大黄中大黄素甲醚检测方案(液相色谱柱)

中国药典2010年版对应高效液相色谱方法图谱库(第一册引领分析科技斗技北京谱朋-企业QQ：40061 65163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 大黄分析 大黄的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L.唐古特大黄Rheum lunguticum Maxim.ex Balf.或药用大黄 Rheum officinaleBaill.的干燥根及根茎。秋末茎叶枯欠或次春发芽前采挖，除去细根，刮去外皮，切瓣或段，绳穿成串干燥或直接干燥。 【功能与主治】泻热通肠，凉血解毒，逐瘀通经。用于实热便秘，积滞腹痛，泻痢不爽，湿热黄疸，血热吐衄，目赤， 咽肿，肠痈腹痛，痈肿疔疮，瘀血经闭，跌扑损伤，外治水火烫伤；上消化出血。酒大黄善清上焦血分热毒。用于目赤咽肿，齿龈肿痛。热大黄泻下力缓，泻火解毒。用于火毒疮疡。大黄炭凉血化瘀止血。用于血热有瘀出血症。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-0.1%磷酸溶液(85：15)为流动相；检测波长为254nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备：精密称取芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对汉品、大黄索甲醚对对照品适量，加甲醇分别制成每1mL含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚各80pg，大黄素甲醚40ug的溶液；分别精密量取上述对照品溶液各2mL，混匀，即得(每1mL含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚各16ug，含大黄素甲醚8ug)。 供试品溶液的制备：取本品本末(过四号筛)约0.15g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL， 称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液5mL，置烧瓶中，挥去溶剂，加8%盐酸溶液10mL， 超声处理2分钟，再加三氯甲烷10mL，加热回流1小时，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取3次， 每次10mL， 合并三氯甲烷液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10uL，注入液相色谱仪，测定，即得。本品按干燥品计算，含芦荟大黄黄(C15H1005)、大黄酸(C5Hg0)、大黄素(C15H1c0s)、大黄酚(CisH1o04)和大黄素甲醚(C16H1205)的总量不得少于1.5%。 大黄 样品来源：本品为蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L.唐古特大黄Rheu tanguticum Maxim.ex Balf.或药用大黄 Rheumoficinale Baill.的干燥根及根茎。秋末茎叶枯萎或次春发芽前采挖，除去细刮，刮去外皮，切瓣或段，绳穿成串干燥或直接干燥。产地：甘肃。 对照照：大黄素(上海同田生物技术有限公司，批号：09021821，含量：99.37%)；大黄酸(上海同田生物物术有限公亏，批号：08072322，含量：97.242%)；大黄酚(上海同田生物技术有限公司，批号：09032731，含量：99.2692%)；大黄素甲醚(上海同田生物技术有限公司，批号：08080522，含量：98.686%)；芦荟大黄素(上海同田生物技术有限公司，批号：08081522，含量：97.276%)。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过四号筛)0.1501g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL， 称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液5mL，置烧瓶中，挥去溶剂，加8%盐酸溶液10mL，超声处理2分钟，再加三氯甲烷10mL，加热回流1小时，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取3次， 每次10mL，合并三氯甲烷液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10mL容量瓶中，加1.5 mL 0.1%磷酸，然后用甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 中国药典2010年版对应高效液相色普方法图谱库(第一册： 引领分析科科在北京谱朋QQ：40061 65163 大黄 对照品溶液的制备：精密称取芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品、大黄素甲醚对照品适量，加甲醇制成储备液。然后制成混标(其中每1mL含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚各16ug，含大黄素甲醚8ug， 溶液中甲醇：0.1%磷酸为85：15。) 色谱柱： Shim-pack XR-ODS II (3.0mm ×75 mm， 2.2 u m) 流动相：甲醇-0.1%磷酸(58：42) 柱温：65℃检测波长：254nm 流速：1.3 mL/min 进样量：4pL 仪器配置： UFLC-20ADXR高压泵 SPD-M20A二极管阵列紫外可见光半微量检测器 CTO-20AC柱温箱 CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC 自动进样器 芦荟大黄素的标准曲线 芦荟大黄素的重现性 No. 标准样品保留时间 峰面积 实际样品 保留时间 峰面积 1 23 1.561 105627105284 1.555 69328 1.555 69366 1.554 69410 1.560 1.563 105422 AverageRSD% 1.561 1054440.10 0.16 1.555 69368 0.04 0.06 大黄酸的标准曲线 大黄素的标准曲线 峰面积 大黄酸的重现性 大黄素的重现性 标准样品 实际样品 标准样品 实际样品 No. 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 No. 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 2.490 100580 2.449 72344 1 4.822 89367 4.779 66883 2 2.492 100444 2.454 72364 2 4.823 89173 4.778 66926 3 2.492 100027 2.456 72680 3 4.823 88862 4.788 66759 Average 2.491 100350.3 2.453 72463 Average 4.822 89134 4.782 66856 RSD% 0.05 0.29 0.15 0.26 RSD% 0.01 0.29 0.12 0.13 大黄酚的标准曲线 大黄素甲醚的标准曲线 大黄酚的重现性 大黄素甲醚的重现性 No. 标准样品保留时间 峰面积 实际样品 保留时间 峰面积 No. 标准样品保留时间 峰面积 实际样品 保留时间 峰而积 1 23 7.334 1206587.339 1 2 3 11.786 18824 11.744 30193 11.736 30216 11.732 30319 11.782 18754 1206497.332 120133 7.309 232992 2 7.313 234338 3 11.785 18830 AverageRSD% 7.335 1204800.05 0.25 7.313 2335550.06 0.30 AverageRSD% 11.784 18802 11.737 30242 0.05 0.22 0.02 0.22 中国药典word版exe版pdf版及培训资料精华帖http：//www.yaojia. org/forum. php?mod=viewthread&tid=fromuid= 色谱柱Shim-pack XR-ODS II (3.0 mm x 75 mm, 2.2μm)流动相:甲醇一0.1%磷酸(58:42)柱温: 65℃检测波长: 254 nm流速1.3 ml/min 进样量4μL