食用油中苯并 (a) 芘检测方案(液相色谱仪)

thermoscientific 标准溶液制备热线8008105118电话4006505118www.thermofisher.comThermoFisher口赛默飞色谱和质谱中国SCIENTIFIC 在线固相萃取-高效液相色谱法测定食用油中的苯并(a)芘 刘兴国曹建明 金燕 赛默飞世尔科技(中国)有限公司色谱质谱部 关键词 在线固相萃取高效液相色谱法苯并(a)芘食用油 目标 建立在线固相萃取高效液相色谱测定食用油中苯并(a)芘的方法 图1.苯并(a)芘结构 引言 仪器 苯并(a)芘 (Benzoapyrene)， 英文表示BaP， 是一种多环芳香烃类。其结晶为黄色固体，为世界公认的最强致癌物质之一。油料作物在晾晒、烘焙和浸出的过程中容易受到苯并(a)芘污染，人类从食物中摄入的苯并(a)芘量高于从空气和水中的，而从食用油中的摄入量占食物中摄入量的三分之一。我国非常重视食用油中的该类物质的检测， GB5009.27-2016对食品中的苯并(a)芘的提取、净化与检测方法进行了详细的描述2，该物质脂溶性较强，样品前处理步骤复杂耗时，我们采用双三元液相色谱仪， ChromSpher Pi 色谱柱进行在线除杂富集，，可以实现食用油直接进样分析，非常方便快捷。 Thermo U3000 DGLC 高效液相色谱仪(Thermo Scientific)，U3000 FLD3400RS荧光检测器 (Thermo Scientific)，振荡器(Thermo Scientific)， Reacti-Therm氮吹仪(ThermoScientific)， Thermo Scientific Chromeleon 色谱系统控制软件。 异丙醇和乙腈均为色谱纯级别(Fisher Scientific)。所有试剂均作空白实验，符合质量控制要求方可使用。水为超纯水机( Thermo Scientific GenPure Pro)制备。 精密配置苯并(a)芘标准中间液，浓度1.0 pg/mL。苯并(a)芘标准工作液：把中间液用乙腈稀释得到0.5 ng/mL、1.0 ng/mL、2.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10.0 ng/mL 和20.0 ng/mL 的标准曲线溶液，临用现配。 供试品溶液制备 色谱条件 富集柱： ChromSpher Pi (3.0 mm×80mm) 分析柱： Hypersil green PAH (250×4.6 mm，5pm) (PN31105-254630， SN11110309E1) 流动相条件及阀切换程序：见表 1 进样体积： 80 pL 柱温：i： 35℃ 食用油 0.45um 滤膜过滤后直接上机测定。 检测器条件：激发波长384nm， 发射波长406nm。 表1.梯度洗脱条件 时间 左泵 A——乙腈； B-—水； C——. -异丙醇 右泵 A——乙腈； B——水 Right valve 流速 C% A% B% (mL/min) (min) 流速 mL/min ) A% B% 0.00 0.5 0 0 100 1.5 40 60 1_2 5 0.5 0 0 100 5.1 0.5 40 60 0 7 6_1 7.5 0.5 40 60 0 1.5 40 60 22 0.3 100 0 0 1.5 40 60 1_2 26 0.3 100 0 0 26.5 0.5 0 0 100 28 1.5 100 0 28.5 1.5 40 60 35 0.5 0 0 100 1.5 40 60 图2.仪器连接图 图3.标准品测定谱图 图4.供试品溶液测定谱图 方法的线性范围和加标回收 线性范围 对0.5 ng/mL、1.0 ng/mL、2.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10.0 ng/mL 和 20.0 ng/mL系列浓度的标准溶液进行测定，以峰面积为纵坐标、浓度为横坐标制定标准曲线，曲线方程y=7945.52x-168.80，相关系数R=0.9999. 加标回收 称尔10g油样，按照1.0 pg/kg， 10.0pg/kg 和20.0 pg/kg 三个加标浓度进行加标，每个浓度2份，进液相系统测定，计算回收率，结果见表2，不同浓度加标回收率范围从54.582%到 79.889%，在与样品含量接近的加标浓度回收率达到79%，满足国标要求。 样品测定结果 取食用油样品，过滤制备两份供试溶液，进液相色谱仪进行测定，结果两份样品含苯并(a)芘分别为 1.765 ug/kg和1.741 pg/kg， 未超标。《食品安全国家标准食品中污染物限量》(GB 2762—2017)③中规定油脂及其制品中苯并(a)芘最大限量为 10pg/kg。 结论 本方法采用赛默飞双三元液相系统，在线固相萃取直接进样测定食用油中的苯并(a)芘，方法省去了国标方法的前处理步骤，油样直接进样分析，降低了人工和时间成本，方法学满足国标要求，具有较高的推广价值。 1.0pg/kg 加标 10.0 pg/kg 加标 20.0 ug/kg 加标 1(%) 78.789 54.974 57.731 2(%) 79.889 55.664 54.582 平均值(%) 79.339 55.319 56.156 ( [1] |I IBANEZ R ， AGUDO A， BERENGUER A， et al. D i e tary intake of polycyclic aromatic hydrocarbons i n a Spanishpopulation [J]. J Food Protec， 2005，68(10)：2190-2195. ) ( GB5009.27-2016食品中苯并(a)芘的测定[S]. ) ( B ] ( GB2762-2017食品安全国家标准食品中污染物限量 [S] ) 苯并 (a) 芘（Benzoapyrene），英文表示 BaP，是一种 多环芳香烃类。其结晶为黄色固体，为世界公认的最强 致癌物质之一。油料作物在晾晒、烘焙和浸出的过程中 容易受到苯并 (a) 芘污染，人类从食物中摄入的苯并 (a) 芘量高于从空气和水中的，而从食用油中的摄入量占食 物中摄入量的三分之一 [1]。我国非常重视食用油中的该 类物质的检测，GB5009.27-2016 对食品中的苯并 (a) 芘 的提取、净化与检测方法进行了详细的描述 [2]，该物质 脂溶性较强，样品前处理步骤复杂耗时，我们采用双三 元液相色谱仪，ChromSpher Pi 色谱柱进行在线除杂富 集，可以实现食用油直接进样分析，非常方便快捷。