缩宫素注射液中镉、铅、砷、汞等14种元素含量检测方案(ICP-MS)

SSL-CA19-019Excellence in Science Excellence in ScienceICPMS-101 http：//www.shimadzu.com.cn上海市徐汇区宜州路180号华鑫天地二期C801栋咨询电话：021-34193996Hotline： 021-34193996Building C801， No.180 Yizhou Road， Shanghai ICPMS-2030测定缩宫素注射液中的杂质元素 |CPMS-101 摘要：本文参考 ICHQ3D 元素杂质指南及 USP<233> 对杂质元素的测定方法，利用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定了缩宫素注射液中杂质元素的含量。实验结果表明：各元素的相关系数r>0.9998，加标回收率在99~111%之间，满足USP<233>对样品加标回收率70%~150%的要求，6份样品0.5倍限量值加标回收率的相对标准偏差小于3%，方法的精密度值 (%RSD) 完全符合 USP<233>规定每种目标元素的RSD值小于20%的要求，该方法操作简便、快速，样品前处理简单，可以满足 ICH Q3D 中对注射药物中杂质元素限量值的测定要求。 关键词： ICHQ3D USP<233> ICP-MS 缩宫素注射液杂质元素 缩宫素是垂体后叶激素的主要成分，由6个氨基酸组成的环状结构和3个氨基酸组成的侧链连构构成。作为妇产科药物，缩宫素具有间接刺激子宫平滑肌收缩的作用，临床用于引产、催产、产后及流产后因宫缩无力或缩复不良而引起的子宫出血。近年来，药物的杂质残留，越来越受到医药界的关注，不仅仅是由于某些杂质具有毒性，而且这些杂质会对药品的稳定性、有效期限产生不利的影响，甚至引发有害的副作用。 因此，建立一种处理简单、快速、灵敏度高的方法来对注射药物中的金属元素进行测定显得尤为必要。 本文参考 ICH Q3D 的限量要求和 USP <233>方法规程，采用直接稀释法处理注射液样品，使用岛津ICPMS-2030 测定了注射药物中多种杂质元素含量。该方法操作简单，定量准确，， 可以满足 ICH Q3D 对注射药物中杂质元素限量值的测定要求。 |实验部分 1.1仪器 岛津ICPMS-2030 电感耦合等离子体质谱仪 1.2实验器皿及式剂 实验所用器皿分别为塑料或玻璃材质，使用硝酸溶液(1+1)浸泡24小时后，用去离子水冲洗，干燥备用；实验所用 HNO为优级纯试剂，实验用水为超纯去离子水。 1.3样品前处理 移取1mL 试样于 100mL容量瓶中，加入2mLHNO3， 加入Au 溶液作为稳定剂(最终溶液中Au 浓度为1mg/L)，用超纯水定容至刻度线，摇匀，待测。同法制备样品空白溶液和样品加标溶液。 1.4仪器参数 等离子体参数： 高频功率：1.2kW等离子体气流速：8.0L/min辅助气流速： 1.1L/min载气流速：0.7L/min炬管类型： Mini雾化器类型：同心雾化室：旋流雾室温度：5℃采样深度：5.0mm高频频率：27.12MHz碰撞池参数：碰撞气种类：He碰撞气流速：6.0mL/min池电压：-21V能量过滤器电压：7.0V l结果讨论 2.1标准曲线溶液配制 根据药品剂型和每日最大剂量(≤10g/day) 定义目标元素限值“J”值为分析杂质元素的可接受浓度，即样品经前处理后待测元素在溶液中的最大限值。USP<233>规定了标准曲线系列为两个标准溶液和一个空白溶液，每个元素标准溶液高浓度为目标限值的1.5倍(即1.5J)，低浓度为目标限目的0.5倍(即0.5J)，待测元素的目标限值(J)。 利用2%的硝酸溶液配制空白溶液、0.5J和1.5J浓度的各个元素混合标准溶液，加入Au 溶液作为稳定剂(最终溶液中 Au 浓度为1mg/L)， 各元素的限量值及标准溶液浓度见表1。内标元素In、Bi浓度均为50ug/L， Ge、Sc浓度为500 pg/L，采用内标组件在线添加。 表1元素限值及标准曲线溶液浓度系列 元素 质量数(amu) 注射给药 PDE 元素限值 元素限值J 标准曲线系列|( (ug/L) (ug/day) (ug/g) (ug/L) 0 0.5J 1.5J 镉 111 2 0.2 2 0 1.0 3.0 铅 208 5 0.5 5 0 2.5 7.5 砷 75 15 1.5 15 0 7.5 22.5 汞 202 3 0.3 3 0 1.5 3.0 钴 59 5 0.5 5 0 2.5 7.5 钒 51 10 1.0 10 0 5.0 15 镍 60 20 2.0 20 0 10.0 30.0 铊 203 8 0.8 8 0 4.0 12.0 铱 191 10 1.0 10 0 5.0 15.0 188 10 1.0 10 0 5.0 15.0 铑 103 10 1.0 10 0 5.0 15.0 钉 99 10 1.0 10 0 5.0 15.0 硒 78 80 8.0 80 0 40.0 120.0 铂 194 10 1.0 10 0 5.0 15.0 备注：1.PDE为每日允许暴露剂量 (ug/day)； 2.