三元杂交(杜×长×大)育肥猪背最长肌中蛋白质和肌内脂肪(IMF)含量的检测

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检测样品: 畜禽肉及副产品
检测项目: 营养成分
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发布时间: 2023-09-17
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参考标准: GB 5009.6 食品中脂肪的测定
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限饲条件下不同饲养时长对育肥猪胴体品质 肉品质和血清生化指标的影响

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限饲条件下不同饲养时长对育肥猪胴体品质 肉品质和血清生化指标的影响动物营养学报2023,35(5):2847⁃2858Chinese Journal of Animal Nutritiondoi:10.12418/CJAN2023.267 动 物 营 养 学 报284835卷 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪胴体品质 、肉品质和血清生化指标的影响 陈思思 1,2 韩萌萌 1,2 龚赛明 1,3 殷运菊 1,3 罗 杰 4 舒剑成 4 邓 敦 4 杨飞来 4 李凤娜 1,2 郭秋平 1∗ (1.中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态过程重点实验室 ,动物营养生理与代谢过程湖南省重点实验室 ,长沙 410125;2.中国科学院大学现代农业科学学院 ,北京 100049;3.湖南农业大学动物科学 技术学院 ,长沙 410128;4.唐人神集团股份有限公司 ,株洲 412007) 摘 要 :本试验旨在研究限饲条件下不同饲养时长对育肥猪胴体品质 、肉品质和血清生化指标 的影响 。选取体况良好 、体重 [(10.11±0.10) kg ]接近的三元杂交断奶仔猪 30只 ,随机分为 3组 (每组 10个重复 ,每个重复 1只 ):A 组 (饲养 5个月 )、B 组 (饲养 6个月 )、C 组 (饲养 7个 月 )。 B 组和 C 组采食量分别控制为 A 组的 85%和 80%,3组于不同时间开始 ,待 3组试验猪平 均体重达到 120 kg 后 ,同时屠宰 。结果表明 :与 A 组相比 ,1)B 组和 C 组的平均日增重和平均 日采食量显著降低 (P <0.05),胴体直长显著提高 (P <0.05);B 组的背膘厚度显著降低 (P <0.05);B 组和 C 组的宰后 45 min 的背最长肌红度 ( a ∗)值显著提高 (P <0.05),亮度 (L ∗)值显 著降低 (P <0.05);2)B 组的血清尿素氮含量显著降低 (P <0.05),C 组的血清总蛋白 、白蛋白 、葡 萄糖 、总胆固醇 、低密度脂蛋白胆固醇和游离脂肪酸含量显著降低 (P <0.05),B 组和 C 组的血 清高密度脂蛋白胆固醇含量显著提高 (P <0.05);3)B 组的背最长肌甜味氨基酸丝氨酸 、甘氨酸 和精氨酸味道强度值显著提高 (P <0.05),B 组和 C 组的背最长肌苦味氨基酸苯丙氨酸味道强 度值显著降低 (P <0.05)。 4)B 组的背最长肌中 C18∶3n3和 C20∶2比例显著提高 (P <0.05),C 组的背最长肌 C18∶3n3、C20∶2、C22∶6n3和总 n⁃3多不饱和脂肪酸的比例显著提高 (P <0.05);5)B 组和 C 组的背最长肌葡萄糖含量和猪己糖激酶活性显著提高 (P <0.05),C 组的背最长肌糖酵 解潜力和糖原含量显著降低 (P <0.05),B 组和 C 组的背最长肌肌球蛋白重链 Ⅰ mRNA 相对表 达水平显著提高 (P <0.05)。综上所述 ,限饲条件下延长饲养时长至 7个月可改善育肥猪背最长 肌脂肪酸组成和肌纤维类型组成 ,提高肉品质 ,但降低了生长性能 ,在一定程度上增加了造肉 成本 。 关键词 :限饲 ;肉品质 ;肌纤维类型 ;育肥猪 中图分类号 :S828 文献标识码 :A 文章编号 :1006⁃267X (2023)05⁃2847⁃12 限饲是指人为限制动物采食量或某一营养素 摄入 ,以求达到相应饲养目标的一种饲养管理技 术 。该技术已经被广泛应用于养殖业中 ,常用于 改善机体代谢状态 、提高产品品质和免疫力等方 面 [1]。常见的限饲方法有 :采食量限饲 、营养水平 限饲和采食时间限饲 。不同水平限饲可调控营养 物质沉积 ,改善生长发育 、肉品质 、胴体品质及脂 质代谢 [2]。限饲期间 ,猪的代谢和营养利用发生 收稿日期 :2022-11-11 基金项目 :湖南省重点研发计划项目 (2022NK2026) 作者简介 :陈思思 (2000—),女 ,湖南浏阳人 ,硕士研究生 ,从事分子营养与肉品质调控研究 。 E⁃mail : 13574350026@163.com ∗通信作者 :郭秋平 ,助理研究员 ,E⁃mail : guoqiuping@isa.ac.cn 变化 ,生长速度和饲料效率降低 [3-4]。此外 ,限饲 还可以降低猪血清胆固醇含量 [5]。总之 ,在经过 一段时间的正常生长所需营养被限制后 ,动物在 日增重 、采食量 、蛋白质和脂肪沉积等方面表现出 特殊的生理变化 ,从而导致胴体品质 、肌肉中呈味 物质以及营养物质发生改变 ,最终改变肉品质 [6]。过去研究多采用于同一时间开始限饲并同时屠宰 的方式 ,育肥猪出栏体重有着较大差异 ,对猪肉品 质有一定影响 。因此 ,本试验通过限饲以延长饲 喂时间 ,并控制出栏体重 ,研究限饲条件下不同饲 养时长对育肥猪胴体品质 、肉品质和血清生化指 标的影响 ,确定相同出栏体重条件下的适宜饲养 时长 ,以期为养猪生产提供参考 。 1 材料与方法 1.1 试验设计 选取体况良好 、体重 [(10.11±0.10) kg ]接近 的三元杂交 (杜 ×长 ×大 )断奶仔猪 ,采用单因子试 验设计 ,将试验猪随机分成 3组 :A 组 (对照组 ,饲 养 5个月 )、B 组 (饲养 6个月 )、C 组 (饲养 7个 月 ),每组 10个重复 ,每个重复 1头猪 。 B 组和 C 组采食量分别控制为对照组的 85%和 80%,各组 均充足饮水 ,按正常免疫程序进行免疫接种 。 3组 试验于不同时间开始 ,待 3组猪平均体重达到 120 kg 后 ,同时屠宰 。