食品中着色剂检测方案

食品合成着色剂的提取与检测 (GB5009.35-2016) 背景 食品的色彩是食品感观品质的一个重要因素。人们在制作食品时常会使用一种食品添加剂一食用色素。目前使用的食用色素有天然食用色素和合成食用色素两大类。合成食用色素即人工合成的色素，其优点不少，如色泽鲜艳，着色力强，但它对人体也造成一定的危害，如具有一定的毒性、致泻性、致突性(基因突变)和致癌性。 鉴于合成食用色素的不安全性，国家加强了对这类合成色素的监管，制订了食品合成着色剂的测定标准 (GB5009.35-2016)。其中的前处理方法采用的是聚酰胺吸附法测定，但是该方法有一定的局限性，实验中对填料的含水量、操作温度和滴定速度都有一定的要求，且由于该填料对色素的吸附力不稳定而导致回收率数据不稳定。 适用范围 基于食品合成着色剂的测定标准 (GB5009.35-2016)，本实验采用的弱阴离子混合模式，针对人工合成色素中含有苯磺酸和苯甲酸结构的离子基团可以更好的结合，保证分析的稳定性，并且由于采用单分散聚乙烯吡咯烷酮基质，活化淋洗洗脱步相比其他竞争对手产品可以更快的处理，保证回收率的基础上达到更好的净化能力，适用于多个复杂基质样品的检测。 实验步骤 1、样品制备 1.取8种色素样品各 20mg，分别溶于10%的乙醇水溶液中，根据 HPLC的出峰峰高调整相应浓度，配置成 50ppm浓度的混标溶液，待用。 2.取果冻基质4g于离心管内，加入10mL的提取液(乙醇：氨水：水=7：2：1)，震荡混匀 1min，在4000转的条件下离心5min.提取上清液，重复三次，收集上清液备用。 3.取八宝粥基质4g于离心管内，加入10mL的提取液(140mL的乙醇：乙腈(2：1)，再加60mL水和2mL氨水)，震荡混匀 1min， 在4000转的条件下离心 5min.提取上清液，重复三次，收集上清液备用。 4.各取两种基质的上清液 2mL于两个10mL容量瓶中，用超纯水定容至10mL， 加入 200uL 的 50ppm 的混标溶液，用柠檬酸溶液调节至pH=6(±0.1)，作为上样液备用。 2、实验方法 2.1前处理实验 SPE 柱： SelectCore WAX 柱(150mg/6mL) 1.1上样液：两种基质的上样液。 2. 活化：依次用6mL 甲醇、6mL10%甲酸水溶液活化； 3. 上样：上样液液入 SPE小柱中，弃去流穿液； 4. 淋洗：移取6mL的甲醇溶液注入 SPE 小柱中，弃去淋洗液； 5. 洗脱：移取6mL的5%氨水甲醇液注入 SPE 小柱中，收集洗脱液； 6. 收集：氮气吹干，用10%乙醇水溶液定容至和上样时一样的体积，过 0.45um PTFE 滤膜，上HPLC检测。 2.2液相色谱条件 色谱柱： ChromCore C18 4.6×250mm5um 流动相A：乙腈 流动相B：0.02mol/L乙酸铵水溶液 波长：254 nm 进样量： 5uL 柱温箱：35℃ 梯度设置： 时间 流动相B 95 20 70 26 66 27 10 30 10 32 95 38 95 实验谱图及加标回收率结果 图1混标 图2果冻基质 图3添加水平为 2.5mg/kg 的果冻中人工合成色素检测图谱 加标回收率： 回收率/色素 1柠檬黄 2新红 3苋菜红 4胭脂红 5日落黄 6诱惑红 7亮蓝 8赤藓红 Wax 99.96% 94.67% 82.34% 82.48% 120.95% 98.65% 97.33% 81.95% 图4八宝粥基质 图5添加水平为 2.5mg/kg 的八宝粥中人工合成色素检测图谱 加标回收率： 回收率/色素 1柠檬黄 2新红 3苋菜红 4胭脂红 5日落黄 6诱惑红 7亮蓝 8赤藓红 Wax 99.25% 95.23% 97.03% 86.13% 103.56% 102.89% 103.92% 82.73% 纳谱分析NanoChrom纳谱分析技术(苏州)有限公司Phone： E-mail： customerservice@nanochrom.com Web： www.nanochrom.com 回收率/色素1柠檬黄2新红3苋菜红4胭脂红5日落黄6诱惑红7亮蓝8赤藓红Wax99.25%95.23%97.03%86.13%103.56%102.89%103.92%82.73%