甘草中甘草苷检测方案(液相色谱柱)

、中国药典2010年版对应高效液色谱方法图谱库(第一册)引领分析科技在北京朋raQQ汕4006165163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 甘草分析 甘草的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat.或光果甘草Glycyrrhizaglabra L. 的干燥根及根茎。春、秋二季采挖，除去须根，晒干。 【功能与主治】补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药。用于脾胃虚弱，倦怠乏力，心悸气短，咳嗽痰多，脘腹、四肢挛急疼痛，痈肿疮毒，缓解药物毒性、烈性。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.05%磷酸为流动相B，按下表进行梯度洗脱；柱温35℃；检测波长为237nm。理论板数按甘草苷峰计算应均不低于5000。 时间(分钟) 流动相A(%) 流动相B(%) 0~8 19 81 8~35 19→50 81→50 35~36 50→100 50→0 36~40 100-19 0→81 对照品溶液的制备：取甘草苷对照品、甘草酸铵对照品适量，精密称定，加70%乙醇制成每1mL各含0.02mg、0.2mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇100mL， 密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率40kHz)30分钟， 取出，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液溶10uL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含甘草苷(C21H22O9)不得少于0.50%；甘草酸(C42H62O16)以甘草酸铵计不得少于2.0%。 甘草药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中甘草的含量测定以甘草苷和甘草酸铵为质量评价依据，甘草苷和甘草酸铵在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：检测波长在237nm时甘草苷和甘草酸铵吸收均较强，色谱图较好；在流动相组成为乙腈-0.05%磷酸系统梯度洗脱时，流动相的比例对甘草苷和甘草酸铵的分离，与相邻色谱峰的分离具有显著的影响，采用药典中流动相比例即能达到较好分离，柱温对甘草苷和甘草酸铵的峰形影响较大，经比较分析样品在40℃时有较好的分析效果，考虑到样品的稳定性及分析时间，本次采用40℃条件对甘草样品进行分析测定。 甘草 样品来源：本品为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch. 的干燥根及根茎。产地：河北。对照品：甘草苷、甘草酸铵(上海同田生物技术有限公司) 2010版中国药典word版exe版pdf版及培训资料精华帖 .中国药典2010年版对应高效液色谱方法图谱库(第一册) 引领分析科技在北京朋roaQQ4006165163 甘草 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇100mL， 密塞，称定重量，超声处理(功率250W， 频率40 kHz)30分钟， 取出，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：取甘草苷对照品、甘草酸铵对照品适量，精密称定，加70%乙醇制成每1mL各含0.02mg、0.2mg的溶液，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-3 (4.6x150 mm，5 um) 流动相：以乙腈为流动相A，以0.05%磷酸为流动相B 时间(分钟) 流动相A(%) 流动B(%) 0~8 19 81 8~35 19→50 81→50 35~36 50→100 50-0 36~40 100→19 0→81 柱温：40℃检测波长：237mm1流速：1.0mL/min进样量：10pL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-4 (4.6×150 mm，5um) 仪器配置： LC-20ADXR高压泵DGU-20A3脱气机SPD-M20A二极管列紫紫外可见光检测器CTO-20AC柱温箱 CBM-20A系统控制器SIL-20AC自动进样器 标准样品 实际样品 引领分析析技.在北尿谱牙oaQQ40061 名称 保留时间(min) 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 甘草苷 7.817 1444483 79496 4169 1.05 甘草酸铵 32.904 755880 74629 227733 1.05 甘草苷标准曲线 甘草酸铵标准曲线 浓度mg/L 浓度mg/L 重现性数据如下 甘草苷： No. 标准样品 保留时间 峰面积 实际样品 保留时间 峰面积 1 7.817 1444483 8.008 1070103 23 7.847 14475597.825 1448074 8.002 1061568 7.998 1072473 AverageRSD% 7.829 14467050.19 0.13 8.003 1068048 0.06 0.53 甘草酸铵： No. 标准样品保留时间 峰面积 实际样品 保留时间 峰面积 1 2 3 32.904 75588032.910 755251 33.029 493858 33.049 490103 32.970 756090 33.069 493319 AverageRSD% 32.928 755740 33.049 492426 0.11 0.05 0.06 0.41 *本数据山北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 http：//www.yaojia.org/forum. php?mod=viewthread&tid=fromuid= 色谱柱Inertsil ODS-3 (4.6x150mm,5μm)流动相:以乙腈为流动相A ，以0.05%磷酸为流动相B流动相 0-8min,B:81%,8-35min,B:81%-50%,35-36min,B:50%-0%柱温40℃检测波长237nm 流速1.0 mL/min 进样量10μL此条件同样适用于Inertsil ODS-4 (4.6 x 150 mm, 5μm)