虾青素是海洋生物体内主要的类胡萝卜素之一,具有许多重要的生物学功能,可作为维生素A原,抗氧化性强于β -胡萝卜素和维生素E,虾青素能清除体内由紫外线照射产生的自由基、抑制多不饱和脂肪酸的氧化、调节免疫功能改善视力、加速色素形成以及抗肿瘤等。
【仪电分析】雨生红球藻粉中虾青素的测定-液相色谱法 虾青素是海洋生物体内主要的类胡萝卜素之一,具有许多重要的生物学功能,可作为维生素A原,抗氧化性强于β-胡萝卜素和维生素E, 虾青素能清除体内由紫外线照射产生的自由基、抑制多不饱和脂肪酸的氧化、调节免疫功能改善视力、加速色素形成以及抗肿瘤等。 一、方法原理 用甲醇-二氯甲烷(体积比3:1)的混合溶剂,在恒温水浴振荡器中振荡后低温下离心,重复2-3次,收集上清液,,以色谱峰的保留时间定性,外标法定量。 二、主要仪器及试剂 a.高效液相色谱仪: LC220; b.针式过滤器; c.电子天平; d.高速冷冻离心机; e.水浴恒温振荡器; f.虾青素标准品; g.甲醇:色谱纯; h.二氯甲烷:分析纯。 三、实验方法 3.1参考色谱条件 色谱柱 C18(250mmx4.6mm×5um) 流速 1.0mL/min 波长 478nm 柱:温 30°C 进样量 20pL 流动相 甲醇 3.2标准溶液配制 a.准确称取10.0 mg虾青素标准品,用甲醇-二二甲烷(体积比为3:1) 溶剂定容于100mL的棕色容量瓶中,制得 100mg/mL 虾青素储备液,密封冷藏备用。 b.取6个洁净的1ml容量瓶,预先加入适量的甲醇-二氯甲烷(体积比为3:1)溶剂,然后分别加入10pL、20uL、40uL、60uL、80 uL、100pL的虾青素标准储备液,配制成虾青素浓度分别为 1ug/mL、2ug/mL、4ug/mL、6pg/mL、8ug/mL、10pg/mL 的标准系列,按参考的色谱条件进样,以虾青素的质量浓度为横坐标,峰面积为纵坐标绘制线性回归方程,由色谱工作站处理数据得到的回归方程。 3.3样品预处理 用二次蒸馏水将雨生红球藻粉样品水洗3次后冷冻干燥,称取5g已除去水分的藻粉于具塞三角瓶中,加入甲醇-二氯甲院(体积比为3:1)的混合溶剂50 mL, 同时加10颗玻璃珠,最后将三角瓶外罩褐色塑料薄膜,放入40℃的水浴恒温振荡器中振荡 30min,提取液在低温下离心20 min, 将上清液转移至另一三角瓶中。重复以上的提取步骤2~3次,直至藻粉中的色素基本提取完全,藻粉沉淀呈土灰色。收集所有的上清液,混合,低温冷藏待测。 四、实验结果 4.1标准工作曲线 虾青素的标准工作曲线如图1所示: 图1虾青素标准工作曲线 4.2标准样品色谱图 浓度为 10mg/L 青虾青素标准溶液的色谱图如图2所示: [mV] 图2浓度为10mg/L 的虾青素标准溶液色谱图 4.3实际样品测试 取某样品经前处理,测试结果未检出。 【仪电分析】雨生红球藻粉中虾青素的测定-液相色谱法虾青素是海洋生物体内主要的类胡萝卜素之一,具有许多重要的生物学功能,可作为维生素A原,抗氧化性强于β -胡萝卜素和维生素E,虾青素能清除体内由紫外线照射产生的自由基、抑制多不饱和脂肪酸的氧化、调节免疫功能改善视力、加速色素形成以及抗肿瘤等。一、方法原理用甲醇-二氯甲烷(体积比3:1)的混合溶剂,在恒温水浴振荡器中振荡后低温下离心,重复2-3次,收集上清液,以色谱峰的保留时间定性,外标法定量。 二、主要仪器及试剂a. 高效液相色谱仪:LC220; b. 针式过滤器;c. 电子天平;d. 高速冷冻离心机;e. 水浴恒温振荡器;f. 虾青素标准品; g. 甲醇:色谱纯;h. 二氯甲烷:分析纯。 三、实验方法3.1 参考色谱条件色谱柱C18(250mm×4.6mm×5μm)流 速1.0 mL/min波 长478nm柱 温30℃进样量20μL流动相甲醇3.2 标准溶液配制a. 准确称取10.0 mg虾青素标准品,用甲醇-二氯甲烷(体积比为3:1)溶剂定容于100 mL的棕色容量瓶中,制得100mg/mL虾青素储备液,密封冷藏备用。b. 取6个洁净的1ml容量瓶,预先加入适量的甲醇-二氯甲烷(体积比为3:1)溶剂,然后分别加入10μL、20μL、40μL、60μL、80μL、100μL的虾青素标准储备液,配制成虾青素浓度分别为1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL、6μg/mL、8μg/mL、10μg/mL的标准系列,按参考的色谱条件进样,以虾青素的质量浓度为横坐标,峰面积为纵坐标绘制线性回归方程,由色谱工作站处理数据得到的回归方程。3.3 样品预处理用二次蒸馏水将雨生红球藻粉样品水洗3次后冷冻干燥,称取5 g已除去水分的藻粉于具塞三角瓶中,加入甲醇-二氯甲院(体积比为3:1)的混合溶剂50 mL,同时加10颗玻璃珠,最后将三角瓶外罩褐色塑料薄膜,放入40℃的水浴恒温振荡器中振荡30min,提取液在低温下离心20 min,将上清液转移至另一三角瓶中。重复以上的提取步骤2~3次,直至藻粉中的色素基本提取完全,藻粉沉淀呈土灰色。收集所有的上清液,混合,低温冷藏待测。四、实验结果4.1 标准工作曲线虾青素的标准工作曲线如图1所示: 图1 虾青素标准工作曲线4.2 标准样品色谱图浓度为10mg/L的虾青素标准溶液的色谱图如图2所示: 图2 浓度为10mg/L的虾青素标准溶液色谱图4.3 实际样品测试取某样品经前处理,测试结果未检出。
还剩1页未读,是否继续阅读?
上海仪电分析仪器有限公司为您提供《雨生红球藻粉中虾青素检测方案(液相色谱仪)》,该方案主要用于其他中理化分析检测,参考标准--,《雨生红球藻粉中虾青素检测方案(液相色谱仪)》用到的仪器有上海仪电分析-LC220液相色谱仪(LC)