能对您的工作有所帮助。 氨基己酸 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4. 6mmi.d.×250mm 流动相：甲醇+0.1mol/L磷酸二氢铵溶液(磷酸调节pH至3.0)=2+98流速：1.0 mL/min温 度：30℃ 测： PDA 210 nm 进样量：20uL 样 品：1、氨基己酸 补骨脂素等 氢醌、苯酚 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4. 6mmi.d.×250mm 流动相：甲醇+水=60+40 速：1.0mL/min 度：室温 位：测：PDA 280 nm 进样量：5uL 样品：1、氢醌，2、苯酚 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4.6mmi.d.×150mm 流动相：甲醇+水=90+10流速：1.0mL/min温度：35℃检7测：荧光检测器，激发波长370 nm，发射波长406nm进样量：20以L 样品：1、苯并[a]芘 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4.6mmi.d.×250mm流动相：乙腈+水=40+60速：1.0 mL/min度：30℃检测： PDA 220 nm进样量：10mL样品浓度：100Hg/mL，溶剂为乙腈 样 品：1、马来酸二乙酯 氢醌、苯酚 mAU 色谱柱： CAPCELL CORE C18 S2.7，4.6mmi.d.×150mm 流动相：甲醇+水=60+40 流i速：1.0 mL/min温度：室温 检测： PDA 280 nm 进样量：5uL 样品：1、氢醌，2、苯酚 维生素D2和维生素D3 6-甲基香豆素 mAU 2 75- 50- 1 25- 0- 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 色谱柱： SPOLAR C18 S5， 4.6mmi. d.×250mm 流动相：甲醇+乙腈=90+10流优速：1.0 mL/min温度：30℃检测：UV 265 nm进样量：5uL 样 品：1、维生素D2，2、维生素D3 间苯二酚 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4.6mmi.d.×250mm 流动相：甲醇+水=20+80 流速：1.0 mL/min温检 度：30℃ 测： PDA 274 nm 进样量：20uL 样 品：1、间苯二酚 羟基喹啉 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4. 6mmi.d.×250mm 流动相：甲醇+0.01moL/L癸烷磺酸钠(磷酸调pH至2.25)=60+40元速：1.0mL/min 度：25℃ 测： PDA 240 nm 进样量：20uL 样品：1、羟基喹啉 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4.6mmi.d.×250mm流动相：A：甲醇 B： 0.02mol/L磷酸二氢钠溶液(pH=3.5)，B 45%(0min)-45%(11min)-10%(12min)-10%(40min)-45%(41min)-45%(50min) 流速：1.0mL/min温检 度：35℃ 测： PDA 275 nm 进样量：10uL 样品浓度：100Hg/mL，溶剂为甲醇 样品：1、6-甲基香豆素 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4. 6mmi.d.×250mm 流动相：甲醇+0.01mol/L(NH4)2HP04=90+10流速：：1.0mL/min温度：30℃检测： PDA 328 nm进样量：20uL 样 品：1、奎宁 巯基乙酸 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4.6mmi.d.×250mm流动相：乙腈+0.01mol/LKH2P04(磷酸调pH至2.5)=10+90流速：1.0 mL/min温度：30℃ 检测：PDA 215 nm 进样量：20uL 色谱柱： CAPCELL PAK C8 DD S5， 4. 6mmi.d.×250mm 流动相：A，磷酸溶液200.0mL，并用水稀释稀1000mL； B， 磷酸溶液250.0mL，并用甲醇稀释至1000mL， 速：1.2mL/min B) 20%(0min)-90%(10.0min)-90%(15min)-20%(15.1min)-20%(20.0min)流温检 度：30℃ 测： PDA 300 nm 进样量：20uL 样 品：1、水杨酸 苯甲酸 mAU 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4. 6mmi.d.×250mm 流动相：A：磷酸二氢钠缓冲液(0.02mol/L，磷酸调pH为2.2)；B：甲醇， B)5E0%(0min)-50%(10min)-10%(11min)-10%(40min)-50%(41min)-50%(50min) 速：1.0 mL/min 度：35℃ 测： PDA 230 nm 进样量：10pL 样品：1、苯甲酸 苯扎氯铵 色谱柱： CAPCELL PAK CN UG120 S5， 4. 6mmi.d.×250mm 流动相：乙腈+0.1mol/L醋酸铵缓冲溶液(冰醋酸调pH至5.0)=70+30流一速：1.0 mL/min温检 度：25℃ 测： PDA 260 nm 进样量：20uL 样品：1、十二烷基二甲基苄基氯化铵，2、十四烷基二甲基苄基氯化铵，3、十六烷基二甲基苄基氯化铵 min 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4.6mmi.d.×250mm流动相：A：水 B：甲醇，B 35%(0min)-35%(12min)-70%(15min)-100%(20min)-100%(35min)-35%(40min)-35%(45min)流速：1.0 mL/min温度：35℃检测： PDA 210 nm进量：10uL样品：1、苯甲醇 苯氧异丙醇 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4.6mmi.d.