试验采用玉米 -豆粕型基础 饲粮 ,参考 NRC (2012)营养水平配制 ,其组成及 营养水平见表 1。 表 1 基础饲粮组成及营养水平 (风干基础 ) Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets ( air⁃dry basis ) % 项目 阶段 Stages Items 10~30 kg 31~60 kg 61~90 kg 91~120 kg 原料Ingredients 玉米 Corn 36.40 40.20 39.70 40.00 小麦 Wheat 28.20 33.70 39.10 豆粕 Soybean meal 15.60 17.60 12.60 6.90 小麦麸 Wheat bran 5.00 6.00 6.00 6.00 生物饲料 Biological feed 4.00 4.00 4.00 4.00 发酵豆粕 Fermented soybean meal 4.00 速爆大豆 Puffed soybeans 4.00 碎米 Broken rice 25.20 豆油 Soybean oil 1.80 预混料 Premix1) 4.00 4.00 4.00 4.00 合计 Total 100.00 100.00 100.00 100.00 营养水平 Nutrient levels2) 消化能 DE/(MJ/kg) 14.19 13.69 13.48 13.31 粗蛋白质 CP 17.12 15.84 13.94 12.05 赖氨酸 Lys 1.28 1.10 0.90 0.82 蛋氨酸 Met 0.37 0.33 0.27 0.26 苏氨酸 Thr 0.84 0.74 0.61 0.56 色氨酸 Try 0.21 0.18 0.15 0.14 缬氨酸 Val 0.73 0.60 0.54 0.44 钙 Ca 0.52 0.70 0.66 0.57 有效磷 AP 0.48 0.40 0.34 0.26 1)预混料为每千克饲粮提供 The premix provided the following per kg of diets :10~30 kg 阶段 10 to 30 kg stage ,VA 10 000 IU ,VD3 5 000 IU ,VE 50 IU ,VK3 4 mg ,VB1 6 mg ,VB2 12 mg ,VB6 6 mg ,VB12 0.05 mg ,生物素 biotin 0.2 mg ,叶酸 folic acid 2 mg ,烟酸 niacin 50 mg ,泛酸 pantothenic acid 25 mg ,胆碱 choline 500 mg ,Cu (CuSO4·5H2O ) 20 mg ,Fe (Fe⁃SO4) 100 mg ,Mn (MnSO4·H2O ) 40 mg ,Zn (ZnSO4) 50 mg ,I (KI ) 0.5 mg ,Se (Na2SeO3) 0.3 mg ;31~120 kg 阶段 31 to 120 kg stage ,VA 6 000 IU ,VD33 000 IU ,VE40 IU ,VK33 mg ,VB11.8 mg ,VB26 mg ,VB66 mg ,VB120.024 mg ,生物素 bio⁃tin 4.5 mg ,叶酸 folic acid 0.3 mg ,烟酸 niacin 24 mg ,泛酸 pantothenic acid 20 mg ,胆碱 choline 500 mg ,Cu (CuSO4·5H2O )15 mg ,Fe (FeSO4) 100 mg ,Mn (MnSO4·H2O ) 100 mg ,Zn (ZnSO4)50 mg ,I (KI ) 0.5 mg ,Se (Na2SeO3) 0.3 mg 。 2)消化能为计算值 ,其余为实测值 。 DE was a calculated value , while the others were measured values. 1.2 样品采集与处理 试验结束时 ,全部猪只运往当地屠宰场进行 屠宰和样品采集 。颈静脉采血后 ,血液样品静置 0.5 h 后离心分离血清 ,于 -20 ℃保存 ;取右半边胴 体的背最长肌用于现场检测肉品质的感官指标和 后续肌肉化学组成的分析 ,另取背最长肌样品于 液氮速冻后于 -80 ℃保存 ,用于分子生物学检测 。 1.3 指标测定与方法 1.3.1 生长性能 试验开始和结束时称量体重 ,记录耗料量 ,统 计并计算各组的平均日增重 (ADG )、平均日采食 量 (ADFI )和料重比 。 1.3.2 胴体品质 将 30头试验猪屠宰后 ,对左侧胴体称重 ,计 算胴体重和屠宰率 ,按照 NY/T 825—2004《瘦肉 型猪胴体性状测定技术规范 》[7]测定左半胴体的 胴体直长 、眼肌面积以及背膘厚度 。 1.3.3 感官指标 按照 NY/T 821—2019《猪肉品质测定技术规 程 》[8]检测试验猪屠宰后 45 min 和 24 h 背最长肌 的 pH 、肉色 、滴水损失和系水力 ;其中 ,pH 采用手 持 pH 计 (Matthaus pH star ,德国 )测定 ,屠宰后 45 min 和 24 h 肉样的亮度 (L ∗)、红度 ( a ∗)及黄 度 (b ∗)值采用色差计 (CR-410,Konica Minolta Sensing Inc.,日本 )测定 ,系水力采用压肉仪 (Bula⁃der-M10,北京布拉德科技发展有限公司 )测定 。剪切力按照 NY/T 1180—2006《肉嫩度的测定剪 切力法 》[9]采用质构仪 (TMS⁃pro ,FTC ,英国 )测定 。 1.3.4 肌肉化学组成 肌肉样品的干物质 (DM )、肌内脂肪 ( IMF )、粗蛋白质 (CP )和肌苷酸 ( IMP )含量分别参照 《食 品安全国家标准食品中水分的测定 》 (GB 5009.3—2016)、《食品安全国家标准食品中脂肪 的测定 》(GB 5009.6—2016)、《食品安全国家标 准食品中蛋白质的测定 》(GB 5009.5—2016)和 《肌肉中肌苷肌苷酸的测定高效液相色谱法 》(T/NAIA 003—2020)进行测定 。 1.3.5 血清生化指标 用全自动生化分析仪 (Cobas C311,Basel ,瑞 士 )和试剂盒 (利德曼生物技术有限公司 )测定血 清总蛋白 ( total protein ,TP )、白蛋白 ( albumin ,ALB )、尿素氮 (urea nitrogen ,UN )、葡萄糖 (glu⁃ cose ,GLU )、甘油三酯 ( triglyceride ,TG )、总胆固 醇 ( totalcholesterol ,TC )、低密度脂蛋白胆固醇 ( low density lipoprotein cholesterol ,LDL⁃C )、高密 度脂蛋白胆固醇 (high density lipoprotein cholester⁃ol ,HDL⁃C )和游离脂肪酸 ( freefatty acid ,FFA )含 量 。