根据10 g/day 的剂量及稀释100倍计算得到元素限值 (J) 2.2部分元素标准曲线如下 图1 As元素的标准曲线 r=1.00000 图2Cd元素的标准曲线r=1.00000 图3Hg元素的标准曲线 r=0.99998 图4Pb元素的标准曲线r=1.00000 2.3样品分析结果及加标回收率 按照实验方法，对空白溶液重复测定10次，取3倍强度的标准偏差除以曲线斜率求得各元素在溶液中的检出限；根据样品稀释倍数(100倍)，求得该方法的检出限； 测定样品中的杂质元素含量，每个样品重复测定3次； 根据 USP<233>的指导原则，向样品中加入0.5J限量的准准溶液，求出加标回收率，以考察方法的准确性。 表2样品分析结果及加标回收率 元素 内标 分析结果(ug/L) 0.5J加标测定值 RSD(n=3)/ 0.5J的加标回收率 方法检出限 (pg/L) (%) (%) (ug/L) 镉 115In ND 1.04 0.48 104 0.14 铅 209 Bi 0.21 2.81 0.79 104 0.08 砷 72Ge ND 7.70 1.05 103 0.97 汞 209 Bi ND 1.66 2.32 111 6.78 钴 45Sc ND 2.72 1.25 109 0.09 钒 45Sc ND 5.17 0.72 103 0.13 镍 Ge ND 10.8 1.78 108 1.08 铊 209Bi ND 4.14 1.68 104 0.02 铱 209Bi ND 5.22 1.64 104 0.02 209Bi ND 4.98 1.96 100 0.07 铑 115In ND 5.33 1.26 107 0.06 钉 115in ND 5.17 1.38 103 0.01 硒 72Ge ND 39.7 0.49 99 4.90 铂 209Bi ND 5.28 0.78 106 0.05 备注：ND未检出； 结果显示，岛津ICPMS-2030 质谱仪测定注射药物中的杂质元素含量，各元素的方法检出限远低于注射药物的含量限值，可以满足 ICH Q3D对注射药物的杂质元素的限量要求。 0.5倍的限量值的加标回叵率在99~111%之间，满足 USP<233>对样品加标回收率需要70%~150%的要求。 2.4方法精密度实验 为了验证本方法的重复性，取6份同样的样品，分别向样品中加入各元素的0.5倍限量值(即0.5J)，求出6份样品加标测定结果的RSD 值，确定方法的精密度，其结果见表3。 表3样品加标样测定结果和精密度 元素 加标样(0.5J)测定结果(pg/L) RSD (%) 1#样品 2#样品 3#样品 4#样品 5#样品 6#样品 镉 1.05 1.04 1.03 1.01 1.03 1.02 1.15 铅 2.80 2.82 2.80 2.72 2.73 2.91 2.48 砷 7.69 7.58 7.61 7.62 7.55 7.76 1.01 汞 1.66 1.67 1.63 1.58 1.64 1.67 1.90 钴 2.70 2.65 2.61 2.65 2.53 2.59 2.24 钒 5.16 5.11 5.00 5.14 4.90 5.01 1.94 镍 10.9 10.7 10.5 10.5 10.3 10.4 2.09 铊 4.12 4.13 4.10 4.05 4.05 4.16 1.06 铱 5.12 5.18 5.08 5.00 5.08 5.20 1.46 5.04 4.99 4.95 4.84 4.99 5.09 1.69 铑 5.42 5.31 5.30 5.27 5.28 5.17 1.54 钉 5.25 5.14 5.13 5.12 5.12 5.06 1.19 硒 39.7 40.1 40.0 40.3 39.9 40.6 0.81 铂 5.20 5.11 5.09 5.05 5.03 5.12 1.16 结果表明，6份样品0.5倍限量值加标样测定结果的相对标准偏差小于3%，即该方法的方密度 (%RSD)值完全符合USP<233>规定的标准，即每种目标元素的 RSD 值小于20%。 I结论 参考 ICH Q3D 元素杂南指南及 USP<233>对杂质元素的测定方法，利用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定了缩宫素注射液中杂质元素的含量。元素线性关系及重复性好，定量准确，各元素的相关系数r>0.9998，加标回收率在99~111%之间，6份样品0.5倍限量值加标回收率的相对标准偏差小于3%，各指标均符合USP<233>规定的标准。该方法操作简便、快速，样品前处理简单，可以满足 ICH Q3D 中对注射药物中杂质元素限量值的测定要求。 参考ICH Q3D 元素杂质指南及USP<233> 对杂质元素的测定方法，利用电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）测定了缩宫素注射液中杂质元素的含量。元素线性关系及重复性好，定量准确，各元素的相关系数 r＞0.9998，加标回收率在99~111% 之间，6份样品0.5倍限量值加标回收率的相对标准偏差小于3%，各指标均符合USP<233> 规定的标准。该方法操作简便、快速，样品前处理简单，可以满足ICH Q3D中对注射药物中杂质元素限量值的测定要求。