乳制品中三聚氰胺检测方案

MINGNIKE北京明尼克技术快损通向世界之窗VARIAN专版VARIAN Varian 食品安全应用VARIAN Varian 食品安全应用 LC-MS/MS 结合 Bond Elut Plexa 同时快速检测牛奶和浓缩婴儿配方奶粉中的三聚氰胺、三聚氰酸以及其它相关化合物 样品前处理 取2mL牛奶/浓缩婴儿配方奶粉，加入 12 mL 2.5%甲酸，涡旋混合器上充分混合 15-30S； 超声提取 30 min； 4000 rpm 离心10 min； 将约1.4mL 上清液转入1.5mL 规格的微型离心管中；13200 rpm离心 30 min； 将100 pL转入1.5mL微型离心管中，用900 pL 乙腈稀释； 7. 涡旋混匀 30S， 13200 rpm 离心 30min； SPE 净化过程 Bond Elut Plexa (60 mg，3 mL P/N. 12109603) 活化 3mL 乙青 上样 将上步离心的上清液转入 Plexa SPE柱 收集滤液收集滤液转入2mL样品瓶，待检测 收集滤液转入2mL样品瓶，待检测 液相色谱条件 色谱柱： Varian Polaris NH2， 150 x 3 mm x 5oum，P/N. A2013150X030； 流动相A： 乙腈； 流动相B： 10mM乙酸铵和0.1%乙酸缓冲液； 梯度条件： 78%A等度洗脱，流速 0.4 mL/min； 柱温： 40℃： 进抹体积： 20 uL。 质谱条件 离子化模式：ESI+； 碰撞气： 2.2 mTorr氩气； 干燥气： 30 psi， 250℃： 雾化器： 70 psi； 电喷雾电压：5000/4000V(±模式) 毛细管电压：±50V 检测器： 1300V 表 1 MS/MS 参数及各分析物 logP 值 化合物 1ogP 母离子 子离子 电压(V) 量(V) 时间 (ms) 三聚氰胺 .一-1.37 (+)127 68* 50 22 100 (+)127 85 50 14 100 三聚氰胺 -1.2 (+)128 86* 50 12 100 二酰胺 (-)126 83 -50 11.5 100 三聚氰酸 -0.7 (-)127 42 -50 14 100 (-)127 84* -50 10.5 100 三聚氰胺 -0.2 (-)128 42* -50 13 100 一酰胺 (-)128 85 -50 9.5 100 *为定量离子 分析物化学结构式 三聚氰胺 三聚氰胺二酰胺 三聚氰酸 三聚氰胺一酰胺 三聚氰胺及其它相关分析物色谱图 图1三聚氰胺及其它相关分析物标准品总离子流图 图2牛奶基质添加三聚氰胺一酰胺经过 Plexa 净化和没有净化的谱图对比 图3牛奶中添加不同浓度4种目标分析物和空白基质总离子流图 图4婴儿配方奶中添加不同浓度4种目标分析物和空白基质总离子流图 图5牛奶中添加0.25Hg/g4种目标分析物MRM检测色谱图 图6婴儿配方奶粉中添加0.25Mg/g4种目标分析物MRM检测色谱图 方法线性 回收率结果 表24种化合物在牛奶和婴儿配方奶粉中1.0Hg/mL添加水平的回收率结果 1.0Hg/mL添 1.0Hg/mL 添 样品 3次平均 加 加 %平均回 三聚氰胺 收率 88.3 83.8 %RSD ±14.7% 19.60% %平均回 三聚氰胺 二酰胺 收率 92.5 94.9 %RSD ±6.2% ±14.2% %平均回 三聚氰酸 收率 77.5 67.8 %RSD ±16.4% 6.5% 三聚氰胺 %平均回 收率 89.4 87.3 一酰胺 %RSD ±14.7% ±18.0% Amount 图6.三聚氰胺、三聚氰胺二酰胺、三聚氰酸三聚氰胺一酰胺标准曲线图 北京明尼克分析仪器设备中心Tel： ax：mail：mingnike@vip.com