血清极低密度脂蛋白胆固醇 (very low density lipoprotein cholesterol ,VLDL⁃C )含量采用长沙奥 基生物科技有限公司生产的酶联免疫吸附测定 (ELISA )试剂盒检测 ,具体操作步骤参照试剂盒 说明书 。 1.3.6 背最长肌游离氨基酸味道强度值 、中长链 脂肪酸含量及糖酵解潜力 背最长肌中的游离氨基酸含量采用氨基酸自 动分析仪法 ,中长链脂肪酸含量采用气相色谱法 ,糖酵解潜力采用 pH⁃XtraTM 糖酵解试剂盒 ,分别采 用 L-8800型全自动氨基酸分析仪 (L-8800,Hita⁃chi ,日本 )、气相色谱仪 (安捷伦 7890A ,Agilent TechnologiesInc.,美国 )及超高效液相色谱仪 (Waters ACQUITY H⁃class ,Waters ,美国 )测定 。参照文献 [10]确定氨基酸的呈味阈值和味道强度 值的计算方法 ,味道强度值计算公式如下 : 1.3.7 肌纤维类型相关的关键基因表达水平 总 RNA 提取和实时荧光定量 PCR (RT⁃PCR ):采用 TRIzol ( Invitrogen ,美国 )提取背最长 肌中的总 RNA 并测定其浓度和纯度 ,吸光度 (OD )260/280在 1.8~2.2为合格样品 ,将所有样 品 RNA 浓度调整到 1 000 ng/μ L 再用 Evo M⁃MLV 反转录试剂盒 (湖南生物工程有限公司 )反 转录成 cDNA 。使用 SYBR Green Premix Pro Taq HS qPCR 试剂盒 (湖南生物工程有限公司 )进行 PCR 检测 。 PCR 体系由 5 μ L SYBR Green Pro Taq HS Premix 、2 μ L cDNA 、2.2 μ L 无 RNA 酶的水和 0.4 μ L 引物对组成 ,总体积为 10 μ L 。荧光定量 PCR 仪程序包括 95 ℃ 30 s 1个循环 ,95 ℃ 5 s 40个循环 ,60 ℃ 30 s 。检测 4种不同肌纤维类型 (慢 速氧化型 -Ⅰ型 、快速氧化型 -Ⅱa 型 、中间型 -Ⅱx 型 、快速酵解型 -Ⅱb 型 )的 4种肌球蛋白重链 (MyHC )亚型 (Ⅰ、Ⅱa 、Ⅱx 和 Ⅱb )在背最长肌中 的 mRNA 相对表达水平 。以甘油醛 -3-磷酸脱氢 酶 (glyceraldehyde⁃ 3⁃phosphate dehydrogenase ,GAPDH )为内参基因 ,按照 2-ΔΔ Ct 法计算各目的基 表 2 RT⁃PCR 引物序列 Table 2 Primer sequences for RT⁃PCR 基因 登录号 引物核酸序列 长度 Genes Accession No. Primer sequences (5′—3′) Length/bp 肌球蛋白重链Ⅰ AK147031 F:GGCCCCTTCCAGCTTGA 63 MyHC Ⅰ R:TGGCTGCGCCTTGGTTT 肌球蛋白重链Ⅱa AY963799 F:TTAAAAAGCTCCAAGAACTGTTTCA 100 MyHC Ⅱa R:CCATTTCCTGGTCGGAACTC 肌球蛋白重链Ⅱx AY963800 F:AGCTTCAAGTTCTGCCCCACT 76 MyHC Ⅱx R:GGCTGCGGGTTATTGATGG 肌球蛋白重链Ⅱb BC037757 F:CACTTTAAGTAGTTGTCTGCCTTGAG 80 MyHC Ⅱb R:GGCAGCAGGGCACTAGATGT 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 F:CAAAGTGGACATTGTCGCCATCA XM 021091114.1 123 GAPDH R:AGCTTCCCATTCTCAGCCTTGACT 1.4 数据处理与统计方法 试验数据采用 SPSS 26.0软件中的 ANOVA 过程进行单因素方差分析 ,试验数据用平均值和 均值标准误 (SEM )表示 ,P <0.05表示差异显著 。 2 结 果 2.1 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪生长 性能的影响 在本试验中 ,B 组和 C 组进行不同程度限饲 并延长饲养时长以达到同时出栏的目的 ,其中 A 组饲养时长为 150 d ,B 组饲养时长为 180 d ,C 组 饲养时长为 210 d 。由表 3可知 ,与 A 组相比 ,B 组和 C 组的平均日增重和平均日采食量显著降低 (P <0.05),C 组的料重比显著提高 (P <0.05)。 2.2 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪胴体 品质的影响 由表 4可知 ,与 A 组相比 ,B 组的胴体直长显 著提高 (P <0.05),背膘厚度显著降低 (P <0.05);C 组的胴体直长 、背膘厚度显著提高 (P <0.05),眼肌 面积显著降低 (P <0.05);B 组和 C 组的屠宰率显 著降低 (P <0.05)。 表 3 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪生长性能的影响 Table 3 Effects of different feeding time under restricted feeding conditions on growth performance of finishing pigs 项目 A组 B组 C组 SEM P值 Items Group A Group B Group C P⁃value 始重IBW/kg 10.04 10.18 10.10 0.09 0.84 末重 FBW/kg 120.90 119.00 117.95 1.08 0.55 平均日增重 ADG/kg 0.74a 0.60b 0.52c 0.02 <0.01 平均日采食量 ADFI/kg 1.96a 1.70b 1.55c 0.06 <0.01 料重比 F/G 2.65b 2.82ab 2.98a 0.05 0.01 同行数据肩标不同小写字母表示差异显著 (P <0.05),相同或无字母表示差异不显著 (P >0.05)。下表同 。 