奶粉中三聚氰胺的测定

 1. 实验部分1.1实验仪器及耗材仪器配置：岛津高效液相色谱仪LC-20AD； 色谱柱：Shim-pack Scepter C18-120（250×4.6 mm，5 μm ，P/N：227-31020-06)；固相萃取小柱：SHIMSEN Styra MCX 60 mg/3 mL (P/N：380-00853-01) SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）； LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）； SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）； SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）； SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06） 1.2 分析条件 色谱柱：Shim-pack Scepter C18-120（250×4.6 mm，5 μm ，P/N：227-31020-06)；流 速：1.0 mL/min 进样量：20 μL 柱 温：40 ℃ 检测波长：240 nm 流动相： A：离子对试剂缓冲液（准确称取2.10 g柠檬酸和2.16 g辛烷磺酸钠，加水约980 mL溶解，用氢氧化钠调节pH至3.0，加水定容至1L。） B：乙腈 A：B=91：9 1.3 样品前处理1.3.1 样品准备精密称取样品2 g于50 mL离心管中，加15 mL 1%三氯乙酸溶液和5 mL乙腈，涡旋1 min，超声10 min，8000 r/min离心2 min，取出上清液于量瓶中，用1%三氯乙酸定容至25 mL，移取5 mL提取液，加5 mL水，混匀，待净化。流程图见图1。1.3.2 样品净化 SHIMSEN Styra MCX 60 mg/3 mL 3 mL甲醇、3 mL水活化，弃去流出液；待净化液上样，弃去流出液；3 mL水、3 mL甲醇清洗，弃去流出液；5 mL 5%氨水甲醇洗脱，收集流出液；将收集的洗脱液于50℃氮吹至干，加流动相（A：B=91：9）1 mL，涡旋混匀，过0.22 μm PTFE微孔滤膜，供HPLC分析。流程图见下图2。 2. 结果及讨论2.1 色谱图2.2 奶粉中三聚氰胺的HPLC检测添加回收结果将奶粉空白样品进行2.5 mg/kg浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，具体结果如下：2.5 mg/kg加标浓度的平均回收率为89.06%，RSD为2.48%。实验结果 添加水平（0.1 mg/kg） 回收率（%） 91.05 89.44 86.69 平均回收率（%） 89.06 RSD (%) 2.48 3. 结论本应用建立了奶粉中三聚氰胺的测定方法。采用岛津SHIMSEN Styra MCX产品对样品进行净化，Shim-pack Scepter C18-120色谱柱进行分离，岛津HPLC检测分析。对空白样品进行2.5 mg/kg浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，结果显示：2.5 mg/kg加标浓度的平均回收率为2.5 mg/kg加标浓度的平均回收率为89.06%，RSD为2.48%。该方法操作简单、回收率高、重现性好，适用于奶粉中三聚氰胺的测定。