氨酚伪麻片中各组分的含量检测方案(液相色谱仪)

氨酚伪麻片是由对乙酰氨基酚、盐酸伪麻黄碱、泊洛沙姆、干淀粉、可压性淀粉、硬脂酸镁组成的复方制剂。厂报临床研究用质量标准采用分光光度法测定对乙酰氨基酚和盐酸伪麻黄碱，两组分互有干扰，经试验采用HPLC法同时测定两组分含量，取得满意结果。 1　仪器与试药 大连依利特P200Ⅱ型液相色谱仪或P230液相色谱仪；所用试剂均为色谱纯。对照品对乙酰氨基酚、盐酸伪麻黄碱均由中国药品生物制品检定所提供。 2　色谱条件 色谱柱Nucleosil C18(4.6 mm×150 mm,5 μm)，中国科学院大连化学物理研究所；流动相为pH4.6庚烷磺酸钠溶液(含0.005 mol.L-1庚烷磺酸钠和0.05 mol.L-1磷酸二氢钾的溶液，用5 mol.L-1氢氧化钠溶液或1 mol.L-1盐酸调pH至4.6)－乙腈(85∶15)；检测波长214 nm；理论塔板数按盐酸伪麻黄碱峰计算应不低于3000；对乙酰氨基酚与盐酸伪麻黄碱峰的分离度应符合要求。色谱图见图1。 3　线性关系试验 3.1　对乙酰氨基酚　精密称取对乙酰氨基酚对照品124.5 mg于100 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；分别精密量取此液0.2、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL于10 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，取20 μL注入液相色谱仪，记录峰面积，回归方程为： A=390.00+327.90C　r=0.9999 3.2　盐酸伪麻黄碱　精密称取盐酸伪麻黄碱对照品7.98 mg于100 mL量瓶中，按“3.1”项下操作，回归方程为： A=59.10+258.30C　r=0.9998 4　回收率试验 精密称取对乙酰氨基酚对照品约125 mg、盐酸伪麻黄碱对照品约7.5 mg于100 mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，即得对照品溶液。 精密称取已准确测定含量的样品片粉适量(约相当于对乙酰氨基酚125 mg或盐酸伪麻黄碱7.5 mg)，共6份，分别置250 mL量瓶中，精密加入对照品溶液2.0 mL，用流动相溶解并稀释至刻度，照“样品测定”项下的方法分别测定对乙酰氨基酚与盐酸伪麻黄碱，计算平均回收率(n=6)，对乙酰氨基酚为100.2 %(RSD为1.2 %)，盐酸伪麻黄碱为100.4 %(RSD为1.6 %)。 5　精密度与稳定性试验 取对照品溶液与样品溶液各进样20 μL，外标法测定，计算两组分含量，同一批样品中对乙酰氨基酚和盐酸伪麻黄碱的RSD分别为0.51 %及1.6 %，n=10；另取对照品溶液与样品溶液分别于0、4、8、12、24、48 h(室温25　℃)各进样20 μL，结果3批样品中对乙酰氨基酚与盐酸伪麻黄碱的RSD分别为0.47 %及0.8 %、0.51 %及0.9 %、0.49 %及0.8 %，n=6。 6　样品测定 取本品20片，精密称定，研细，精密称取细粉适量(约相当于盐酸伪麻黄碱7.5 mg)，置250 mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5 mL于10 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取20 μL注入液相色谱仪，记录峰面积，由回归方程计算，求得样品含量。见表1。 7　讨论 　　本文研究了氨酚伪麻片的HPLC法，不经分离直接测定两组分含量，操作简便，重现性好，专属性强。辅料不干扰测定。调节仪器参数及样品浓度，在信噪比为3∶1时，测得对乙酰氨基酚与盐酸伪麻黄碱的最低检出量分别为16 ng及48 ng。