化学药中特殊物质和基团检测方案

石墨炉原子吸收法测定盐酸伐昔洛韦中钯的残留量 陈超，俞辉(浙江省食品药品检验所，杭州310004) 摘要：目的 建立盐酸伐昔洛韦中钯残留量的测定方法。方法 采用微波消解系统消解样品，石墨炉原子吸收分光光度法测定盐酸伐昔洛韦中钯的残留量。结果 钯在浓度1.0~30.0 ugL-内呈良好线性关系(r=0.999 5)。检出限为 0.20 pgL，定量限为0.95 ugL-， 特征浓度(灵敏度)为 0.57 ugL-，-平均回收率为101.69%。结论 采用本法测定盐酸伐昔洛韦中钯的残留量灵敏、准确、可靠，为药品质量控制提供依据。 关键词：石墨炉原子吸收分光光度法；钯；盐酸伐昔洛韦 中图分类号：R917.102；R927.12 文献标志码：B 文章编号：1007-7693(2011)03-0260-03 Palladium Residues Determination in Valaciclovir Hydrochloride by Graphite Furnace Atomic AbsorptionSpectrometry CHEN Chao， YU Hui(Zhejiang Insititute for Food and Drug Control， Hangzhou 310004， China) ABSTRACT：OBJECTIVETo establish a method for the determination of Pd in valaciclovir hydrochloride. METHODSAppling microwave degrading system to deteriorate sample， use a graphite furnace atomic absorption spectrometry (AAS)method to determine Pd residues in valaciclovir hydrochloride. RESULTSIt showed a good linear relationship within theconcentration range of 1.0-30.0 ug*L-'(r=0.999 5). The LOD and LOQ were 0.20 ug.L-and 0.95 ugL，respectively. Thecharacteristic concentration (sensitivity) was 0.57 ugL and the average recovery was 101.69%. CONCLUSIONThis methodis sensitive， accurate and reliable to control the residues of Pd in valaciclovir hydrochloride， providing the basis for drug qualitycontrol. KEY WORDS： graphite furnace atomic absorption spectrometry； palladium； valaciclovir hydrochloride EMEA/CHMP 颁布了金属催化剂或金属试剂残留量限度规定的指导文件件，于2008年9月1日正式实施。在原辅料合成中可能用到金属催化剂或金属试剂，这些金属可能在原料药中残留，它们可能以最初形式存在，也可能由于后续化学过程以其他形式存在。原辅料中残留的金属会进一步带入到制剂中。这些残留的金属通常不具有治疗作用，基于安全性和质控的需要进行严格控 ( 作者简介：陈超，男，工程师 Tel： (0571)86456586 E -mail： chenchao@zjyj.org.cn ) 制。钯属于指导文件中第1类金属A亚组(第1类金属具有显著安全性担忧，共10种金属，具有已知的或怀疑的人体致癌性，或者具有其他显著的毒性；A亚组包括2种金属：： Pt、Pd)， 如残留量过高，会对心脏、肝肾造成损害，并产生溶血2。口服药物残留限度为 10 mgL-，静脉注射药物残留限度为 1mgL 。 盐酸伐昔洛韦原料药在生产过程中常用用/碳 作为催化剂。微量钯的测定主要采用石墨炉原子吸收光谱仪(GFAAS)B、电感耦合等离子体-质谱仪(ICP-MS)4、全反射X射线荧光仪(TXRF)[4、中子活化分析仪(INAA)IS1和离子交换树脂比色法等。GFAAS 具有较低的运行成本、操作简单、进样量小和对基质要求相对较低的优点。本试验应用石墨炉原子吸收法测定盐酸伐昔洛韦原料药中残留的钯，灵敏度高，干扰少，方法简便快速。 1仪器与试剂 AAS novAA 400 型原子吸收光谱仪(配石墨炉原子化器和 MPE50 型50位自动进样系统，德国Jena 公司)； Multiwave 3000型微波消解样品制备系统(配16孔高温聚四氟乙烯消解罐，奥地利Anton paar 公司)； NANOpure Dlamond型超纯水仪(美国 Barnstead 公司)； EH20B型控温电热板(美国 LabTech 公司)；空心阴极灯(钯灯，北京曙光明电子光源仪器有限公司)；99.999%高纯度氩气(上海豪杰特种气体有限公司)；单元素钯溶液[1.000gL，GBW(E)080611， 国家标准物质研究中心]；硝酸、盐酸(BV-II级，北京化学试剂研究所)；实验用水为高纯水(电阻率为18.0MQ.cm)。 2方法和结果 2.1样品制备方法 取供试品约0.3 g， 精密称定，置聚四氟乙烯罐中，加入8 mL HNO3，置微波消解仪(升压速率：0.05 MPas，最大功率：1400W)中以表1设定的程序进行消化，至溶液澄清。