In the same row , values with different small letter superscripts mean significant difference (P <0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P >0.05) . The same as below. 2.3 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪背最长肌 肉品质和肌肉营养成分的影响 由表 5可知 ,与 A 组相比 ,屠宰后 45 min ,B 组的背最长肌 pH 显著降低 (P <0.05);B 组和 C 组的背最长肌 a ∗值显著提高 (P <0.05),背最长肌 L ∗值显著降低 (P <0.05)。与 A 组相比 ,屠宰后 24 h ,C 组的背最长肌 a ∗、b ∗值显著提高 (P <0.05)。与 A 组相比 ,B 组的背最长肌滴水损失和 蒸煮损失显著提高 (P <0.05)。 表 4 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪胴体品质的影响 Table 4 Effects of different feeding time under restricted feeding conditions on carcass quality of finishing pigs 项目 Items A组 Group A B组 Group B C组 Group C SEM P值 P⁃value 胴体重 Carcass weight/kg 99.46 95.39 93.71 1.64 0.06 屠宰率 Slaughter rate / % 82.25a 80.15b 79.43c 0.25 <0.01 胴体直长 Carcass straight length/ cm 89.20b 93.88a 95.34a 0.70 <0.01 背膘厚度 Backfat thickness / cm 2.77b 2.13c 3.23a 0.14 <0.01 眼肌面积 Loin⁃eye area / cm2 46.67a 44.00ab 40.68b 1.35 0.02 表 5 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪背最长肌肉品质的影响 Table 5 Effects of different feeding time under restricted feeding conditions on longissimus dorsi meat quality of finishing pigs meat quality of finishing pigs 项目 A组 Group A B组 Group B C组 Group C SEM P值 P⁃value Items pH 5.89a 5.66b 5.95a 0.06 <0.01 亮度 L∗ 47.64a 46.64b 45.38c 0.31 <0.01 45 min 红度a∗ 15.38c 16.20b 16.78a 0.18 <0.01 黄度 b∗ 3.44b 4.07a 4.04a 0.17 0.02 黄度 /红度 b∗ / a∗ 0.22 0.24 0.25 0.01 0.21 pH 5.37 5.30 5.31 0.02 0.06 亮度 L∗ 52.48 51.98 51.48 0.40 0.25 24 h 红度a∗ 14.92b 14.75b 15.86a 0.19 <0.01 黄度 b∗ 5.93b 6.10b 6.72a 0.19 0.03 黄度 /红度 b∗ / a∗ 0.40 0.41 0.43 0.01 0.27 滴水损失 Drip loss / % 2.35b 3.31a 2.69b 0.18 0.01 蒸煮损失 Cooking loss / % 41.37b 46.36a 42.70b 0.52 <0.01 失水率 Water loss rate / % 15.38 14.90 15.76 0.39 0.34 剪切力 Shear stress / N 50.05 57.05 51.91 2.92 0.25 大理石纹评分 Marbling score 1.73ab 1.28b 2.18a 0.12 <0.01 由表 6可知 ,与 A 组相比 ,B 组的背最长肌肌 苷酸含量显著提高 (P <0.05)。 表 6 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪背最长肌营养成分的影响 (鲜样基础 ) Table 6 Effects of different feeding time under restricted feeding conditions on longissimus dorsi nutritional composition of finishing pigs ( fresh sample basis ) 项目 A组 Group A B组 Group B C组 Group C SEM P值 P⁃value Items 干物质 DM/% 23.83 23.66 23.44 0.09 0.24 肌内脂肪IMF/% 2.26 1.95 1.81 0.21 0.68 粗蛋白质 CP/% 20.79 19.79 18.97 0.35 0.10 肌苷酸IMP/(mg/g) 2.04b 2.59a 2.10b 0.09 <0.01 2.4 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪血清生化 指标的影响 由表 7可知 ,与 A 组相比 ,B 组的血清 UN 含 量显著降低 (P <0.05),血清 HDL⁃C 含量显著提高 (P <0.05);C 组的血清 TP 、ALB 、GLU 、TC 、LDL⁃C 和 FFA 含量显著降低 (P <0.05),血清 HDL⁃C 含 量显著提高 (P <0.05)。 