果汁中展青霉素检测方案

果汁中展青霉素的残留检测 背景 展青霉素又称展青霉毒素、棒曲霉素、珊瑚青霉毒素，它是由曲霉和青霉等真菌产生的一种次级代谢产物。毒理性试验表明，展青霉素具有影响生育、致癌和影响免疫系统等毒理作用，同时也是一种神经毒素，使人神经麻痹、肺水肿、肾功能衰竭，对人体的危害很大。展青霉素首先在霉烂苹果和苹果汁中发现，广泛存在于各种霉变水果和青贮饲料中。由于普遍存在果汁中酚类成分干扰较多，与展青霉素难以分离，因此在用高效液相色谱法测定展青霉素的时候，需要对其前处理，降低干扰组分的影响。 展青霉素结构式 适用范围 本方法(参考GB5009.185-2016 第二法中的高效液相色谱法)，适用于苹果为原料的水果及其果蔬汁类和酒类食品中展青霉素含量的测定。 实验步骤 1、试剂准备 甲醇(CHOH)：色谱纯 乙腈 (CH3CN)：色谱纯 乙酸(CHCOOH)、乙酸铵(CH3COONH4)和乙酸乙酯都是分析纯 水：超纯水 溶液配制 乙酸溶液：准确量取 10 mL 乙酸加入 250 mL水，震荡摇匀。 乙酸铵水溶液(5mmol/L)：称取0.38g乙酸铵，加1000 mL 水溶解。 10%甲醇水：准确量取10mL甲醇，用水定容到100 mL 容量瓶中。 2、样品提取 2.1称取澄清果汁试样2g(准确到0.01g)，根据标准加入对应的对照品，待净化。 2.2称取1g试样(精确到0.01g)于50mL离心管中，静置片刻，加入10mL水，摇晃片刻后再加入10mL乙酸乙酯，涡旋混合5 min 后， 在 6000r/min 的条件下离心5 min， 移取上层乙酸乙酯于梨形烧杯中，再用乙酸乙酯提取一次，提取上清液合并，在40℃的水浴条件下蒸干，用5mL乙酸溶液定容，待净化。 3、净化 SPE 柱： SelectCore MAX 固相萃取柱(150mg/6mL) 活化：依次用6mL的甲醇和水活化； 上样：加入提取好的全部上清液； 淋洗：依次用3mL的 5mmol/L 乙酸铵水溶液、超纯水溶液进行淋洗； 洗脱：用4mL甲醇溶液进行洗脱，收集洗脱液加入20uL乙酸水溶液，在40℃下用氮气吹干，再用1mL10%甲醇水复溶后，上机。 4、液相色谱仪器条件 色谱柱： ChromCoreTM AQ C18 5um， 4.6x150mm 柱温：30°℃ 进样体积：50uL 流动相：A相：超纯水 B相：：乙腈 洗脱梯度： 时间 (min) 流速(mL/min) 流动相A(%) 流动相B(%) 0 1 95 5 10 1 95 5 11 1 20 80 13 1 20 80 13.5 1 95 5 16 1 95 5 5、实验谱图和加标回收率 mAU 图1：果汁空白基质过柱色谱图 mAU 图2： 0.1ppm 展青霉素标准溶液色谱图 图3：添加水平 50 ug/kg 的果汁基质中色谱图 图4： 0.2ppm 展青霉素标准溶液色谱图 图5：添加水平 100 ug/kg 的果汁基质中色谱图 样品加标回收率实验结果 样品名称 化合物(中文) 加标量(ug/kg) 平均回收率% 果汁 展青霉素 50 96.4% 果汁 展青霉素 100 98.7% 6、实验结论 由实验图谱和数据可得，选择纳谱分析的 SelectCoreTM MAX 150mg/6mL固相萃取柱和 ChromCoreTM AQC18 5um， 4.6x150mm， 使得实验不仅操作简单，回收率较高，且目标物质出峰时间快，峰形分离度较好。 由此可得，本实验符合检测标准，并为检测食品中展青霉素的残留检测提供了一个良好的参考。 纳谱分析NanoChrom纳谱分析技术(苏州)有限公司Phone： E-mail： customerservice@nanochrom.com Web： www.nanochrom.com 选择纳谱分析的SelectCoreTM MAX 150mg/6mL固相萃取柱和ChromCoreTM  AQ C18  5μm，4.6×150mm，使得实验不仅操作简单，回收率较高，且目标物质出峰时间快，峰形分离度较好。由此可得，本实验符合检测标准，并为检测食品中展青霉素的残留检测提供了一个良好的参考。