消解完全后置电热板上加热至近干，用2%HCl洗入10 mL量瓶中。同时制备空白试剂。微波消解程序见表1. 表1微波消解程序 Tab1Process of microwave digestion 步骤 温度/℃ 升温速率/℃·min 保持时间/min风扇/档 1 80 10 5 1 2 160 20 5 3 220 20 10 4 35 / 5 2.2 测定条件 石墨炉原子吸收光谱仪工作参数见表2；石墨炉程序见表3。 2.3 工作曲线的绘制 将1.000 g.L-钯标准液用2% HCl溶液稀释成30.0 ugL-的标准溶液。由自动进样系统自动稀释 表2 测定钯的工作参数 Tab 2 Operating parameters for determination of palladium 参数 指标 参数 指标 测定波长 247.6 nm 石墨管加热方式 横向加热 通带 0.2 nm 氩气压力 0.60 MPa 最大灯电流 20.0mA 测定方式 标准曲线法 工作灯电流 8.0mA 积分方式 峰高 氘灯灯电流 26.1mA 负高压 339.0V 进样体积 20.0 pL 测定次数 3次 表3 测定钯的石墨炉程序 Tab 3Furnace’s procedure for determination of palladium 工作步骤 温度/℃ 升温速率/℃·s 保持时间/s 干燥(一) 90 10 5 干燥(二) 105 7 30 干燥(三) 120 15 10 灰化 1000 300 10 原子化 2300 1500 6 干烧净化 2 600 1000 4 成1.0，6.0，12.0，18.0，24.0，30.0pgL的系列浓度标准溶液，以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标绘制工作曲线。回归方程A=kj+k2C，ki=0.002 309， kz=0.007 786， r=0.999 5， 检出限为0.20ugL一、定量限为 0.95 ugL'(n=11， RSD=15.23%)、特征浓度为 0.57 ugL 。 2.4仪器精密度试验 精密吸取 20 uL 钯标准溶液(30 ug.L-I)，注入石墨炉原子化器中测定吸光度，重复进样11次，RSD 为 0.39%。 2.5 重复性试验 称取批号为080901的样品5份，按“2.1”项下方法处理，进样测定， RSD 为 1.87%。 2.6稳定性试验 取同一份供试品溶液，室温放置0，1，2，3，4，5d，分别测定吸光度。吸光度 RSD 为 2.48%。结果表明样品溶液放置5d内稳定性良好。 2.7 回收率试验 取又知残留量为 0.38 mgkg ， 批号为080901的样品3组，分别称取0.05， 0.15，0.15 g， 每组各3份，精密称定，置聚四氟乙烯罐中，精密加入Pd 标准溶液(100 ugL-)， 加入 8 mLHNO， 于微波消解仪中消化，消解完全后置电热板上加热至近干后，用2% HCl 洗入10 mL 量瓶中。精密吸取 20 uL 注入石墨炉原子化器中，测量吸收度。按上述标准曲线计算回收率，，平均回收率为101.69%，RSD 为 4.31%(n=9)，结果见表4。 表4 回收率测定结果(n=9) Tab 4 The results of recovery test(n=9) 已知量/ng ：加入量/ng 测得量/ng 回收率/%平均回收率/%RSD/% 18.24 10.0 29.18 109.4 19.87 10.0 29.34 94.6 19.08 10.0 29.64 105.6 57.08 50.0 107.57 101.0 56.92 50.0 106.11 98.4 101.7 4.31 57.15 50.0 109.31 104.3 57.68 200.0 254.69 98.5 57.15 200.0 260.00 101.4 56.73 200.0 260.59 101.9 2.8 样品分析 取2家生产企业共5批供试品测定，结果见表5. 表5供试品含量测定结果(n=2) Tab 5 Determination results of the test sample(n=2) 批号 080620 080901 080902 Z090401 080301 残留量/mgkg -1 0.38 0.38 0.39 0.06 0.06 3 讨论 盐酸伐昔洛韦不经消解直接用2% HCl稀释后测定，测得浓度明显降低，计算残留量为0.22mgkg ， 仅为实际留留量的57.9%。主要是因为钯/碳催化剂不能被稀盐酸溶解。如直接测定，每次原子化过程中都有少量碳在管内堆积，造成下次原子化温度不一致，且取样量极少，难免带来误差，造成重复性差。 石墨炉程序中对灰化阶段参数进行优化，结果表明，灰化温度在800~1000℃时吸光度均较稳定，且回收率较高，在超过1200℃时，吸光度有较明显的降低，故将灰化温度选择在1000℃，保证被测组分没有明显损失的前提下使干扰尽可能排除。对原子化阶段参数进行优化，结果表明，原子化温度超过2300℃后，吸光度达到最大信号，由于过高的原子化温度反而会降低灵敏度，并会缩短石墨管寿命，故原子化温度选为2300℃。 REFERENCES ( [1] Guideline o n t h e sp e cification li m its fo r re s idues of me ta l catalysts or m etal 1 reagents . 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