Table 7 Effects of different feeding time under restricted feeding conditions on serum biochemical indices of finishing pigs 项目 A组 B组 C组 SEM 0.98 P值 Items Group A Group B Group C P⁃value 总蛋白 TP/(g/L) 72.33a 70.54a 67.05b <0.01 白蛋白 ALB/(g/L) 54.79a 54.64a 49.03b 0.74 <0.01 尿素氮 UN/(mmol/L) 3.73a 3.21b 4.19a 0.16 <0.01 葡萄糖 GLU/(mmol/L) 9.65a 8.26a 5.67b 0.53 <0.01 甘油三酯 TG/(mmol/L) 0.45 0.47 0.55 0.03 0.20 总胆固醇 TC/(mmol/L) 3.09a 3.20a 2.81b 0.08 <0.01 低密度脂蛋白胆固醇 LDL⁃C/(mmol/L) 2.33a 2.28a 1.77b 0.09 <0.01 高密度脂蛋白胆固醇 HDL⁃C/(mmol/L) 1.17b 1.33a 1.34a 0.03 <0.01 游离脂肪酸 FFA/(mmol/L) 0.09a 0.07a 0.02b 0.01 <0.01 2.5 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪背最长肌 游离氨基酸味道强度值的影响 由表 8可知 ,与 A 组相比 ,B 组的背最长肌甜 味氨基酸丝氨酸 、甘氨酸和精氨酸味道强度值显 著提高 (P <0.05),C 组的背最长肌甜味氨基酸丝 氨酸味道强度值显著提高 (P <0.05);B 组的背最 长肌苦味氨基酸苯丙氨酸和组氨酸味道强度值 显著降低 (P <0.05),C 组的背最长肌苦味氨基酸 苯丙氨酸和亮氨酸味道强度值显著降低 (P <0.05)。 Table 8 Effects of different feeding time under restricted feeding conditions on taste activity value of free amino acids in longissimus dorsi of finishing pigs 项目 A组 B组 C组 SEM P值 Items Group A Group B Group C P⁃value 鲜味氨基酸 Flavor amino acids 天冬氨酸 Asp 0.004 0.004 0.003 0.001 0.14 谷氨酸 Glu 0.192 0.201 0.140 0.018 0.06 甜味氨基酸 Sweet amino acids 苏氨酸 Thr 0.057a 0.056a 0.036b 0.002 <0.01 丝氨酸 Ser 0.027b 0.035a 0.032a 0.002 0.01 甘氨酸 Gly 0.152b 0.241a 0.186b 0.013 <0.01 丙氨酸 Ala 0.817a 0.762a 0.679b 0.027 0.01 精氨酸 Arg 0.381b 0.445a 0.346b 0.016 <0.01 苦味氨基酸 Bitter amino acids 缬氨酸 Val 0.225 0.228 0.214 0.016 0.83 蛋氨酸 Met 0.105 0.092 0.084 0.007 0.13 异亮氨酸Ile 0.057 0.066 0.054 0.004 0.15 亮氨酸 Leu 0.072a 0.079a 0.053b 0.003 <0.01 苯丙氨酸 Phe 0.092a 0.082b 0.069c 0.002 <0.01 组氨酸 His 0.223a 0.184b 0.239a 0.012 0.01 C18∶3n3和 C20∶2比例显著提高 (P <0.05),C 组 的背最长肌 C18∶3n3、C20∶2、C22∶6n3和总 n⁃3多 不饱和脂肪酸比例显著提高 (P <0.05)。 由表 10可知 ,与 A 组相比 ,B 组的背最长肌 表 10 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪背最长肌中长链脂肪酸组成的影响 Table 10 Effects of different feeding time under restricted feeding conditions on composition of medium⁃long chain fatty acids in longissimus dorsi of finishing pigs 项目 Items A组 Group A B组 Group B C组 Group C SEM P值 P⁃value C10∶0/% 0.13 0.10 0.09 0.01 0.17 C12∶0/% 0.09 0.08 0.08 0.01 0.54 C14∶0/% 1.19 1.23 1.29 0.04 0.50 C16∶0/% 25.41 25.24 24.57 0.20 0.21 C16∶1/% 2.76 2.79 2.74 0.06 0.96 C17∶0/% 0.17 0.19 0.18 0.01 0.18 C18∶0/% 14.11 14.46 14.39 0.19 0.73 C18∶1n9t / % 0.14 0.13 0.11 0.01 0.05 C18∶1n9c / % 40.18 38.96 36.85 0.58 0.06 C18∶2n6c / % 11.33 11.63 13.52 0.46 0.10 C20∶0/% 0.19 0.19 0.20 0.01 0.74 C18∶3n6/% 0.04 0.03 0.06 0.01 0.49 C20∶1/% 0.56 0.70 0.67 0.03 0.17 C18∶3n3/% 0.47b 0.55a 0.59a 0.02 <0.01 C20∶2/% 0.37b 0.43a 0.46a 0.01 0.01 C20∶3n6/% 0.25 0.26 0.33 0.02 0.18 C20∶3n3/% 0.03 0.03 0.06 0.01 0.43 C20∶4n6/% 2.43 2.86 3.48 0.26 0.26 C24∶0/% 0.11 0.10 0.19 0.02 0.27 C22∶6n3/% 0.05b 0.05b 0.12a 0.01 0.04 饱和脂肪酸 SFA/% 41.39 41.59 40.99 0.35 0.80 不饱和脂肪酸 UFA/% 58.61 58.41 59.01 0.35 0.80 单不饱和脂肪酸 MUFA/% 43.65 42.58 40.37 0.62 0.09 多不饱和脂肪酸 PUFA/% 56.35 57.42 59.63 0.62 0.09 总多不饱和脂肪酸∶总饱和脂肪酸 ∑PUFA ∶∑SFA 1.36 1.38 1.46 0.02 0.12 总n⁃3多不饱和脂肪酸 ∑n⁃3 PUFA/% 0.55b 0.62b 0.77a 0.03 <0.01 总n⁃6多不饱和脂肪酸 ∑n⁃6 PUFA/% 14.04 14.78 17.39 0.72 0.14 总n⁃6多不饱和脂肪酸∶总n⁃3 多不饱和脂肪酸 ∑n⁃6 PUFA ∶∑n⁃3 PUFA 26.09 23.86 22.92 1.10 0.50 2.7 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪背最长肌 糖酵解潜力的影响 由表 11可知 ,与 A 组相比 ,B 组的背最长肌 葡萄糖 、乳酸含量和猪己糖激酶活性显著提高 (P <0.05);C 组的背最长肌中葡萄糖含量和猪己糖激 酶活性显著提高 (P <0.05),糖酵解潜力和糖原含 量显著降低 (P <0.05)。 