×250mm 流动相：水+乙腈+甲醇+四氢呋喃=70+20+5+5 速：1.2mL/min 度：30℃ 流温检测： PDA 268 nm 进样量：20uL 样品浓度：200Hg/mL，溶剂为甲醇 样品：1、苯氧异丙醇 甲醛 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4.6mmi.d.×250mm 流动相：甲醇+水=60+40 流速：1.0mL/min 温度：30℃ 检测： PDA 355 nm ( 进样量 ： 1 0uL ) ( 样 品：1、甲醛 ) 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4.6mmi.d.×250mm 流动相： 0.05mol/L磷酸二氢钠+甲醇+乙腈=50+35+15，添加氯化十六烷三甲胺至最终浓度为0.002mol/L， 并用磷酸调pH至3.5 流速：1.0mL/min温检 度：室温 测： PDA 254 nm 进样量：5uL 样品：1、甲基异噻唑啉酮，2、甲基氯异噻唑啉酮，3、2-溴-2-硝基丙烷-1，3-二醇，4、苯甲醇，5、苯氧乙醇，6、4-羟基苯甲酸甲酯，7、苯甲酸，8、4-羟基苯甲酸乙酯，9、4-羟基苯甲酸异丙酯，10、4-羟基苯甲酸丙酯，11、4-羟基苯甲酸异丁酯，12、4-羟基苯甲酸丁酯 苯基苯并咪唑磺酸等 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4. 6mmi.d.×250mm 流动相：甲醇十四氢呋喃十水南高氯酸=250+450+300+0.2流速：1.0 mL/min度：温温检 测： UV 311 nm 进样量：10uL 样品：1、苯基苯并咪唑磺酸，2、二苯酮-4和二苯酮-5，3、对氨基苯甲酸，4、二苯酮-3，5、p-甲氧基肉桂酸异戊酯，6、4-甲基苄亚基樟脑，7、PABA乙基己酯，8、丁基甲氧基二苯酰基甲烷，9、奥克立林，10、甲氧基肉桂酸乙基己酯，11、水杨酸乙基己酯，12、胡莫柳酯 0 10 15 20 25 30 35 min 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4. 6mmi. d.×250mm 流动相：A：水 B：乙腈， 流温度：30℃ 速：1.0 mL/min 检测： PDA 335 nm进样量：10uL样品浓度：20Hg/mL， 溶剂为90%甲醇样品：1、二苯酮-2 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4.6mmi.d.×250mm 流动相：甲醇+四氢呋喃十水+高氯酸=450+500+50+0.5速：1.0mL/min 度：室温 流温检测： UV 311 nm进样量：10uL样 品：：13、乙基己基三嗪酮，14、亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚，15、双-乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪 对苯二胺等 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4. 6mmi.d.×250mm 流动相：将三乙醇胺10mL加至980mL水中，加入磷酸使溶液pH为7.7，加水至1L。取此溶液950mL与乙腈50mL混合组成含5%乙腈的磷酸缓冲溶液 度：30℃ 流速：1.0 mL/min温检 t测： PDA 280 nm 进样量：5uL 样品：1、p-苯二胺，2、氢醌，3、m-氨基苯酚，4、o-苯二胺， ( 5、p-氨基苯酚，6、甲苯2， 5 - 二 胺，7、间苯二 酚 ， ) 8、p-甲氨基苯酚 水杨酸等 盐酸美满霉素等 色谱柱： SPOLAR C18 S5， 4.6mmi.d.×150mm 流动相：乙乙+甲醇+0.01mol/L磷酸二氢钾溶液(添加乙二胺四乙酸二钠至0.5mmol/L，并用磷酸调节pH=4.0)=50+10+40 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4.6mmi.d.×250mm 流动相： 0.01mol/L草酸(磷酸调pH2.0)+甲醇+乙腈=67+11+22 速：1.0 mL/min 速：0.8 mL/min 度：30℃ 测： PDA 230 nm 进样量：5uL 剂：样品用乙腈+甲醇=95+5的溶液溶解 品：1、酮康唑，2、水杨酸，3、氯咪巴唑，4、吡罗克酮乙醇胺盐 流温度：室温检测：PDA 268 nm进样量：10uL样品：1、盐酸美满霉素，2、甲硝唑，3、二水土霉素，4、盐酸四环素，5、盐酸金霉素，6、盐酸多西环素，7、氯霉素 雌三醇等 雌三醇等 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4.6mmi.d.×250mm 流动相：甲醇+水=60+40 速：1.3 mL/min 度：室温 测： PDA 204 nm 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5， 4.6mmi.d.×250mm流动相：甲醇+水=60+40流速：1.3mL/min温度：室温检测： PDA 245 nm 进样量：5uL 进样量： 5uL 样 品：1、雌三醇，2、雌酮，3、雌二醇，4、己烯雌酚 样品：1、睾丸酮，2、己烯雌酚，3、甲基睾丸酮，4、黄体酮 化妆品检验检测任重道远，资生堂FS技术中心将会不停的努力下去，上列数据仅是一个开始，未完待续……如果您在化妆品分析工作有任何分析方法开发或验证上的难题，请随时和我们联系，我们必将尽最大的努力给您提供帮助。 ■本资料所记录数据只是分析例，不是产品性能的保证。 HIEIDO 资生堂(中国)投资有限公司 先端科学事业推进部 http：//hplc.shiseidochina.com ●北京 地址：北京市朝阳区东三环中路63号富力中心写字楼10层邮编：100022 ( 电话：010-58451908 传 真：01 0 -59220401 ) ●广州 ( 地址：广州市东风东路765-769号东宝大厦8楼 邮编：510600 ) ( 地址：上海市浦东新区浦东南路999号新梅联合广场26F ) ( 邮编：200120 ) ( 电话：021-38612828 Ext.6600 传真：021-58761769 ) ( ●技术服务中心 ) ( 地址：北京经济技术开发区景园北街2号BDA国际企业大道31号 ) 邮编：100176