食品（奶粉）中三聚氰胺检测方案(固相萃取仪)

POL.YTECI普立泰科 8610-82735800 传真：8610-82735809 网址： www.pltk.com.cn “冷饭”来了——J2正压固相萃取仪在检测食品中三聚氰胺的应用 三聚氰胺风波虽早已过去，但大家对于这种物质真的了解么。现在的乳品中还会有三聚氰胺这种物质么。 食品工业中常常需要检查蛋白质含量，但是直接测定蛋白质含量技术上比较复杂，成本较高，不适合大范围推广，所以业界常常使用一种叫做“凯氏定氮法”的方法，通过食品中的氮原子的含量来间接推算蛋白质的含量。也就是说，食品中氮原子含量越高，这蛋白质含量就越高。这样一来，名不见经传的三聚氰胺由于其分子中含氮原子较多，就会派上大用场。 简言概括，三聚氰胺能让蛋白质成分增加。也就是说在牛奶中加入水，再加入三聚氰胺，这样就能通过蛋白质成分的检查，让生产商赚的更多。 三聚氰胺是一种重要的氮杂环有机化工原料，水溶液显弱碱性，能溶于甲醇、乙酸等，微溶于水和乙醇，不溶于乙醚、苯等，而且在传统Ci8柱上保留很差。利用此特性，人们普遍采用离子对试剂液相色谱法和液质联用方法进行检测。但由于食品基质复杂，使得样品的前处理甚为关键。我们采用三氯乙酸提取，MCX 固相萃取小柱净化，辅以J2正压固相萃取仪操作，建立一套快速、准确、重现性良好的样品外理方法。 1.材料与方法 1.1主要仪器与试剂： Agilent HP1100高效液相色谱仪、配四元梯度泵、在线真空脱气机、自动进样器、柱温箱、二极管阵阵检测器、J2SCIENTIFIC 正压固相萃取仪(图一)、超声波清洗器、离心机、固相萃地址：北京市海淀区温泉镇高里掌路中关村翠湖科技园15号楼1单元1层邮编：100095电话： 8610-82735800 传真：8610-82735809 网址： www.pltk.com.cn 取小柱： OASIS MCX， 6mL， 500mg。三聚氰胺标准品，纯度99%。 图1： J2 SCIENTIFIC 正压固相萃取仪 仪器简介： J2 SCIENTIFIC公司最新推出了一个简单有效的正压装置，具有其高效，简便的特点。它可通过该装置中气流调节阀来控制小柱流速的大小，并可直接吹干小柱，性。 J2 SCIENTIFIC仪器特点： 1增强的正压技术，可以对每个柱管提供相同的压力三 2每个通道配置固定流量组件，确保每个柱管流速的一致性，保证实验结果的平行性和重复性 348孔柱的容量分别为 1ml，3ml，6ml， 10ml 或 15ml。在不同规格的小柱间切换，只需简单的更换架板。 4空气供应： N2或 75psi 压缩空气；使用10mm 的过滤器； 5双重压力调整器，允许用户对萃取和小柱干燥设置不同的压力 6废液收集器，收集器可以在每个步骤之前自动清空 7单一开关可以控制样品架的上升和下降，同时具有极好的密封性。 应用领域： 食品分析：农残药残兽兽非法添加物有机污染物各种毒素样品的净化； 药物分析：药物研发临床诊断中草药样品成分的分离； 司法鉴定：药物毒物筛选残留物提取净化。 1.2样品处理 1.2.1提取 地址：北京市海淀区温泉镇高里掌路中关村翠湖科技湖15号楼1单元1层邮编：100095电话：8610-82735800 传真：8610-82735809 网址： www.pltk.com.cn 准确称取经粉碎混匀后样品5.0g， 加入50mL 1%三氯乙酸溶液及2 mL 2%乙酸铅溶液，混匀后超声提取30min，高速离心后取上清液待净化。 1.2.2净化 将 MCX 固相萃取小柱(6mL， 500mg) 置于J2正压固相萃取仪样品架上，分别加入5mL甲醇、5mL水活化，再准确移取 5.0mL 离心液上柱。活化及上样时，将样品架升至顶部通过调节面板旋钮来调节N2气流大小，控制流速不超过1mL/min。然后再用5mL 水、5mL甲醇洗涤 SPE 柱，弃去洗脱液，将小柱升至顶部调节气阀旋钮自动加压吹干小柱，用5%氨氨甲醇溶液5mL 洗脱，收集洗脱液用氮吹仪吹干，用甲醇-水(2：8，V/V)定容至1.0mL，过 0.45um滤膜，上机测定。 1.3液相色谱测定：略 2.结果与讨论 2.1样品提取与净化 图2：奶粉样品直接提取测定的色谱图 图3：奶粉样品提取并经固相萃取柱净化的色谱图 地址：北京市海淀区温泉镇高里掌路中关村翠湖科技园15号楼1单元1层邮编：100095电话： 2.2 J2正压固相萃取仪的应用 J2正压固相萃取仪具有高效、简便的特点。它可通过该装置中的气流调节阀来控制小柱流速的大小，并可直接吹干小柱，保证每个小柱在活化洗脱过程中具有良好的重现性。并且可配套不同规格的固相萃取小柱(如1mL， 3mL， 6mL， 10mL，15mL等)使用，一次操作可同时处理多个样品。我们在奶粉中添加(2.0~50.0)ug/mL 等不同浓度的三聚氰胺，进行加标回收和重现性实验，回收率在95~99%之间。相对标准偏差均小于3%。 3.结论： J2正压固相萃取仪的加压操作是通过在固相萃取小柱的上方施加一定压力空气或Nz来实现。这样可加快过滤速度，控制柱子活化、淋洗、洗脱全过程的流速，使溶液易于进入固定相孔隙，有利于样液与固定相更紧密接触，从而提高萃取效果。1它克服常规的手动固相萃取操作费时、不能确保稳定的流速、不同人员操作结果偏差较大的问题，通过简单的控制消除人为操作的误差，保证在短时间内同时处理几十个样品并具有良好的重现性。 POIYTECH 普立泰科科 ( 地址：北京市海淀区温泉镇高里掌路中关村翠湖科技湖15号楼1单元1层邮编：100095电话： 8610-82735800 传真：8610-82735809 网址： w w w.pltk.com.cn ) J2正压固相萃取仪的加压操作是通过在固相萃取小柱的上方施加一定压力空气或N2来实现。这样可加快过滤速度，控制柱子活化、淋洗、洗脱全过程的流速，使溶液易于进入固定相孔隙，有利于样液与固定相更紧密接触，从而提高萃取效果。它克服常规的手动固相萃取操作费时、不能确保稳定的流速、不同人员操作结果偏差较大的问题，通过简单的控制消除人为操作的误差，保证在短时间内同时处理几十个样品并具有良好的重现性。