表 11 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪背最长肌糖酵解潜力的影响 Table 11 Effects of different feeding time under restricted feeding conditions on glycolysis potential of longissimus dorsi muscle of finishing pigs 项目 A组 B组 C组 SEM P值 Items Group A Group B Group C P⁃value 葡萄糖 Glucose /(μmol/g) 34.82b 37.60a 40.45a 1.26 0.02 乳酸 Lactic acid/(μmol/g) 18.55b 25.11a 16.86b 0.73 <0.01 糖原 Glycogen/(μmol/g) 156.01a 167.51a 118.34b 5.58 <0.01 肌球蛋白腺苷三磷酸酶 1.25 1.53 1.36 0.08 0.10 mATPase /( IU /g) 猪己糖激酶 Porcine hexokinase /( IU /g) 2.88b 3.22a 3.24a 0.09 0.02 猪磷酸肌酸 2.26 2.49 2.35 0.15 0.55 Porcine creatine phosphate /(ng/g) 糖酵解潜力 396.51a 435.13a 343.96b 13.84 <0.01 Glycolytic potential /(μmol/g) 2.8 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪背 最长肌的肌纤维类型关键基因 mRNA 相对表达 水平的影响 由图 1可知 ,与 A 组相比 ,B 组和 C 组的背最 长肌 MyHC Ⅰ mRNA 相对表达水平显著提高 (P <0.05),C 组的背最长肌 MyHC Ⅱa 和 MyHC Ⅱ x mRNA 相对表达水平显著降低 (P <0.05)。 数据柱标相同小写字母表示差异不显著 (P >0.05),不 同小写字母表示差异显著 (P <0.05)。 Value columns with the same small letter mean no signif⁃icant difference (P >0.05), while with different smallletters mean significant difference (P <0.05) . 图 1 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪 背最长肌的肌纤维类型关键基因 mRNA 相对表达水平的影响 Fig.1 Effects of different feeding time under restricted feeding conditions on mRNA relative expression levels of key genes of muscle fiber types in longissimus dorsi of finishing pigs 3 讨 论 3.1 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪生长 性能 、胴体品质和肉品质的影响 肥育期限饲对生长性能有一定的影响 ,但可 显著提高胴体瘦肉量 ,如限制采食 -自由采食组与 自由采食 -自由采食组相比 ,虽然限制采食 -自由 采食组肥育期末的猪胴体重低 ,但 2组间胴体瘦 肉量无差异 ,说明前期限饲可提高胴体瘦肉率 [11]。目前生产中猪场普遍采用肥育期限饲以提高猪胴 体瘦肉率和饲料转化率 。赵燕等 [12]的试验也表 明 ,限饲可提高生长肥育猪的瘦肉率 ,同时也降低 了背膘厚度及胴体脂肪含量 。这与本研究通过限 饲延长 1个月的饲养期试验结果一致 。但过度限 饲使得猪前期肌肉生长受到限制 ,而对后期的脂 肪沉积影响较小 ,最终导致瘦肉率下降 。在本试 验中 ,限饲并延长饲养时长降低了育肥猪平均日 增重 ,增加了料重比 ,生长性能下降 ,出栏时间延 长 。但是限饲使肉色加深 ,改善了肌肉感观特 性 [13]。任善茂等 [14]报道 ,限饲能通过改变肌肉的 颜色改善肌肉的感官特性 。本试验中 ,与对照组 相比 ,限饲并延长饲时长 2个月的猪背最长肌 a ∗值显著提高 ,L ∗值显著降低 。 3.2 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪血清 氮代谢指标 、背最长肌游离氨基酸组成的影响 猪肉中的单核苷酸与游离氨基酸是猪肉中最 主要的滋味呈味物质 ,其可作为前体物质与还原 糖发生美拉德反应 ,提高肉的鲜味和甜味等风 味 [15]。本试验发现 ,限饲可提高肌肉中肌苷酸含 量和大理石纹评分 ,增加了猪肉的鲜味 。猪机体 蛋白质沉积是肌肉组织生长的基本要素 。 Heyer 等 [16]研究表明 ,限饲会促进猪皮下脂肪沉积 ,减少 蛋白质沉积 。限饲条件下 ,蛋白质合成速度下降 ,氮排泄也相应减少 。 Sun 等 [17]研究发现 ,UN 为蛋 白质分解的产物 ,限饲使血清 UN 含量显著降低 ,代谢废物减少 ,降低肾脏高滤过 ,保护肾功能 。蛋 白质代谢主要受氨基酸浓度的调节 ,组织中游离 氨基酸及其代谢产物可以用于机体的功能或作为 信号分子参与到信号转导过程 。限饲刺激肌肉组 织蛋白质代谢 ,可能机制是循环系统中可利用的 氨基酸浓度发生了变化 [18-20]。限饲条件下 ,机体 会动员肌肉中的蛋白质分解为氨基酸作为糖异生 的原料 。 Ribeiro 等 [21]研究表明 ,限饲降低脱羧和 转氨的分解代谢速率 ,从而不利于支链氨基酸亮 氨酸的合成 ,降低了肉中的苦味 ,这一过程受哺乳 动物雷帕霉素靶蛋白复合物 1(mTORC1)信号通 路的调节 ,mTORC1启动 mRNA 翻译 ,促进肌肉 组织生长 ,并抑制蛋白质降解 [22]。 