食品中三聚氰胺检测方案(液相色谱仪)

华谱科仪(北京)科技有限公司 华谱科仪(北京)科技有限公司 华谱科仪 S6000液相色谱仪检测食品中的三聚氰胺 方案优势 1) 前处理遵循国标方法，方法可靠 2) 方案灵敏度优于国标要求 3) 分析时间短，分析效率高 4) 方法适用性及重现性好 项目背景 由于每个三聚氰胺分子中都含有6个氮原子，食品、饲料检测中，添加少量就可以大大提高样品中非蛋白的含量。造假者把含氮量高的三聚氰胺掺入食品或饲料中造成蛋白质增高的假象，引发了严重的食品安全事故。由于样品基质的不同在加入离子对试剂之后，水溶性维生素VB族，核酸，均可能和三聚氰胺同时出峰，出现“假阳性”现象，采用 HPLC-DAD进行快速定性，排出假阳性干扰。 目前实验室最为常用的检测方法是液相色谱法，食品中检测三聚氰胺对应的国家标准为GB/T22388-2008和 GB/T22400-2008；饲料中检测三聚氰胺对应的国家标准为NY/T 1372-2007，本项目依照 GB/T 22388-2008开发液相方法，准确、快捷、方便的检测乳品中的三聚氰胺。 图1三聚氰胺结构式 实验部分 样品前处理 样品：称取2g试样于50mL具塞塑料离心管中，加入15 mL 三氯乙酸溶液和5mL乙腈，超声提取10 min， 再震荡提取 10 min， 以不低于 4000 r/min 离心 10 min。上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后，用三氯乙酸溶液定容至25 mL， 移取 5 mL 滤液，加入5mL水 混匀后做待净化液。 样品加标：称取2g试样于 50 mL 具塞塑料离心管中，加标 0.4 ug/mL、加入15 mL三氯乙酸溶液和5mL乙腈，超声提取 10 min， 再震荡提取10 min， 以不低于4000 r/min 离心10 min。上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后，用三氯乙酸溶液定容至25 mL，移取 5mL滤液，加入5mL 水混匀后做待净化液。 净化：将待待化液转移至固相萃取柱中，流速<1mL/min， 进行净化。 仪器配置与分析方法 液相条件 仪器配置 Acchrom S6000 组织器 S6110四元泵 S6210 进样器S6310 柱温箱 S6430DAD 检测器 色谱柱 Tnature C18)4.6*250mm5um 流动相 A：庚烷磺酸钠离子对试剂-90%；B：乙腈-10% 流速 1.0ml/min 进样量 20uL 柱温 40℃ 检测波长 240nm 结果与讨论 实际样品的测定 用上述方法测定三聚氰胺标准品，结果如图2所示，仅用15 min 就能完成一针的分析。 图2 三聚氰胺标准品测定结果色谱图 采用上述样品前处理方法对实际样品中的三聚氰胺进行测定，选用某品牌共6种基质液态乳、乳饮料，测定结果如图3所示。实际样品中的三聚氰胺出峰处均实现了基线分离，并且测定结果表明不受基质杂质干扰。 0.06- 0.030 图3实际样品中三聚氰胺测试色谱图 表1样品中三聚氰胺的检测回收率计算 样品 加标量 伊利QQ星 安慕希 燕麦 营养 谷粒多 伊利优 酸乳 牛奶 果浆 回收率 0.4 ug/mL 90.6% 91.1% 91.6% 90.5% 92.25% 92.5% 线性、检测限、定量限 对方法进行了线性、检出限及定量限的考察，具体结果见表2。取标准储备液配制成不同浓度的标准溶液，以待测物峰面积为纵坐标，待测物浓度为横坐标绘制标准曲线，三聚氰胺在 0~2 ug/mL 内线性相关系数为 0.99991。以 S/N=3 为检测限， S/N=10为定量限，测定三聚氰胺的检出限和定量限，均低于国家标准中液相法测定乳品中三聚氰胺的检出限和定量限，满足了低浓度定量检测需求，具体结果见表2 表2三三聚氰胺的线性、检出限和定量限 名称 浓度 R2 检出限 定量限(国标) 三聚氰胺 0~2 ug/ml R2=0.99991 0.4 mg/kg 1.25 mg/kg (2mg/kg) 重复性 以标准对照品色谱图考察方法重复性，连续进6针，具体见图4，结果表明该方法在连续进样时重复性良好。 图4 标品重复性验证色谱图 加标回收率 取某品牌液态乳样品，添加2、5、10 mg/kg 3个浓度的三聚氰胺标准溶液，每个浓度水平平行3组，按照上述样品前处理方法进行处理，分别测定回收率并计算精密度，具体结果见表4。结果表明各核苷酸的回收率均在80%~110%，方法的相对标准变差(RSD)为1.37%~4.29%。 伊利 QQ星 加标量 2mg/kg回收率(%) RSD 加标量 5 mg/kg回收率(%) RSD 加标量10mg/kg回收率(%) RSD 三聚氰胺 94.85 4.29 88.06 2.14 94.1 1.37 87.05 91.56 91.6 90.75 91.22 92.5 结论 本项目遵循国标方法检测乳品中的三聚氰胺，15 min 内准确检测，无杂峰干扰，分离度良好。该方法是分析乳制品基质中三聚氰胺的有效手段。 www.acchrom-tech.com华谱科仪(北京)科技有限公司 热线电话：010-8410-9313 邮箱： marketing@acchrom-tech.com 仅用15 min就能完成一针三聚氰胺样品的分析，操作简便，分析时间短，实际样品中无杂质干扰，三聚氰胺在0~2 μg/mL内线性相关系数为0.99991。以S/N=3为检测限，S/N=10为定量限，测定三聚氰胺的检出限和定量限，满足了低浓度定量检测需求。