降脂灵片中2，3，5，4''-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷 含量检测方案(液相色谱仪)

文档编号：LC-K2025-01-200404 降脂灵片中2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-B-D-葡萄糖苷含量的测定高效液相色谱法 一、摘要 本文使用悟空 K2025高效液相色谱仪测定降脂灵片中2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-B-D-葡萄糖苷的含量。连续进样7针，其峰面积的重复性完全满足2020年版《中国药典》的要求。 二、背景 降脂灵片由制何首乌、枸杞子、黄精、山楂、决明子5味中药构成，收录于2020年版《中国药典》中，具有补肝益肾，养血明目的功效。用于肝肾不足型高脂血症，症见头晕、目眩、须发早白。其中在2020年版《中国药典》规定，可利用高效液相色谱法测定制何首乌中2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-B-D-葡萄糖苷的含量以控制药物质量。 三、实验过程 1范围 适用于降脂灵片中的2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-B-D-葡萄糖苷的含量测定 2原理 2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-B-D-葡萄糖苷在265nm 处有紫外吸收，使用高效液相色谱法进行检测，外标法定量。 3试剂与材料 3.1水：符合GB/T6682的一级水； 3.2乙腈：色谱纯； 3.3 0.22um 微孔尼龙滤膜。 4仪器与设备 4.1.1高效液相色谱仪(悟空仪器K2025)：配有紫外检测器； 4.2分析天平：精确到0.0001g； 4.3超声波清洗机； 5测定步骤 5.1对照品溶液的制备 取2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品适量，精密称定，加流动相制成每 1mL含2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-B-D-葡萄糖苷 0.05mg的溶液，即得。 5.2样品前处理 取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约lg，精密称定，置50ml量瓶中，加流动相40ml，超声处理(功率250W， 频率40kHZ) 30分钟，放冷，加流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 5.3测定 5.3.1色谱条件： a)色谱柱： C184.6×250mm， 5um或者相当的色谱柱； b)流动相：A：乙乙：B：水=17：83 c)柱温：30℃； d)进样量：10pL； e)流速：11mL/min： f)波长：320nm； 6色谱图及重复性结果 6.1按照上述色谱条件(5.3.1)进行采集，对照品溶液色谱图和样品色谱图如下：对照品溶液 图1对照品溶液色谱图 供试品溶液 图2供试品溶液色谱图 6.2重复性 对照品溶液重复性 图3对照品溶液进样7针的重复性 表2对照品溶液进样7针重复性数据统计 对照品 1 2 3 4 5 6 7 平均值 sd RSD% 保留时间 24.282 24.268 24.232 24.232 24.233 24.227 24.282 24.251 0.025 0.104 峰面积 1626.11 1630.914 1620.814 1621.113 1617.88 1612.997 1620.244 1621.439 5.737 0.354 对照品进行7针重复性测试，保留时间的 RSD 为0.104%， 峰面积的 RSD 为 0.354%。 供试品溶液重复性 图4：供试品溶液进样7针的重复性 表3供试品溶液进样7针重复性数据统计 供试品 1 2 3 4 5 6 7 平均值 sd RSD% 保留时间 24.175 24.193 24.218 24.255 24.18 24.195 24.227 24.206 0.029 0.118 峰面积 1499.118 1493.769 1489.867 1491.479 1491.742 1494.319 1488.829 1492.732 3.425 0.229 样品进行7针重复性测试，保留时间的 RSD 为 0.118%， 峰面积的 RSD 为 0.229%。 7.结论 结果表明， 使用 wooking K2025 高效液相色谱仪对降脂灵片中标准品溶液和供试品溶液的保留时间和峰面峰 RSD 均小于0.5%(n=7)， 满足2020版《中国药典》要求。此方法可为降脂灵片中2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-B-D-葡萄糖苷的检测提供参考。 一、摘要本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定降脂灵片中2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量。连续进样7针，其峰面积的重复性完全满足2020年版《中国药典》的要求。二、背景降脂灵片由制何首乌、枸杞子、黄精、山楂、决明子5味中药构成，收录于2020年版《中国药典》中，具有补肝益肾，养血明目的功效。用于肝肾不足型高脂血症，症见头晕、目眩、须发早白。其中在2020年版《中国药典》规定，可利用高效液相色谱法测定制何首乌中2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量以控制药物质量。