Li 等 [23]研究发 现 ,限饲可使甜味氨基酸丝氨酸含量提高 ,猪肉的 营养与风味增加 ,与本试验结果一致 。 3.3 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪血清脂质 代谢指标 、背最长肌中长链脂肪酸组成的影响 动物体脂的沉积量是脂肪摄取 、脂肪酸从头 合成 、体脂的合成与降解过程动态平衡的结果 ,其 体脂的沉积能力受脂肪的合成 、分解和脂肪的转 运 3个方面共同调控 [24]。高密度脂蛋白可以从细 胞膜上摄取胆固醇 ,经卵磷脂胆固醇酰基转移酶 催化而成胆固醇酯 ,再将携带的胆固醇酯转移到 极低密度脂蛋白和低密度脂蛋白上 [25]。限饲可提 高高密度脂蛋白含量 ,减少白色脂肪组织含量 ,增 加能量消耗 ,促进脂肪源性细胞因子脂酮的产 生 [26]。在本研究中 ,B 组血清 HDL⁃C 含量显著增 加 ,而背膘厚度降低 ,可能与此有关 。多不饱和脂 肪酸对能量代谢 、肠道发育 、免疫功能和基因表达 调控等方面均发挥着重要作用 [27],限饲使多不饱 和脂肪酸在其整体结构中比例相对增加 [28]。 n⁃6与 n⁃3多不饱和脂肪酸比值的平衡对人体的平衡 十分重要 ,在一定范围内 n⁃6与 n⁃3多不饱和脂肪 酸比值越小对人体营养吸收越有益 ,在 n⁃3不饱和 脂肪酸中 ,对人体最重要的不饱和脂肪酸是二十 五烯酸 ,可以降低血管中胆固醇含量 ,本试验血清 生化结果中 TC 含量降低可能与此有关 。脂肪组 织是肉特殊风味的来源 ,是形成肉产品风味的一 个重要因素 。脂肪酸随着不饱和度增加 ,熔点降 低 ,肉中脂质的柔软性提高 。不饱和脂肪酸还是 重要的芳香物质与芳香物质前体 ,含有一定量多 不饱和脂肪酸的猪肉食用价值较高 ,其嫩度 、多汁 性 、香味及总体可接受的评分值高 [29]。本试验中 ,限饲条件下延长饲养时长育肥猪背最长肌总 n⁃3多不饱和脂肪酸的比例升高 ,肉的风味提升 ,与以 往的研究结果 [2]一致 。 3.4 限饲条件下不同饲养时长对育肥猪背最长肌 糖酵解潜力 、肌纤维类型关键基因表达的影响 Heyer 等 [16]报道 ,限饲可抑制糖酵解过程及 其内源性分子毒性 [30]。本试验发现 ,限饲条件下 延长饲养时长使猪背最长肌无氧酵解减少 ,pH 下 降的速度延缓 。肌纤维由 Ⅰ型氧化型肌纤维和 Ⅱ型酵解型肌纤维组成 ,后者分为 3种类型 (Ⅱ a 、Ⅱx 和 Ⅱb )[31]。成熟期的 MyHC 异构体之间的转 化具有一定规律 ,4种类型一般按 Ⅰ→Ⅱa →Ⅱx →Ⅱb 顺序相互转化 ,且转化速率不同 。本试验中 ,糖酵解潜力下降的原因可能是肌纤维从酵解型肌 纤维向氧化型发育 。钙调神经磷酸酶 /活化 T 细 胞核因子 (CaN/NFAT )信号通路被认为是动物出 生后维持和调节骨骼肌肌纤维类型特异基因表达 的重要通路之一 ,可激活慢肌纤维类型特异基因 的表达 ,本试验中作为激活该通路的信号分子的 前体物质的丝氨酸含量增加可能与这一过程有 关 [32]。肌纤维直径越小 ,横截面积越小 ,则密度越 大 ,肌肉系水力越强 ,嫩度越大 ,肉质越鲜美 [33],限 饲过度则导致前期肌纤维细胞增多的发育受 阻 [34]。本试验中 ,饲养时长延长 2个月 ,显著提高 了背最长肌 MyHC Ⅰ mRNA 相对表达水平 ,改善 了肌纤维类型的组成 ,提高了肉的嫩度 ,与 Yang 等 [35]的研究结果一致 。 4 结 论 通过限饲延长饲养时长 ,可降低育肥猪机体 脂肪沉积 ,并改善脂肪酸和肌纤维类型组成 ,从而 提高肉品质 ,饲养时长延长 2个月时肉品质显著 提高 ,但过度限饲会导致生长性能和胴体品质下 降 ,且在一定程度上增加了造肉成本 。 参考文献 : [ 1] 李佳凝 ,刘洋 ,刘大伟 ,等 .能量限饲对肉种鸡肉品质 的影响 [ J ] .黑龙江畜牧兽医 ,2018(15):116-119.LI J N ,LIU Y ,LIU D W , et al.Effect of energy re⁃stricted feeding on meat quality of broiler breeders [ J ] . 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Effects of Different Feeding Time under Restricted Feeding Conditions on Carcass Quality , Meat Quality and Serum Biochemical Indices of Finishing Pigs CHEN Sisi1,2 HAN Mengmeng1,2 GONG Saiming1,3 YIN Yunju1,3 LUO Jie4 SHU Jiancheng4 DENG Dun4 YANG Feilai4 LI Fengna1,2 GUO Qiuping1∗ (1. Hunan Provincial Key Laboratory of Animal Nutritional Physiology and Metabolic Process , Key Laboratory of Agro⁃Ecological Processesin Subtropical Region ,Institute of Subtropical Agriculture , Chinese Academy of Sciences , Changsha 410125, China ; 2. University of Chinese Academy of Sciences , Beijing 100049, China ; 3. College of Animal Science and Technology , Hunan Agricultural University , Changsha 410128, China ; 4. Tangrenshen Group Limited Company , Zhuzhou 412007, China ) Abstract : This experiment was conducted to investigate the effects of different feeding time under restricted feeding conditions on carcass quality , meat quality and serum biochemical indices of finishing pigs. Thirty healthy three⁃way crossbred