化妆品中苯基苯并咪唑磺酸等15种防晒剂检测方案(液相色谱柱)

July 27， 2017LC Application Lab，Shiseido ChinaNo.31，BDA International Business Park，2 Jing Yuan Street， BeijingEconomic Technological Development Zone，Beijing， China 100176Phone 010-5845-1809， FAX 010-6785-6882 2015版《化妆品安全技术规范》苯基苯并咪唑磺酸等15种防晒剂的分析 本次实验按照2015版《化妆品安全技术规范》中防晒剂检验方法的第一法(高效液相色谱-二极管阵列检测器法)，对15种防晒剂进行同时分析。15种防晒剂标准品按照《化妆品安全技术规范》配制成混合标准溶液，分别使用CAPCELL PAK C18 MG S5； 4.6 mm × 250 mm， CAPCELL PAK C18 MGII S5； 4.6 mm ×250 mm， CAPCELL PAK ADME S5； 4.6mm × 250 mm， CAPCELL PAK C18 AQ S5； 4.6 mm × 250 mm以及SUPE R1 0DS S5； 4.6 mm × 250 mm色谱柱，对混合标准溶液进行分析，通过对比结果， MG和MGII色谱柱得到相对较好的结果，如图1和图2所示，但两款色谱柱原流动相条件下，个别峰未实现基线分离。 Minutes 图1防晒剂标准品分析图(MG) 图2防晒剂标准品分析图(MGII) 1：苯基苯并咪唑磺酸； 2：：二苯酮-4和二苯酮-5； 3：对氨基苯甲酸； 4：二苯酮-3； 5：对甲氧基肉桂酸异戊酯 6：4-甲基苄亚基樟脑； 7：PABA乙基己酯； 8：丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷； 9：奥克立林； 10：甲氧基肉桂酸乙基己酯； 12'：峰12的同分异构体； 11：水杨酸乙基己酯； 12：胡莫柳酯； ( 13：乙基己基三嗪酮； 14： ：1 亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚； 15：双-乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪 ) (按出峰顺序) HPLC Conditions ： 色谱柱：CAPCELL PAK C18 MG S5；4.6 mm i.d.×250 mm CAPCELL PAK C18 MGII S5； 4.6 mmi.d.×250 mm 流动相： A：甲醇 B：四氢呋喃C：水+高高酸(300+0.2) 时间(min) A(%) B(%) C(%) 0.00 25 45 30 13.00 25 45 30 14.00 45 50 5 20.00 45 50 5 22.00 25 45 30 流1.0 mL/min温 检样 35°C PDA311 nm 混合标准溶液 进样量： 10 pL 注 峰上标数字为分离度 为得到更好的分离效果，使用较新的MGII色谱柱，在原流动相条件基础上，对梯度进行调整，结果如图3所示。各峰分离度得到明显改善，但峰11和峰12分离度为1.43，仍未达到基线分离。 图3防晒剂标准品分析图(MGII更改梯度条件) 1：苯基苯并咪唑磺酸； 2：二苯酮-4和二苯酮-5； 3：对氨基苯甲酸； 6：4-甲基苄亚基樟脑； 7： PABA乙基己酯；1；8： 10：甲氧基肉桂酸乙基己酯； 12’：峰12的同分异构体； ( 13：乙基己基三嗪酮； 14： ：1 亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚； 15：双-乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪 ) (按出峰顺序) HPLC Conditions ： 色谱柱：： CAPCELL PAK C18 MGII S5； 4.6 mm i.d. ×250 mm 时间(min) A(%) B(%) C(%) 0.0 40 3.0 40 3.1 30 20.0 30 20.1 5 26.0 5 26.1 40 流1.0 mL/min温检 样 35°C PDA 311 nm 混合标准溶液 进样量： 10pL 注 峰上标数字为分离度 因峰11和峰12未达到基线分离，继续调整梯度条件，分析结果如4所示。在此条件下，各峰实现基线分离，得到良好分析结果。 Minutes 图4防晒剂标准品分析图(MGII 更改梯度条件) 5：对甲氧基肉桂酸异戊酯 6：4-甲基苄亚基樟脑；7： PABA乙基己酯；8：丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷；9：奥克克林； 10：甲氧基肉桂酸乙基己酯；12'：峰12的同分异构体；11：水杨酸乙基己酯；12：胡莫柳酯； 13：乙基己基三嗪酮；114：亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚；； 115：双-乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪(按出峰顺序) HPLC Conditions ： 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MGII S5； 4.6 mm i.d.