食品中N-二甲基亚硝胺的测定

 1. 实验部分 1.1 实验仪器及耗材 仪器配置：岛津GCMS-TQ8050NX气相色谱-质谱联用仪+ PTV-2030程序升温进样口； 纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器） 色谱柱：SH-Wax（30×0.25 mm，0.5 μm；P/N：R221-75894-30)； SHIMSEN QuEChERS提取盐包：4g MgSO4, 1g NaCl for NDMA in Food, 50/P（P/N：380-00147-03）； SHIMSEN QuEChERS PLS-A净化管：150mg PLS-A for NDMA in Food, 15mL, 50/P（P/N：380-00147-04）； SHIMSEN QuEChERS 除水管：1.6g MgSO4, 0.4g NaCl for NDMA in Food, 15mL, 50/P（P/N：380-00147-07）； N-亚硝胺类标准品套装, 1000ppm（包括：N-二甲基亚硝胺标准溶液1 mL，1支；N-二甲基亚硝胺-D6内标标准溶液1 mL，1支；P/N：380-03900-55）； SHIMSEN Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341）； GC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34002-01）； SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）； SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）； 1.2 分析条件 SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。 GC条件 毛细管柱：SH-Wax（30×0.25 mm，0.5 μm；P/N：R221-75894-30) 程序升温：初始温度40℃保持0.5 min，以15℃/min升温到190℃，再以25℃/min升温到240℃，保持5 min PTV进样口温度：初始温度50℃保持0.5 min，以400℃/min升温到220℃，保持5 min PTV放空时间：0.16 min 载气：He 载气控制方式：恒流模式，1 mL/min 进样量：5 μL 进样方式：不分流进样 质谱条件 电离模式：电子轰击电离（EI） 离子源温度：250 ℃ 接口温度：250 ℃ 检测器电压：调谐电压+0.6 Kv 数据采集模式：MRM 各化合物MRM参数如下： 序号 化合物名称 特征离子对1 碰撞电压1 特征离子对2 碰撞电压2 1 NDMA 74.00>44.00 7 74.00>42.10 18 2 NMDA-D6 80.00>50.10 8 80.00>46.10 18 1.3 样品前处理 提取 准确称取5 g样品（腊鱼、腊肉；精确至0.01 g），加入5 mL水，手动摇匀；或准确称取10 g样品（牛肉、鲤鱼；精确至0.01 g）；加入N-二甲基亚硝胺内标溶液（1 μg/mL）50 μL，向其准确加入10 mL乙腈，手动振摇2 min，置于-20℃冰箱冷冻20 min，加入陶瓷均质子1粒（P/N：380-00171）及SHIMSEN QuEChERS提取盐包（4g MgSO4, 1g NaCl for NDMA in Food, 50/P；P/N：380-00147-03）；手动振摇2 min；置于10℃冷冻离心机中，9000 r/min冷冻离心5 min；上清液待净化。 净化 向SHIMSEN QuEChERS PLS-A净化管（150mg PLS-A for NDMA in Food, 15mL, 50/P；P/N：380-00147-04）中加入5 mL水，手动振摇后，立即加入上述上清提取液5 mL，手动振摇1 min；10℃冷冻离心机中，9000 r/min冷冻离心5 min。 除水 取上述上清净化液加入至SHIMSEN QuEChERS 除水管（1.6g MgSO4, 0.4g NaCl for NDMA in Food, 15mL, 50/P；P/N：380-00147-07）中；手动振摇2 min；10℃冷冻离心机中，9000 r/min冷冻离心5 min；取上清液过0.22 μm微孔滤膜，供GC-MS/MS分析。 样品前处理流程图见下图1。 2. 实验结果 2.1 标准品溶液的MRM色谱图 2.2 腊鱼、腊肉、牛肉和鲤鱼中N-二甲基亚硝胺的GC-MS/MS 检测添加回收结果 对空白样品加标后（添加浓度：腊鱼和腊肉为1.0 μg/kg；牛肉和鲤鱼为0.5 μg/kg），按照上述前处理方法处理后上机，平行3 份样品考察回收率和RSD，结果显示，腊肉、腊鱼、牛肉和鲤鱼的加标回收率分别为腊肉98.41%、70.55%、106.39%和97.85%；RSD 分别为4.03%、2.72%、12.04%和8.58%， 回收率高，重现性好。 No. 样品名称 添加水平 (μg/kg) 回收率(%) 平均回收率 (%) RSD (%) 1 2 3 1 腊肉 1.0 100.30 101.07 93.86 98.41 4.03 2 腊鱼 1.0 70.94 72.24 68.46 70.55 2.72 3 牛肉 0.5 101.73 96.56 120.88 106.39 12.04 4 鲤鱼 0.5 99.52 105.29 88.75 97.85 8.58 3. 结论本文建立了腊肉、腊鱼、牛肉、鲤鱼中N-二甲基亚硝胺的GCMS 测定方法。参照国标GB 5009.26- 2023，采用岛津SHIMSEN QuEChERS 产品对腊肉、腊鱼、牛肉、鲤鱼样品进行净化，SH-Wax 色谱柱进行分离，岛津串联质谱GCMS-TQ8050 NX 结合PTV 程序升温进样技术进行检测分析。对空白样品加标后（添加浓度：腊鱼和腊肉为1.0 μg/kg；牛肉和鲤鱼为0.5 μg/kg），按照上述前处理方法处理后上机，平行3 份样品考察回收率和RSD，结果显示，腊肉、腊鱼、牛肉和鲤鱼的加标回收率分别为腊肉98.41%、70.55%、106.39%和97.85%；RSD 分别为4.03%、2.72%、12.04%和8.58%，回收率高， 重现性好。该方法可为腊肉、腊鱼、牛肉、鲤鱼等食品中N-二甲基亚硝胺的测定提供参考。