weaned piglets with similar body weight [(10.11±0.10) kg ] were randomly di⁃vided into 3 groups (10 replicates in each group and 1 piglet in cah replicate ): group A ( feeding for 5months ), group B ( feeding for 6 months ) and group C ( feeding for 7 months ) . The feed intake was con⁃trolled to 85% and 80% of group A , respectively , the 3 groups started at different time , when the average weight of experimental pigs in 3 groups reached 120 kg , slaughtered at the same time. The results showed that compared with the group A : 1) the average daily gain and average daily feed intake of groups B and C were significantly decreased (P <0.05), the carcass straight length was significantly increased (P <0.05); the back⁃fat thickness of group B was significantly decreased (P <0.05);the longissimus dorsi redness ( a ∗) value at 45 min after slaughter of groups B and C was significantly increased (P <0.05), and the brightness (L ∗) val⁃ue was significantly decreased (P <0.05); 2) the serum urea nitrogen content of group B was significantly de⁃creased (P <0.05),the contents of total protein ,albumin , glucose ,cholesterol ,low density lipoprotein cho⁃lesterol and free fatty acid in serum of group C weresignificantly decreased (P <0.05),and the serum high⁃density lipoprotein cholesterol content of groups B and C was significantly increased (P <0.05); 3) the taste strength value of sweet amino acids , such as serine , glycine and arginine in longissimus dorsi of group B was significantly increased (P <0.05),and the tastestrength value of bitteramino acid ,such as phenylalanine in longissimus dorsi of groups B and C was significantly decreased (P <0.05); 4) the proportions of C18∶3n3and C20∶2 in longissimus dorsi of group B were significantly increased (P <0.05), and the proportions of C18 ∶3n3, C20∶2, C22∶6n3 and total n⁃3 polyunsaturated fatty acids in longissimus dorsi of group C were sig⁃nificantly increased (P <0.05); 5) the glucose content and porcine hexokinase activity in longissimus dorsi of groups B and C were significantly increased (P <0.05), the glycolysis potential and glycogen content in longis⁃simus dorsi of group C were significantly decreased (P <0.05), and the mRNA expression level of myosin heavy chain Ⅰin longissimus dorsi of groups B and C was significantly increased (P <0.05) . In conclusion ,the longissimus dorsi fatty acid composition , musclefiber type and meat quality of finishing pigs can be im⁃proved by extending the feeding time to 7 months under restricted feeding conditions , but the growth perform⁃ance can be decreased , it increases the cost of making meat to some extent.[Chinese Journal of Animal Nutri⁃tion , 2023, 35(5):2847⁃2858] Key words : restricted feeding ; meat quality ; muscle fiber type ; finishing pigs (责任编辑 武海龙 )
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