西黄丸中猪去氧胆酸检测方案(蒸发光检测器)

高效液相色谱-蒸发光检测器测猪去氧胆酸 猪去氧胆酸为从猪胆汁中提取的一种胆烷烷。能抑制胆酸的形成及溶解脂肪，降低血中胆固醇和甘油三酯，适用于Ia或Ib型高血脂症、动脉粥样硬化症。对百日咳杆菌、白喉杆菌、金黄色葡萄球菌等有一定的抑菌作用，可用作消炎药，治疗慢性支气管炎、小儿病毒性上呼吸道炎症等。在 HPLC-UV 检测法中，由于胆酸仅有末端吸收，因此只能在近紫外处测定，但其受流动相组成、流速变化、柱温等因素的影响，导致测定困难。本文采用天津兰博实验仪器设备有限公司的HPLC-ELSD 对猪去氧胆酸进行了测定，并检测了某药厂西黄丸供试品中的猪去氧胆酸，结果表明该方法简便、快捷，重现性好。 1测试条件： 1.1仪器 天津兰博高效液相色谱仪配蒸发光光检测器(ELSD) 天津兰博 AS1000 自动进样器 AXM-8 Temp.柱温箱 1.2色谱条件： 色谱柱： Kromasil(4.6mm × 250 mm， 5 um) 流动相：乙腈-0.5%甲酸溶液(40：60) 柱温：：40℃： 流速：1.2ml/min： 进样量：10ul； ELSD 蒸发管温度为35℃，漂移管温度100℃，载气为高纯氮气，流量为25PSI。对照品溶液的制备：取猪去氧胆酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.2 mg的溶液，既得。 2测试结果： 2.1色谱图 图1为猪去氧胆酸对照品色谱图，图2为西黄丸供试品色谱图。比较两张色谱图可看出西黄丸供试品中不含有猪去氧胆酸，，说明供试品合格。 图1猪去氧胆酸对照品色谱图 图2供试品色谱图 2.2线性关系考察 测定时将储备液用甲醇稀释至浓度为 0.2 mg/ml、0.1mg/ml， 0.05 mg/ml、0.01mg/ml， 配制标准系列浓度为 10ul/ml， 50ug/ml、100ug/ml、200 ug/ml. 结果表明在 0.01 mg/ml 到 0.2 mg /ml 浓度范围内，以进样浓度为横坐标，出峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得到线性回归方程Y=0.10×18.97X， r=0.9998，线性关系良好。最低检出限以3倍信噪比(S/N)所对应的进样质量求得，得到 最低检出限为20 ng. 2.3重现性考察 精密吸取浓度为 0.05 mg/ml 标准品溶液10 uL， 进高效液相色谱仪测定，重复进样5次，记录峰面积，!，计算峰面积标准偏差，得 RSD=1.0%。 3结论 采用高效液相色谱蒸发光检测器测定猪去氧胆酸，可以有效避免紫外检测法的缺陷，提高检测结果的准确性。本方法方便、准确、精密度高，重现性好，可以满足日常分析需要。