金荞麦中表儿茶素检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 金荞麦分析 金荞麦的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为蓼科植物金荞麦Fagopyrum dibotrys (D. Don ) Hara 的干燥根茎。 功能与主治】清热解毒，排脓祛瘀。用于肺痈吐脓，肺热喘咳，乳蛾肿痛。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.004%磷酸溶液(10：90)为流动相；检测波长为280nm。理论板数按表儿茶素峰计算均应不低于6000。 对照品溶液的制备：取表儿茶素对照品适量，精密称定，加流动相制成每1mL含25ug的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粗粉约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50 mL，密塞，精密称定，放置1小时，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，精密量取续滤液25mL，减压浓缩(50~70℃)至近干，残渣加乙腈-水(10：90)混合溶液分次洗涤，洗液转移至10mL量瓶中，加乙腈-水(10：90)混合溶液至刻度，摇匀，离心(转速为每分钟3000转)5分钟，精密量取上清液5 mL， 加于聚酰胺柱(30~60目，内经为1.0 cm， 柱长为15cm，湿法上柱)，加水50mL洗脱，弃去去液，再用乙醇100 mL洗脱，收集洗脱液，减压浓缩(50~70℃)至近干，残残用乙腈-水(10：90)混合溶液稀释至刻度，摇匀，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供品溶液20pL，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含表儿茶素(CisH，40，)不得少于0.020% 2.金荞麦药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中金荞麦的含量测定以表儿茶素为质量评价依据，其在Inertsil ODS-3(4.6×150 mm， 5pm)中的色谱特点为：在流动相组成为乙腈-0.004%磷酸系统时，流动相的比例对表儿茶素及相邻色谱峰的分离没有显著的影响，因此选择乙腈比例在8~12%(v/v)之间均可以获得较好的分析效果；柱温对枸橼酸的保留时间及与相邻色谱峰的分离度影响很小。经过考察，在流动相乙腈-0.004%磷酸比例为10：90，柱温35℃的色谱条件下能得到较满意的分析效果。使用Inertsil ODS-4(4.6×150 mm， 5 um)柱亦可得到良好分析效果。 金荞麦 样品来源：本品为蓼科植物金荞麦Fagopyrum dibotrys (D. Don) Hara 的干燥根茎。产地：浙江 对照品：表儿茶素(上海同田生物技术有限公司，批号：09041326，含量：98%) 供试品溶液的制备：取本品粗粉约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50 mL，密塞，精密称定，放 置1小时，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，精密量取量滤液25mL，减压浓缩(50~70℃)至近干，残渣加乙腈-水(10：90)混合溶液分次洗涤，洗液转移至10mL量瓶中，加乙腈-水(10：90)混合溶液至刻度，摇匀，离心(转速为每分钟3000转)5分钟，精密量取上清液5 mL， 加于聚酰胺柱(30~60目，内经为1.0 cm， 柱长为15 cm，湿法上柱)，加水50 mL洗脱，弃去水液，再用乙醇100 mL洗脱，收集洗脱液，减压浓缩(50~70℃)至近干，残渣用乙腈- 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163水(10：90)混合溶液稀释至刻度，摇匀，即得。 对照品溶液的制备：取表儿茶素对照品适量，精密称定，加流动相制成每1 mL含25ug的溶液，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-3 (4.6×150 mm， 5 pam) 推荐使用条件范围： 流动相：乙腈-0.004%磷酸(10：90)柱温：35℃流动相：乙腈-0.004%磷酸(8~12：92~88)检测波长：280 nm柱温： 33~40℃流 速：1.0 mL/min检测波长：280nm进样量：：10pL流 速：1.0mL/min仪器配置：LC-20ADXR高压泵SPD-M20A及管管阵列紫外可见光检测器DGU-20A，脱气机CTO-20AC柱温箱CBM-20A 系统控制器SIL-20AC 自动进样器 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150 mm， 5 pm) 对照品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 表儿茶素 19.705 493200 15872 9248 1.08 表儿茶素标准曲线 重复性数据如下： 表儿茶素 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 19.726 493099 19.721 277294 2 19.705 493200 19.793 277582 3 19.762 492242 19.766 278132 Average 19.731 492847 19.760 277669 RSD% 0.15 0.11 0.19 0.16 浓度 mg/mL *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-3 (4.6 x 150 mm, 5um)流动相：乙腈-0.004%磷酸(10:90)柱温：35°C检测波长：280 nm流速：1.0 mL/min进样量：10ul