油脂类样品中抗氧剂检测方案(凝胶净化系统)

PCIYTECH普立泰科 凝胶净化色谱-气相色谱法分析检测油脂类样品中抗氧剂 滕本昌北京普立泰科仪器有限公司 关键词 前言 J2全自动样品前处理平台食用油 Preface 转基因你真的了解吗?你是不是还在看着标签买油?现在，转基 气相色谱 因标签不是你想贴就能贴的啦。日前，国家对此有了新规定，尤 叔丁基羟基茴香醚(BHA) 其是食用油生产企业，不能再随心所欲了。7月4日，国家市场 监督管理总局、农业农村部、国家卫生健康委员会联合发布《关 2，6-二叔丁基对苯酚(BHT) 叔丁基对苯二酚(TBHQ) 于加强食用植物油标识管理的公告》(简称公告)。公告称，对我国未批准进口用作加工原料且未批准在国内商业化种植，市场上并不存在该种转基因作物及其加工品的，食用植物油标签、说明书不得标注“非转基因”字样。其实，对于食用油及油制品，除了转基因，不知道大家有没有关注过另外一项标签-抗氧剂?食用油脂和含有油脂的食品在不适当的保存条件下或者超过一定的保质期就会发生酸败现象，而为了避免这种酸败现象或者延缓其发生的时间，通常会加入BHA(叔丁基对羟基茴香醚)、 BHT(2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚)或者TBHQ(特丁基对苯二酚)等 抗氧化剂和防腐剂。其实在美国FDA公布危害健康的10类添加 剂中已明确表明： BHA有潜在的致癌性， BHT的危险相对较小， 不过在动物实验也发现它的致癌性，因此研究食品中BHA、BHT 和TBHQ的添加量是非常必要的。 食用油脂和含有油脂的食品在不适当的保存条件下或者超过一定的保质期就会发生酸败现象，而为了避免这种酸败现象或者延缓其发生的时间，通常会加入BHA(叔丁基对羟基茴香醚)、BHT(2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚)或者TBHQ(特丁基对苯二酚)等抗氧化剂和防腐剂。其实在美国FDA公布危害健康的10类添加剂中已明确表明：：EBHA有潜在的致癌性， BHT的危险相对较小，不过在动物实验也发现它的致癌性，因此研究食品中BHA、BHT和TBHQ的添加量是非常必要的。 目前， BHA、BHT和TBHQ常用的分析方法主要有薄层色谱法、紫外分光光度法、气相色谱法、高效液相色谱法等。采用气相色谱法分析油脂样品，前处理方法一般有两种：：一种是利用层析柱的方式得到目标物，另一种就是利用凝胶净化色谱来除去大分子的脂肪。根据以往实验室的经验，采用第一种方法试剂消耗量较大，污染环境，人员危害大，步骤繁琐，损失高，达不到较好的实验结果，而且二氯甲烷洗脱液中不可避免的含有未除去的脂肪，对色谱柱寿命影响很大；而本次介绍的这种方法，就是利用全自动凝胶净化系统，对油脂中的BHA、BHT和TBHQ进行高效准确的收集，根据油脂和抗氧剂在254nm紫外检测器中出峰情况进行分段丢弃收集，最后采用HP-5毛细管柱-气相色谱-氢火焰离子化检 实验仪器 安捷伦6890气相色谱仪 Preplinc Platform GPC凝胶净化色谱+在线浓缩全自动前处理平台(美国J2Scientific公司) 实验试剂 色谱纯乙酸乙酯(赛默飞世尔科技(中国有限公司))色谱纯环己烷(国药集团化学试剂有限公司) 实验参数设置 色谱纯乙酸乙酯(赛默飞世尔科技(中国有限公司))色谱纯环己烷(国药集团化学试剂有限公司) GPC部分 GPC色谱柱 快速高效柱可视玻璃柱(300*20mm) 流动相 乙酸乙酯：环己烷=1：1 流速 5.0ml/min 进样量 5ml 丢弃时间 0-7.3min 收集时间 7.3-12.0min 清洗时间 5min 浓缩部分 加热/真空度 (44，240)(46，220)(48，200) 定容模式 Sensor level 终点条件 (44.240)(46，220) 定容体积 2ml 混合次数 1 定容溶剂 乙酸乙酯：环己烷=1：1 凝胶色谱及在线浓缩参数 色谱柱 HP-5，30.0×320umx0.25um 进样口温度 220℃ 进样方式 不分流进样 进样量 1pL 升温程序 100℃(0min)，100℃-180℃(10℃/min，6min) 检测器类型 FID 检测器温度 250 ■ 气相色谱参数 样品加标过GPC，仪器自带的紫外检测器得到的谱图如下图1，由图我们可以看出，样品基质里的油脂和目标物分离得较好，只要掌握好丢弃和收集的时间，可以将目标物非常好的收集起来。为尽量准确的保证除杂效果，将目标物进行分段收集，确定最终的收集时间为7.3-12min。 净化效果讨论 图1基质加标GPC图 基质加标的样品，经过J2的全自动凝胶净化浓缩之后，直接上样得到的FID谱图如下图2，由图可看出：经过净化之后的基线非常平稳，没有杂质的干扰，目标物的出峰尖锐且对称，易于检测器准确识别及定量。基质加标回收率范围在70-90%之间，满足国家要求，各组分回收率的数据如下表1： 图2净化后的FID谱图 物质 加标浓度(ppm) 回收率(%) BHA 200 >85 BHT 200 >80 TBHQ 200 >70 表1各目标物回收率范围 相关仪器 凝胶净化色谱-气相色谱法分析检测油脂类样品中抗氧剂 凝胶净化色谱-气相色谱法分析检测油脂类样品中抗氧剂 食用油脂和含有油脂的食品在不适当的保存条件下或者超过一定的保质期就会发生酸败现象，而为了避免这种酸败现象或者延缓其发生的时间，通常会加入BHA(叔丁基对羟基茴香醚)、BHT(2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚)或者TBHQ(特丁基对苯二酚)等抗氧化剂和防腐剂。其实在美国FDA公布危害健康的10类添加剂中已明确表明：BHA有潜在的致癌性，BHT的危险相对较小，不过在动物实验也发现它的致癌性，因此研究食品中BHA、BHT和TBHQ的添加量是非常必要的。目前，BHA、BHT和TBHQ常用的分析方法主要有薄层色谱法、紫外分光光度法、气相色谱法、高效液相色谱法等。采用气相色谱法分析油脂样品，前处理方法一般有两种：一种是利用层析柱的方式得到目标物，另一种就是利用凝胶净化色谱来除去大分子的脂肪。根据以往实验室的经验，采用第一种方法试剂消耗量较大，污染环境，人员危害大，步骤繁琐，损失高，达不到较好的实验结果，而且二氯甲烷洗脱液中不可避免的含有未除去的脂肪，对色谱柱寿命影响很大；而本次介绍的这种方法，就是利用全自动凝胶净化系统，对油脂中的BHA、BHT和TBHQ进行高效准确的收集，根据油脂和抗氧剂在254nm紫外检测器中出峰情况进行分段丢弃收集，最后采用HP-5毛细管柱-气相色谱-氢火焰离子化检测器进行定量分析。经过净化之后的基线非常平稳，没有杂质的干扰，目标物的出峰尖锐且对称，易于检测器准确识别及定量。最终基质加标回收率范围在70-90%之间，满足国家要求。