辣椒粉、辣椒酱、辣椒油中苏丹红检测方案

辣椒粉实验谱图 食品中苏丹红染料的提取与检测 (国标GB/T19681-2005) 背景 自2005年亨氏辣椒酱被检出含有“苏丹红一号”以来，多家餐饮、食品公司相继“涉红”，苏丹红事件席卷中国。苏丹红是一种化学染色剂，并非食品添加剂。该物质具有偶氮结构，这种化学结构决定了它具有致癌性，对人体的肝肾器官具有明显的毒性作用。因其鲜红的色泽，很多不法商家利用这一特性将其添加到辣椒粉、辣椒酱、辣椒油等辣椒制品中以牟取更高的利润。目前，国标GB/T19681-2005 食品中苏丹红染料的检测方法，使用的前处理柱是中性氧化铝固相萃取柱，存在着活度不易控制、回收率不稳定、净化后油脂较多等问题，严重干扰了苏丹红的检测，因此，寻找一种简便高效的检测食品中苏丹红的方法迫在眉睫。 适用范围 参照国标 GB/T19681-2005食品中苏丹红染料的检测方法高效液相色谱法，适用于食品中苏丹红染料的检测。 实验步骤 1、样品提取： 参照国标 GB/T19681-2005中样品处理方法，得到待净化液，辣椒油等含油量较高的样品得到待净化液后，需加入2g无水硫酸钠，涡旋、离心后，取上清液上样。 2、净化： (1)活化： SelectCore SDR 苏丹红专用柱，规格 500mg/6mL，依次使用5 mL 二氯甲烷、5 mL正己烷活化SPE柱 (2)上样：将待净化液上到 SPE 柱上 (3)淋洗：使用5 mL 正己烷淋洗 SPE 柱，弃去全部淋洗液 (4)洗脱：：先使用5 mL 二氯甲烷脱脱，待5mL二氯甲烷快要流干时，再加入2mL二氯甲烷，并收集全部洗脱液，备用 (5)将洗脱液在40°℃下氮吹至干，用1mL乙腈复溶，超声2 min， 涡旋 10 s， 过 0.45 um 的有机滤膜，供液相色谱检测 3、液相色谱仪器条件 色谱柱： ChromCore TM C18，， 4.6×150mm， 3 um， 120A 流动相：A：水；流动相B：乙腈 梯度洗脱步骤如下表所示： 时间(min) A% B% 流速(mL/min) 0.00 10 90 1.000 5.00 10 90 1.000 10.00 5 95 1.000 15.00 5 95 1.000 柱温：30℃ 进样量： 20uL 检测波长：500nm 实验谱图和加标回收率数据 苏丹红混标图谱 图1 5 mg/L 苏丹红混标(苏丹红I、Ⅱ、Ⅲ、IV)液相色谱图 峰号 1 2 3 4 对应物质 苏丹红I号 苏丹红II号 苏丹红Ⅲ号 苏丹红IV号 图2 辣椒粉空白液相色谱图 图3 辣椒粉加标(加标量：2.5mg/Kg)溶液液相色谱图 图4 辣椒粉加标(加标量：5.0mg/Kg)溶液液相色谱图 辣椒粉加标回收率数据 峰号 对应物质 加标量 2.5mg/Kg 回收率 加标量 5.0mg/Kg 回收率 1 苏丹红I号 103.65 113.39 2 苏丹红II号 99.91 110.65 3 苏丹红I号 100.62 117.04 4 苏丹红IV号 103.25 116.56 辣椒酱实验谱图 图5 辣椒酱空白液相色谱图 图6 辣椒酱加标(加标量：0.25mg/Kg)溶液液相色谱图 mV 图7 辣椒酱加标(加标量：2.5mg/Kg)溶液液相色谱图 辣椒酱加标回收率数据 峰号 对应物质 加标量 0.25mg/Kg 回收率 加标量 2.5mg/Kg 回收率 1 苏丹红I号 97.31 98.67 2 苏丹红II号 89.05 84.67 3 苏丹红II号 98.40 107.00 4 苏丹红IV号 88.59 106.00 辣椒油实验谱图 图8 辣椒油空白液相色谱图 图9 辣椒油加标(加标量：2.5mg/Kg)溶液液相色谱图 图10 辣椒油加标(加标量： 5.0mg/Kg)溶液液相色谱图 辣椒油加标回收率数据 峰号 对应物质 加标量2.5mg/Kg 回收率 加标量 5.0mg/Kg 回收率 1 苏丹红I号 103.00 100.33 2 苏丹红II号 93.50 103.21 3 苏丹红ⅢI号 81.00 103.08 4 苏丹红IV号 77.50 95.17 辣椒油提取液经过 SelectCore 辣椒油提取液经过中性氧化铝 SDR 苏丹红专用柱净化后样品 SPE 柱净化后样品颜色 颜色 实验结论 由以上数据和图谱可知，辣椒油提取液经过 SelectCore SDR 苏丹红专用柱净化后样品颜色澄清透明，没有明显的油脂， GB/T19681-2005 中使用的是中性氧化铝 SPE 柱，但是，经过中性氧化铝 SPE 柱净化后样品颜色较深，并且能看到明显的油脂。 纳谱分析技术(苏州)有限公司Phone： E-mail： customerservice@nanochrom.com Web： www.nanochrom.com纳谱分析NanoChrom 辣椒油提取液经过SelectCore SDR苏丹红专用柱净化后样品颜色澄清透明，没有明显的油脂，GB/T19681-2005中使用的是中性氧化铝SPE柱，但是，经过中性氧化铝SPE柱净化后样品颜色较深，并且能看到明显的油脂。