×250mm 流动相： B：四氢呋喃 C：水+高氯酸(300+0.2) 时间(min) A(%) B(%) C(%) 0.0 25 35 40 1.0 25 35 40 1.1 25 40 35 20.0 25 45 30 20.1 45 50 5 26.0 45 50 5 26.1 25 35 40 流速1.0 mL/min温度检测样品 35°C PDA 311 nm 混合标准溶液 进样量： 10pL 注 峰上标数字为分离度 接下来将色谱柱更换为 MG 色谱柱，在调整后的梯度条件下进行分析，结果如图5所示。该色谱柱同样可得到良好的分析结果。 Minutes 图5防晒剂标准品分析图(MG更改梯度条件) 1：苯基苯并咪唑磺酸；2：二苯酮-4和二苯酮-5；3：对氨基苯甲酸；4：二苯酮-3；5：对甲氧基肉桂酸异戊酯 6：4-甲基苄亚基樟脑；7： PABA乙基己酯；8：丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷；9：奥克立林； 10：甲氧基肉桂酸乙基己酯；12'：峰12的同分异构体；11：水杨酸乙基己酯；12：胡莫柳酯； 13：乙基己基三嗪酮；14：亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚；15：双-乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪(按出峰顺序) HPLC Conditions ： 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5； 4.6 mm i.d. ×250 mm 流动相：：A：甲醇B：四氢呋喃 C：水+高氯酸(300+0.2) 时间(min) A(%) B(%) C(%) 0.0 25 35 40 1.0 25 35 40 1.1 25 40 35 20.0 25 45 30 20.1 45 50 5 26.0 45 50 5 26.1 25 35 40 1.0 mL/mir 35°C 流温 检PDA 311 nm样混合标准溶液进样量： 10 pL 注 峰上标数字为分离度 综上所述，使用资生堂 CAPCELL PAK C18 MGII S5； 4.6 mm × 250 mm 和 CAPCELL PAK C18 MG S5； 4.6mm 250 mm色谱柱，通过调整梯度条件，可得到15种防晒剂的良好分析结果。 2015版《化妆品安全技术规范》苯基苯并咪唑磺酸等15种防晒剂的分析 本次实验按照2015版《化妆品安全技术规范》中防晒剂检验方法的第一法（高效液相色谱-二极管阵列检测器法），对15种防晒剂进行同时分析。15种防晒剂标准品按照《化妆品安全技术规范》配制成混合标准溶液，分别使用CAPCELL PAK C18 MG S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm, CAPCELL PAK C18 MGII S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm, CAPCELL PAK ADME S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm, CAPCELL PAK C18 AQ S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm以及SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm色谱柱,对混合标准溶液进行分析，通过对比结果，MG和MGII色谱柱得到相对较好的结果，如图1和图2所示，但两款色谱柱原流动相条件下，个别峰未实现基线分离。1：苯基苯并咪唑磺酸； 2：二苯酮-4和二苯酮-5； 3：对氨基苯甲酸； 4：二苯酮-3； 5：对甲氧基肉桂酸异戊酯6：4-甲基苄亚基樟脑； 7：PABA乙基己酯； 8：丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷； 9：奥克立林；10：甲氧基肉桂酸乙基己酯； 12’：峰12的同分异构体； 11：水杨酸乙基己酯； 12：胡莫柳酯；13：乙基己基三嗪酮； 14：亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚； 15：双-乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪（按出峰顺序）为得到更好的分离效果，使用较新的MGII色谱柱，在原流动相条件基础上，对梯度进行调整，结果如图3所示。各峰分离度得到明显改善，但峰11和峰12分离度为1.43，仍未达到基线分离。1：苯基苯并咪唑磺酸； 2：二苯酮-4和二苯酮-5； 3：对氨基苯甲酸； 4：二苯酮-3； 5：对甲氧基肉桂酸异戊酯6：4-甲基苄亚基樟脑； 7：PABA乙基己酯； 8：丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷； 9：奥克立林；10：甲氧基肉桂酸乙基己酯； 12’：峰12的同分异构体； 11：水杨酸乙基己酯； 12：胡莫柳酯；13：乙基己基三嗪酮； 14：亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚； 15：双-乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪（按出峰顺序）因峰11和峰12未达到基线分离，继续调整梯度条件，分析结果如4所示。在此条件下，各峰实现基线分离，得到良好分析结果。接下来将色谱柱更换为MG色谱柱，在调整后的梯度条件下进行分析，结果如图5所示。该色谱柱同样可得到良好的分析结果。综上所述，使用资生堂CAPCELL PAK C18 MGII S5; 4.6 mm × 250 mm和CAPCELL PAK C18 MG S5; 4.6 mm × 250 mm色谱柱，通过调整梯度条件，可得到15种防晒剂的良好分析结果。